Выбираем зерно для спауна

Данная статья интересно тем, что в качестве примера рассматривается близкородственный гриб Строфария морщинисто –кольцевая, который тоже относится к классу вторичных сапрофитов, как и Псилоцибе кубенсис.

Спаун - не что иное, как носитель грибного мицелия, своего рода «семена» для выращивания грибов. Его изготовление было главной задачей в грибной промышленности, что достигается путем развития мицелия на соответствующей питательной среде (зерно) в контролируемых условиях окружающей среды. Почти во всех случаях носитель грибного мицелия представляет собойс стерилизованное зерно, которое является предпочтительным из-за его биохимических свойств и практических характеристик по сравнению с другими видами субстрата. Традиционно зерно пшеницы используется в качестве такого субстрата для производства спауна. К сожалению, постоянно растущий спроса на это зерно для потребления человеком оставляет мало возможностей для его использования в производстве зернового мицелия. Ряд наименее популярных зерен может быть использован для приготовления подобного носителя мицелия. Имея это в виду, мы исследовали различные виды зерна, а именно, ячмень (Hordeum vulgare), Кукуруза (Zea mays), овес (Avena sativa) и просо, а именно: итальянское просо (Setaria italica), африканское просо (Pennisetum typhoides), маленькое просо (Panicum miliare) и сорго (Sorghum vulgaris) против традиционно используемого зерна пшеницы (Triticum aestivum ) для эффективной колонизации вторичного субстрата (соломы) для гриба Строфария морщинисто – кольцевая (Stropharia rugosoannulata).

Методология проведения работы

Эта работа проводилась в лаборатории по исследованию грибов, колледже KSSPG, Айодхья, Файзабад (UP), Индия. Спаун гриба Строфария морщинисто – кольцевой был приобретен в отделе грибов отделения патологии растений сельскохозяйственного и технологического университета им. Чандра Шекхар Азад, Канпур, Индия. Зерномицелий для исследовательской работы был изготовлен по методике, приведенной ниже. Один килограмм злаков и проса промывают в отдельной ёмкости и замачивают на ночь (для пробуждения циста форм контаминантов и для набухания). На следующий день их варили в воде не менее 10-15 минут, пока они окончательно не набухли и часть зерна не «лопнула» (не более 10%). Затем воду сливают, и зернам дают остыть. К зернам добавляли два процента гипса и четыре процента карбоната кальция (мела) в качестве буфера. Полученную смесь упаковывали в пакеты с фильтрами для производства спауна и стерилизовали в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 ° C в течение 60 - 90 минут. После процесса стерилизации пакеты извлекли из автоклава. На следующий день их инокулировали 10-15 г маточного зерна гриба Строфария морщинисто - кольцевая в асептических условиях и инкубировали при температуре 24-27 °С до тех пор, пока грибной мицелий не колонизировал весь объём зернового субстрата. После того, как был получен зерновой маточник, пастеризована солома, её инокулировали 5% зернового маточника (от веса сухой соломы). Солома была приготовлена замачиванием промыванием в чистой воде и затем пастеризуют (60 ОС) в водном растворе формальдегида (500 частей на миллион частей воды) в течение 18 часов. Пакеты («рукава») с соломой затем инкубировали в камере при температуре 24 - 27 °С для роста мицелия и колонизации им соломы. Как только мицелий полностью колонизирует субстрат из пшеничной соломы, полиэтиленовые «рукава» удаляют, и поддерживается относительная влажность 85-95% с помощью увлажнителя. Температура плодоношения 12 – 17 °С . После образования плодовых тел, грибы собирают, осторожно «выкручивая» и вытаскивая их из соломы. Сбор грибов ведётся, учитывая их коммерческий стандарт (молодые грибы до разрыва вуали и спороношения).

Для этого эксперимента были полностью учтены все данные. Данные по урожайности были статистически проанализированы. Критическая разница (CD) была разработана с пятипроцентным уровнем вероятности.

Результат

Для создания спауна были использованы различного рода зерновые субстраты. После этого, зерномицелий использовали для инокуляции вторичного субстрата (соломы). Зерно действуют как резервуар углеводов, которые обеспечивают достаточное первоначальное питание для роста мицелия и обеспечивают средство для возможного равномерного распределения грибного инокулянта. Основным недостатком мелких зерен, таких как итальянское и африканское просо, является наличие меньшего количества пищевого ресурса в их эндосперме, и большая площадь поверхности зерна в данном количестве по сравнению с более крупными зернами (так как воздушных промежутков мало и на одинаковый объём мелкого зерна приходится гораздо больше, чем крупного). Таким образом, грибному мицелию потребовалось больше времени для того, чтобы колонизировать весь объём по поверхности зерен, что привело к задержке развития спауна, по сравнению с более крупным зерном. После инокуляции зерном соломенного субстрата, зерномицелий позволяет быстро распространяться мицелию из небольшого размера зерна, потому что мелкое зерно, такое как итальянское и маленькое просо, обеспечивают большее количество инокулянта на грамм спауна, они колонизируют субстрат раньше и дают более раннее плодоношение, чем более крупные зерна, т.е. кукуруза. Зерно среднего размера также оказалось лучше в вышеупомянутых условиях. Изменение урожайности показывает, что на плодоношение грибов сильно влияет не только вид вторичного субстрата, но и сам спаун, а точнее из какого зерна он приготовлен. Для колонизации соломы, вид зерна влияет решительным образом (как источник энергии для формирования мицелия), при малом запасе питательных веществ, срок колонизации субстрата удлиняться. Другим важным фактором является наличие необходимых химических элементов для здорового роста мицелия, а это напрямую зависит от вида использованного зерна.  В нашем исследовании зёрна овса, ячменя и сорго были найдены более продуктивными, чем другие. По статистике они были на одном уровне друг с другом.