Бактериальное заражение (скисание,брожение итд), плесень и вирусы
MUSHROOM GENETICS
Список
- Бактериальная контаминация (закись, слизь, брожение)
- О бактериальном заражении на сухом зерне
- Бактериальное заражение на этапе монотуба
- Плесень
- Паутинная плесень или плесень Dactylium (Hypomyces sp.)
- Зеленая плесень - Trichoderma harzianum, Trichoderma viride, Trichoderma koningii
- Коричная (Коричневая) плесень - Chromelosporium fulva (Peziza ostrachoderma)
- Красная - Sporendonema purpurescens (Geotrichum candidium)
- Розовая - Neurospora
- Желтая - Sepedonium spp.
- Черная борода - Doratomyces spp.
- Сине-зеленая плесень - Penicillium spp (Пеннициловые)
- "Негра" - Aspergillus sp.
- Булавочная - Rhizopus spp.
- Гипсовая и мучная плесень Papulaspora byssina, Thielavia thermophila, Botryotrichum piluiliferum, Trichothecium spp., и многие другие
- Мокрые пузыри - Mycogone perniciosa
- Сухие пузыри - Verticillium
- Pseudomonas tolaasii (Коричневые/бурые коросты)
- Навозник - Coprinellus domesticus.
- Вирусы у грибов
- Заключение
Бактериальная контаминация
К «скисанию», а правильнее сказать к бактериальной контаминации (БК), приводит неправильная стерилизация зерна, использование не самозатягивающихся инокуляционных портов и неправильный набор стерильного воздуха в шприц на этапе забора мицелия из пробирки.
Характерные признаки БК:
Зерно выглядит мокрым, склизским (исключение: гречка)
Со временем зерно прижимается ко дну
Мицелий не растёт, а если очаги появились, быстро перестают развиваться
Характерный запах - скисания, брожения или ацетона (запах есть не всегда и зависит от типа попавшей в банку бактерии)
Часто можно прочитать что БК вызывается переваренным зерном, длительным обрастанием, неправильной температурой, высокой влажностью зерна, или чем либо ещё - это не так.
Единственная причина это то, что в ваше зерно, которое должно быть стерильным, каким-то образом попала бактерия.
Разберём подробнее самые часто встречающиеся заражения.
Сенная палочка - Bacillus subtilis
Скисание вызывает попадание сенной палочки на питательный субстрат.
Bacillus в основном размножаются путем простейшего деления клеток. В неблагоприятных условиях , особенно при повышенной температуре, в каждой родительской клетке формируется значительно более усиленная спора - эндоспора, которая может выживать при высокой температуре значительно дольше , чем родительская клетка.
Наиболее практичный метод для избавления от эндоспор предполагает замачивание зерна при комнатной температуре на 12 - 24 часа перед стерилизацией. Все жизнеспособные эндоспоры прорастают за этот период времени и становятся уязвимыми для стандартных стерилизационных процедур. Новые эндоспоры не сформируются во влажной среде покоящейся банки с зерном.
Чтобы спора не попала уже в стерильное зерно, следите за шприцем во время забора мицелия, если есть шанс что втянули неочищенный воздух, начинайте сначала.
Так же кроме скисания возможно брожение, внешне выглядит оно примерно так же но более склизско.
Брожение осуществляют многие микроорганизмы, так называемые бродильщики, как прокариотические, так и эукариотические, например, дрожжи рода Saccharomyces проводят спиртовое брожение.
Если внешние признаки не убедительны, но роста мицелия не наблюдается несколько недель то необходимо поставить банку на стол опрыскать всё вокруг смесью Бриллианта и воды, отклеить омнипор и понюхать воздух из банки.
Однако стоит учитывать, далеко не все микроорганизмы производят запах, очень много бактерий могут остановить рост без запаха, ориентируйтесь на внешний вид зерна и скорость роста мицелия.
Подробно о том как утилизировать содержимое банок если они всё же заражены, тут:
О пересохшем зерне
Скорее всего из-за того, что гречка и пшеница хорошо удерживают внутри себя воду, за счёт чего не дают питаться ею бактериям, на них почти невозможно почувствовать запаха скисания или брожения, если они пересушены, внешне выглядит так будто рост просто остановился без видимых причин. Чтобы убедиться в том, что это точно БК нужно влить в банку воды по инструкции 3.2.11, когда воды станет в достатке, бактерии начнут делиться более интенсивно и признаки заражения проявят себя, либо банка начнёт обрастать.
