Все, що ви хотіли дізнатись про стерилізацію, але боялись спитати

Під час вирощування грибів необхідна стерилізація, щоб знищити будь-які потенційно шкідливі або хвороботворні мікроорганізми. Це важлива практика, оскільки запобігає зараженню під час циклу росту. Оскільки температура є ключовим фактором стерилізації, існує три основні способи стерилізації: автоклав, скороварка та мікрохвильова піч. Сбогодні поговоримо про них детальніше та з'ясуємо в чому різниця.

Читайте в цій статті:

• Правила розміщення блоків з грибами
• Режими стерилізації
• Інокуляція та стерильність
• Стерилізація та пастерізація
• Субстратна ферментація – альтернативний підхід
• Як пастеризувати грибний субстрат

Правила розміщення блоків з грибами

1. Ємності з субстратом ставлять у стерилізатор не впритул, а на невеликій відстані одна від одної ярусами на решітках, щоб повітря могло циркулювати між ними. Таке розташування забезпечить рівномірний розподіл пари та нагрівання субстрату та значно скоротить час стерилізації. Якщо ємності розташувати впритул один до одного, то стерилізуватиметься не окрема тара вагою 1-3 кг, а вся партія субстрату вагою 50-100 кг і більше. На розігрів такої маси йде набагато більше часу. Блоки, розташовані по краях, стерилізуються нормально, а ті, що в центрі, не стерилізуються. Доведеться значно збільшити час стерилізації, а це може негативно позначитися на якості субстрату.
2. Після завантаження автоклава особливого значення набуває характер перерозподілу холодного повітря камери при введенні в неї пари. Якщо камеру погано продути, холодне повітря, що залишилося, може створити хибне враження надлишкового тиску пари. Тому дуже добре мати датчик температури в камері автоклава. При тиску в 1,5 атмосфери температура в камері повинна досягати 121°С. 
3. Зв'язок між температурою і тиском підкоряється закону Бойля, але тільки в тому випадку, якщо повітря в камері нагрівається рівномірно. Датчики дозволяють контролювати температуру як в камері, так і в підкладці. Насправді відлік початку стерилізації слід починати, коли різниця температур повітря і субстрату не перевищує 10°C. Температура субстрату досягає температури повітря в камері лише через 1-2 години! Зі збільшенням маси блоку вирівнювання температури ще більше сповільнюється.

Режими стерилізації

Для повної стерилізації твердих середовищ достатньо обробити їх при температурі 120-125 °С і тиску 1,5-2,0 атмосфери протягом 1-3 годин в залежності від об'єму стерилізатора і маси ємності з субстратом. . Чим більше стерилізатор і маса субстратного блоку, тим довша обробка. 

Час обробки також доводиться збільшувати при збільшенні харчової цінності субстрату або підвищеному зараженні сировини. Мінімальний час обробки 1 година (для невеликих блоків), максимальний 3-4 години. Більш тривала обробка призводить до надмірної стерилізації. При цьому тирса стає темно-коричневою, змінюється її запах. 

Субстрат стає токсичним для міцелію. Тривала стерилізація викликає складні хімічні реакції з перетворення рослинних терпенів на леткі олії та токсичні продукти, такі як фурфурол. Для невеликих кількостей, поміщених у скороварку, цей час може становити до 45 хвилин від початку закипання.

• Охолодження

Після вимкнення автоклава тиск і температура почнуть повільно падати. В ідеалі це повинно створити вакуум в камері. Якщо в автоклаві немає вакууму, то при охолодженні він засмоктує холодне, нестерильне зовнішнє повітря. бути відфільтрованим. Автоклав з перепадом тиску +2 атм. до -2 атм. (вакуум) забезпечує хорошу якість стерилізації, так як при такому перепаді тиску (4 атм.)

Активніше руйнуються біологічні структури. Перед відкриттям автоклава вирівняйте тиск, впустивши в камеру зовнішнє повітря через ватний фільтр. Приміщення автоклава повинно бути чистим, щоб запобігти забрудненню стерильних контейнерів (якщо немає прохідного автоклава). У невеликих обсягах можна залишити субстрат остигати в скороварці.

• Розвантаження

Відкрийте люк стерилізатора. Субстрат в контейнерах ще гарячий. Якщо автоклав є прохідним, ви можете дочекатися, поки субстрат охолоне, і вивантажити його в чисте місце. Якщо автоклав не безперервний і він вивантажується в брудну зону, то краще вивантажувати субстрат гарячим і поміщати його для охолодження в стерильну коробку під УФ-лампи. 

