Жидкая культура грибов

Что же такое жидкая культура грибов?

Питательная среда - это стерильная смесь воды и одного или нескольких специфических сахаров. Целью этой питательной смеси является создание условий для развития и роста мицелия после заражения спорами грибов. Другими словами жидкая культура грибов это плавающий мицелий в питательном бульоне. (Как приготовить жидкую культуру мы расскажем ниже).  Жидкая культура значительно облегчает инокуляцию субстратов. После того, как споры разовьются в питательном бульоне, этой богатой мицелием смесью можно инокулировать ваш субстрат или сохранить как посевной материал, по вашему выбору.

Каковы преимущества использования жидкой культуры грибов?

• Простые условия хранения, комнатная температура.
• Минимальный риск заражения контаминантами.
• Постоянное развите мицелия в питательной среде. Большой готовый объем посевного материала. 
• Более быстрый результат, культиватору больше не нужно ждать прорастания спор, что сокращает время инкубации как минимум на неделю. 
• Использование жидкой культуры сокращает время инкубации на субстрате.

Каковы недостатки использования жидкой культуры грибов?

• Технология для более продвинутых культиваторов, выше начального уровня.
• Стерильность питательной среды имеет решающее значение.
• Невозможность определения контаминации до инкубации на субстрате.

Как приготовить жидкую культуру грибов на основе ферментированного ржаного солода.

Если вы хотите узнать, как приготовить жидкую культуру, воспользуйтесь этим рецептом. Этот рецепт подходит для всех видов грибов.

Что вам понадобится:

• Герметичная емкость.
• Шприц на 10-20 мл.
• Иглы большого диаметра 2 шт.
• Вода высокой степени очистки.
• Один из следующих сахаров для смешивания с водой: мед, кукурузный сироп, кукурузный сахар, светлый солодовый экстракт, декстроза (глюкоза).
• Мы используем ферментированный ржаной солод.
• Ватные тампоны, диски.
• Скороварка для стерилизации.

Опытным путем было установлено что оптимальное соотношение солода к воде составляет 1\100.

1 грамм ферментированного ржаного солода на 100 грамм воды.

Пошаговое руководство по приготовлению жидкой культуры грибов.

1. В качестве нужной нам емкости мы будем использовать бутылку из-под медицинского физраствора. Она герметично закрыта резиновой пробкой которая зафиксирована металлической крышкой. Такая пробка предотвращает попадание воздуха и не откроется в скороварке при стерилизации. Также она удобна тем, что резина не оставляет открытых отверстий от иглы.

2. Дальше мы срываем металлическую пломбу и протыкаем резиновую крышку двумя иглами. Одна из них служит для циркуляции воздуха. Во вторую вставляем шприц и откачиваем ним весь физраствор. После этого с помощью того же шприца заливаем в бутылку чистую воду, примерно 20 мл. Слегка взбалтываем бутылку и выбираем воду опять. Так делаем несколько раз. Тем самым мы очищаем бутылку от физраствора который является соленой водой (хлорид натрия).

3. Емкость для питательной среды готова. Теперь приступим к изготовлению самой питательной среды. Для этого в стакан или банку наливаем 100 мл воды высокой очистки и добавляем 1 грамм ржаного солода. Тщательно перемешиваем раствор и несколько раз процеживаем его через ватный диск. Для уверенности можно сделать ватную канюлю на иглу и выбрать раствор через нее.

После этого заливаем готовый раствор в герметичную бутылку с помощью шприца.

4. Стерилизация. Накрываем крышку бутылки алюминиевой фольгой, помещаем наш раствор в скороварку и стерилизуем его 15-20 минут при температуре 120С при давлении 2 атмосферы. Это как правило максимум который выдает бытовая скороварка. В автоклаве температуру можно отрегулировать. Более длительная стерилизация и высокая температура приводит к карамелизации сахаров входящих в состав питательной среды. Такой раствор становится непригодным для развития мицелия.

Прежде чем открывать скороварку обязательно дайте ей остыть! Остывание лучше пусть происходит естественным путем. Если вы будете резко охлаждать скороварку банка может лопнуть от перепада давления и температуры.

5. Инокуляция. После полного остывания скороварки можно производить засев (инокуляцию) споровой культуры грибов в ваш стерильный питательный раствор.

Для этого вам нужна споровая взвесь и спиртовой тампон.

Протрите тампоном резиновую крышку и аккуратным движением проткните ее иглой шприца. Впрысните в бутылку споровую взвесь и резко выдернете иглу из крышки.

Инокуляция завершена.

6. Теперь нашу питательную среду нужно поставить в теплое место (25-28С) для инкубации мицелия. По истечении 4-5 дней вы увидите клеточные уплотнения похожие на слизь или “медузки”. Это и есть жидкая культура грибов, жидкий мицелий.

С этого момента рекомендуется ежедневно перемешивать мицелий круговыми движениями, чтобы он насыщался кислородом.

С каждым днем мицелия будет все больше и больше и скоро вы сможете отбирать его с помощью шприца для инокуляции ваших зерновых и других субстратов.

Как подготовить зерновой субстрат для инокуляции жидкой культурой грибов вы можете прочитать в этой статье.

7. Хранение. Жидкие культуры можно хранить в холодильнике 6-8 месяцев (или дольше) при 3-5С.

Мануал от Green Submarine