Бактериальное заражение на этапе монотуба
На этапе кейсинга обросших банок в монотуб, а так же уже после кейсинга он тоже может заразиться.
Характерным признаком заражённого монотуба является то, что мицелий на зерне становится более плотным, а так же останавливается его рост.
Если монотуб стоит на обрастании 5-7 дней и не развивается, нужно отогнуть угол крышки и понюхать.
Чтобы заражения не произошло уделяйте больше внимания чистоте помещения в котором происходит кейсинг, используйте перчатки, маску и халат, если это не помогло можете собрать или приобрести лампу для кварцевания помещения перед кейсингом.
Работая с бактерицидными лампами, всегда соблюдайте методы предосторожности!
Не смотрите на них!
Не облучайте ими открытые участки тела!
Если чувствуете запах озона в воздухе, дайте время ему уйти и только после этого приступайте к работе!
Плесень
Есть несколько видов плесени которые особенно опасны для гроверов.
На начальном этапе, если замечен очаг плесени его можно удалить, для этого накройте его вискозной салфеткой смоченной в перекиси водорода (это не даст спорам разлететься) и подковырните субстрат столовой ложкой в радиусе 1.5 - 2 см, удалите пораженный участок обернув его салфеткой, не разворачивая!
Не давайте спорам разлететься в помещении!
Если очагов много, или плесень уже покрыла блок, всё что вы можете это максимально быстро избавиться от него, желательно не в том же помещении в котором планируете дальше гровить, опрыскайте весь монотуб перекисью водорода, и выкидывайте всё содержимое в пакет, на балконе или открытом воздухе.
Паутинная плесень или плесень Dactylium (Hypomyces sp.)
По покровному грунту (кейсингу) разрастается мицелий напоминающий по форме кусок ваты. Когда этот мицелий достигает поверхности растущего гриба, он покрывает его тонкой паутинкой, что приводит к загниванию. Так же паутинная плесень может паразитировать на грибах растущих в дикой природе. Паутинная плесень выглядит темнее обычного мицелия.
Цвет ее по большей части - ближе к серому, нежели к белому. Иногда сложно бывает объяснить эти различия в цвете тому, кто не видел эту плесень собственными глазами. Есть и другие отличительные особенности - например , бросающаяся в глаза скорость роста.
Маленького участка заражения размером с копейку достаточно для того, чтобы покрыть весь покровный грунт за день - два.
Зеленая плесень - Trichoderma harzianum, Trichoderma viride, Trichoderma koningii
Зеленая плесень вызываемая Trichoderma harzianum (триходерма) может быть описана как агрессивный, белый мицелий, растущий по покровному грунту и по плодовым телам грибов, приводящий к загниванию.
Со временем образуется огромная масса ярко-зеленых спор. Сильно зараженный этой плесенью компост быстро теряет питательные вещества и выдыхается.
На данный момент это наиболее серьезное заболевание в грибной индустрии повсеместно. Многие грибоводы сыпят соль на те места компоста, где обнаруживается зеленая плесень.
Для профилактики этого вида заражений обязательны стерилизационные и дезинфекционные работы. Столы, посуда , стены, пол и т.д. , все должно подвергаться очистке, как можно более тщательной, иначе вы уже никогда не избавитесь от триходермы.
В продаже имеются средства для такой обработки. Посреди прочих , в качестве основного ингридиента в их состав могут входить хлор- , йод- , фенол- или аммиак-содержащие вещества.
Дезинфеканты поверхностей используются в грибоводстве повсеместно - от дезинфекции оборудования до мытья помещений ; для ванночек для обуви. Других представителей Trichoderma можно опознать по тому факту, что они не так агрессивны как T. harzianum.
Как сообщают, T. viride производит токсины, которые растворяют стенки клеток грибов.
Trichoderma часто ошибочно принимается за Penicillium или Aspergillus (и, соответственно, наоборот); Выглядят все три вида очень похоже , и бывает сложно их различить, если только у вас нет микроскопа.
Коричная (Коричневая) плесень - Chromelosporium fulva (Peziza ostrachoderma)
Цвет этой плесени варьирует от желтого до желто-коричневого или коричного. Растет чрезвычайно быстро, образуя округлые колонии. Этот вид очень распостранен в почвах, и часто "расцветает" на отсыревшей древесине.
Этот вид довольно часто встречается на плохо стерилизованной почве, споры легко разносятся воздухом.
Красная - Sporendonema purpurescens (Geotrichum candidium)
Этот организм поселяется на субстрате. В процессе роста и созревания спор, цвет плесени меняется с белого до розового, красного и затем грязно-оранжевого. Растет данный вид достаточно медленно, и при этом является достаточно редким видом заражения потому что растет за счет специфичного набора жиров в субстрате.
Розовая - Neurospora
Neurospora растет быстро, и иногда достаточно лишь 24 часа для того, чтобы обросла целая чашка Петри. Распостранена повсеместно, поселяется на навозе, почве и на загнивающием растительном материале. Из-за того, что розовая плесень может прорастать сквозь ватные тапоны и фильтры, достаточно одной зараженной банки, пусть даже и закрытой (но с фильтром для воздуха), чтобы заразить остальные банки в лаборатории.
Такое обычно случается, если фильтры или ватные тампоны слишком сырые, или влажность снаружи очень высока. Кроме того, споры Neurospora начинают прорастать при повышенных температурах. Наиболее часто на плодовых телах грибов селится Neurospora sitophila, разрушительный контаминант который весьма сложно извести.
Все зараженные культуры должны быть вынесены из помещения и уничтожены. Обязательной является процедура чистки помещения. Если заражения продолжают происходить, следует уничтожить все культуры и начать заново.
Желтая - Sepedonium spp.
Эта белая, разреженная плесень растет в субстрате во время колонизации его мицелием. С возрастом она меняет цвет от желтого до желто-коричневого. Споры распостраняются по воздуху и, имея толстые стенки , могут выживать при высоких температурах. Поселяется на субстратах, которые можно было бы считать идеальными для выращивания грибов.
Черная борода - Doratomyces spp.
Этот организм производит черные , пылеподобные споры, которые разлетаются по воздуху как дым, когда их потревожат.
Усваивает простые углеводы , но так же может потреблять и лигнин.
Doratomyces, Aspergillus, и Penicillium производят на свет настолько большое количество спор, что могут возникнуть различные проблемы дыхательного характера - першение в горле и носе, заложенный нос.
Часто встречается в ванной, или на отсыревших балконах.
Сине-зеленая плесень - Penicillium spp (Пеннициловые)
Множество зелено-голубых спор появляются на поверхности субстрата. Похожа на Aspergillus. Благоприятствующие условия для размножения и роста такие же как и у черной бороды.
Penicillium spp. живет за счет простых углеводов, таких как целлюлоза, крахмал, но может перерабатывать жир, а также лигнин. Этот вид плесени весьма распостранен при выращивании специализированных грибов - особенно это касается агаровых и зерновых сред. Споры переносятся по воздуху и распостранены повсеместно.
"Негра" - Aspergillus sp.
Весьма обычная для агаровой или зерновой культуры плесень. Растет на большинстве органических субстратов, но предпочитает нейтральные или слегка щелочные субстраты. Часто использующиеся деревянные поддоны и стелажи для хранения субстрата - те объекты, на которых Aspergillus может поселиться.
Разные виды различаются по цвету от желтого до зеленого или черного. Наиболее часто встречаемые экземпляры Aspergillus зеленоватого цвета и очень похожи на Penicillium.
Aspergillus niger, как следует из его имени, черный; Aspergillus flavus желтый; Aspergillus clavatus зелено-голубой; Aspergillus fumigatus серо-зеленый; а Aspergillus veriscolor может иметь вообще различную окраску (от зеленоватого до розоватого или желтого).
Эти удивительные формы жизни меняют свой цвет и внешний вид в зависимости от субстрата на котором растут.
Наверх к списку заражений
Некоторые виды Aspergillus являются термофилами, а некоторые - весьма токсичны.
Aspergillus flavus, желтая или слегка желтоватая плесень вырабатывает в процессе своей жизнедеятельности афлатоксины - смертельно опасный яд.
A. flavus селится на зернах с высоким содержанием масла, хранящихся в жарком и влажном климате. Из всех биологически производимых ядов, афлатоксин является самым сильным гепатоканцерогеном обнаруженным на сегодняшний день. (согласно "Ядовитым растениям и животным СССР", смерть наступает в течении нескольких суток из-за необратимых поражений печени). Токсичность этих видов была по большей части неизвестна вплоть до 1960-х, когда в Британии неожиданно скончались 100,000 турок.
Из-за того, что A. flavus растет практически на любом зерне, этот вид плесени должен стать предметом пристального внимания со стороны микологов и людей выращивающих грибы в домашних условиях. Aspergillus fumigatus и Aspergillus niger, два устойчивых к повышенной температуре вида, которые в повышенных концентрациях опасны для человека. Существует один из видов удушья , называемый аспергилиосис или "Болезнь грибовода" ("Mushroom Worker's Lung Disease").
Использованный субстрат - обычное место, где можно найти Aspergillus fumigatus.
Наверх к списку заражений
Булавочная - Rhizopus spp.
Очень быстро растущий низший гриб. Когда настает время рассеивания спор, этот организм формирует много длинных , антенноподобных гифов , каждый из которых украшен черной головкой (как булавка - отсюда и название).
Растет за счет простых улеводов. Как Aspergillus и Penicillium, представители данного вида в основном поражают зерновые субстраты. Так же довольно часто встречается на соломе.
Гипсовая и мучная плесень - Papulaspora byssina, Thielavia thermophila, Botryotrichum piluiliferum, Trichothecium spp., и многие другие
Так же, как многие другие контаминанты , этот живет за счет избытка свободного, не переработанного термофильной микрофлорой, азота.
Довольно часто этих товарищей можно найти в новом, еще не готовом компосте - они образуют вытянутые гифы, напоминающие штукатурку или гипс.
Белая мучнистая плесень Botryotrichum piluiliferum образует плотные белые колонии. T. thermophila - как следует из ее названия - термофил, и эта отличительная черта данного вида может использоваться для идентификации этого контаминанта. T. thermophila может бурно разрастись в последние дни приготовления компоста. Наличие этой плесени говорит о том, что в процессе колонизации в субстрате были слишком жаркие для мицелия области, где он не мог нормально расти (эти области затем становятся черными). Коричневая мучнистая Papulaspora byssina образует плотные колонии коричневого цвета на компосте.
Мокрые пузыри - Mycogone perniciosa
Для грибов , пораженных этим контаминантом характерно наличие вздутой ножки и маленькой или деформированной шляпки.
Ткань с возрастом не диффиренцируется, становится некротической и мокрой, начинается загнивание с резким запахом
Желтые капли жидкости выделяются на пораженных грибах и на поверхности мицелия. При раннем заражении плодовые тела либо не формируются совсем, либо формируются с деформациями внешнего вида.
При позднем заражении грибы становятся коричневыми и могут превращаться в пузыри размером с грейпфрут.
Этот контаминант распространяется вместе с пылью, содержащейся в атмосфере, и спорами с кейсинга на кейсинг.
Описанное заболевание широко распространено в Китае однако встречается по всему миру.
Сухие пузыри - Verticillium
Заболевание вызывается Verticillium, который образует весьма липкие споры.
Симптоматика может меняться в зависимости от стадии развития гриба на момент заражения. 'Ранние' заражения примордий приводят к тому, что примордии не развиваются, становятся серыми/коричневыми (выделено красным). Инфицирование в более поздних стадиях приводит к утолщению ножки(выделено синим), особенно у основания, скрючиванию гриба, изгибанию шляпки, и изменению направления роста "шелушинок" на ножке гриба.
Инфицирование шляпки гриба случается на самых поздних стадиях развития гриба и проявляется в округлых пятнах на поверхности шляпки, изначально светло коричневого цвета, которые с возрастом становятся серыми.
Verticillium sp. часто заводится в почве, которая и является основным источником заражения. Тем не менее, достаточно часто инфекция переносится в кейсинге с грязью из под ногтей, мухами или при передаче оборудования одним микологом другому. Споры могут долгое время лежать, ожидая условий для прорастания; как только они соприкасаются с грибным мицелием, начинается их рост.
Из-за того, что споры весьма липкие, зараза распостраняется на частицах пыли по воздуху - часто из старого покровного грунта или старого, высохшего кейка.
Эта пыль может инфицировать свежий кейсинг. В зависимости от того, где произошло заражение (на теле гриба) можно судить о том, произошло оно на ранней стадии или на поздней. Например, поражение примордий говорит о том, что инфицирование произошло в момент кейсинга. Поражение на поздних стадиях может говорить о том, что инфекция была привнесена извне.
При попадании инфекции с мухами или водой, уже в третей волне до 30% грибных тел инфицировано, и, скорее всего, с последней волной будут инфицированы все тела.
Для избежания заражений этим видом, следует выполнять следующие процедуры:
* Избегать перемещения земли рядом с грибыми, особенно, при наличии сквозняков.
* Принимать меры для того, чтобы в вашей лаборатории не собиралась пыль.
* Очень важно избавиться от мух, если они есть.
* Инфицированные грибы должны быть осторожно удалены тряпочкой смоченной в дизинфиканте и брошены в емкость с дизенфикантом
* Столовая соль используется как угнетающий агент против Verticillium
Pseudomonas tolaasii (Коричневые/бурые коросты)
Характерным признаком этого заболевания грибов является позднее заражение, на этапе примордий или даже при формирования плодовых тел.
Ножка гриба покрывается наростами коричневого цвета которые вызывает Толаасин, токсин вырабатываемый бактерией.
Зараженный блок перестаёт плодоносить, заражённые грибы перестают развиваться. Вероятность получить следующие волны после заражения сильно падает.
Информации об опасности токсина или пораженных им грибов для людей не обнаружена.
Навозник - Coprinellus domesticus.
Споры этого гриба содержатся в воздухе повсеместно, часто встречается у гроверов живущих в частных домах.
Их симпатичные серые шляпки сами быстро разлагаются.
Этот гриб растет на целлюлозе (кокос/сено).
Вирусы у грибов
Вирусы грибов называются миковирусами. В настоящий момент вирусы выделены у 73 видов из 57 родов, относящихся к 5 классам, но, предположительно, в безвредном состоянии вирусы существуют у большинства грибов.
В общем эти вирусы представляют собой круглые частицы 30—45 нм диаметром, состоящие из множества субъединиц единственного белка, сложенных вокруг генома, представленного двуцепочечной РНК.
Как правило, вирусы грибов относительно безвредны. Некоторые грибные штаммы могут поражаться многими вирусами, но большинство миковирусов тесно связаны со своим единственным хозяином, от которого передаются его потомкам.
В данный момент признаётся 3 семейства вирусов грибов, а наиболее изученные миковирусы относятся к семейству Totiviridae.
Реакция гриба может быть различной: дегенерация мицелия и плодовых тел, изменение окраски, подавление спороношения.
Вирусные заболевания могут наносить ущерб грибоводческим предприятиям, например, вызывать побурение плодовых тел шампиньона, изменение окраски у зимнего опёнка, что снижает их коммерческую ценность.
Необходима обязательная тепловая обработка инструментария, помещений и всех деревянных настилов и поддонов , в которых мог находится инфицированный компост. Следует подвергать тепловой обработке в течении 6 часов при температуре не менее 63 С.
В 1962-ом году Холлингс первым обнаружил вирусы в грибах, и это было первое сообщение подтверждающее тот факт, что грибы могут быть инфицированны вирусом. Другой вирус, с липидной мембраной обнаруживается практически на всех гибридных рассадах - его действие пока не известно. В наше время ПЦР диагностика широко используется в грибоводами для раннего обнаружения инфекции.
Вирусы, если не производить должных профилактических мероприятий , могут очень быстро полностью парализовать работу вашего грибного хозяйства.
Заключение
Если вы всё сделаете правильно, большая часть этих заражений Вам никогда не встретится.
Вы должны понимать, что при правильной стерилизации зерна, при должной обработке помещения, а так же при использовании халата, маски для дыхания и шапочки на волосы вы минимизируете риски заражений.
Будьте аккуратны, не делайте лишних движений, используйте садовый распылитель, Бриллиант или его аналоги, соберите кварцевую лампу, всё это поможет справиться с заражениями.
О том как бороться с заражениями подробно написано в следующей главе.