Внутрішня частина автоклава повинна бути максимально чистою. Субстрат іноді залишають охолоджуватися в автоклаві (на ніч). У цьому випадку повітря має надходити в автоклав через ватний фільтр.

Інокуляція та стерильність

Посів субстрату проводять у стерильному боксі з дотриманням всіх правил. Особи, які працюють у стерильній зоні, не повинні до цього залучатися до брудних робіт. При роботі в боксі надягають стерильний білий халат, шапочку, марлеву маску. 

Щоденна дезінфекція робочого столу в ящику та інструментів. Боксове приміщення дезінфікують перекисом водню (3-6% розчин) або гіпохлоритом натрію (2-5% розчин), або опромінення УФ-лампами. Контроль чистоти повітря в стерильній зоні проводять 1 раз на тиждень, в нестерильній – 1 раз на місяць (осадження колонієутворюючих частинок на поживне агаризоване середовище в чашках Петрі). 

Хороші стерильні умови створюються в робочій зоні ламінарних шаф за рахунок тонкого очищення повітря через фільтри HEPA або тканину Петрянова.

На стерильному субстраті за відсутності конкурентів розвиток міцелію йде швидко, що дає змогу зменшити норму висіву міцелію з 5% до 1-2% від вологої маси субстрату.

Міцелій повинен бути в стерильній упаковці, не переварений. Міцелій або розсипають по поверхні субстрату (поверхнева інокуляція), заливають у канал (глибинна інокуляція), або змішують рівномірно з субстратом, або шарами. Після інокуляції контейнери переносяться в чисту кімнату для інкубації з термостатом.

При стерильній технології хороші результати досягаються на деревних субстратах, збагачених азотними поживними добавками. У цьому випадку вихід гливи досягає 100% від сухої маси субстрату.

Стерилізація та пастерізація

Стерилізація є важливим процесом у світі вирощування грибів. Це необхідно для стерилізації обладнання, субстратів та інших середовищ для росту. Це процес, який потребує тривалих періодів тепла та тиску. Це вбиває небажані мікроорганізми, такі як гриби, бактерії та археї.

Чи можна пастеризувати? Яка різниця?

Пастеризація подібний до стерилізації процес, але проводиться з меншою інтенсивністю. При використанні тепла потрібні нижчі температури, менше часу та відсутність підвищеного тиску. Він не вбиває ВСІ мікроорганізми, а лише більшість. Пастеризація добре працює для субстратів без добавок, таких як солома, яка використовується для вирощування глив.

 • Пастеризація відбувається при температурі 160 градусів F протягом 1-2 годин.

 • Для стерилізації потрібна температура >250 градусів F при 15 PSI протягом 2 годин.

Стерилізація важлива для:

 • Спавн виробництва

 • Рідка культура

 • Очищення лабораторних інструментів/обладнання

 • Робота з агаром

 • Підготовка доповнених субстратів

 • Субстрати для особливо вибагливих сортів грибів

Чи можна стерилізувати без скороварки?

Не зовсім. Навряд чи ви коли-небудь досягнете таких же результатів без скороварки. Без підвищеного тиску неможливо досягти температур, необхідних для видалення шкідливих мікроорганізмів. Без підвищеного тиску навряд чи ви зможете досягти температури вище киплячої води (212F). Для знищення багатьох мікроорганізмів потрібна температура вище 250F.

Це означає, що можна наблизитися до стерилізації без скороварки. Це вимагає підтримки високих температур протягом ДОВГИХ періодів часу.

Найкращі альтернативи стерилізації за допомогою скороварки

Для стерилізації спочатку підготуйте свій субстрат. Переконайтеся, що він має правильний рівень вологості. Після цього помістіть його в термостійкий контейнер, як-от скляну банку або мішок для вирощування грибів. Це дає змогу стерилізувати його та перенести у приміщення лабораторії, не піддаючи його впливу повітря.

 • Пропарювання. Помістіть субстрат над каструлею з водою на 3-4 години. Таким чином ви можете наблизитися до стерилізації. Температура сягатиме приблизно 212F порівняно з 250F у скороварці.

 • Духовка. Поставте субстрат у духовку при 350°C на 3-4 години. Зачекайте, поки ваші матеріали повністю охолонуть у печі. Не ставте пластикові пакети для вирощування в духовку!

 • Електрична каструля. Під тиском Сьогодні багато людей мають такі. Вони схожі на суміш між каструлею та скороваркою. Зазвичай вони досягають лише 12 PSI, тому використовуйте 3-4 години в установці скороварки для досягнення найкращих результатів.

 • Ванна з гарячою водою. Спробуйте кип’ятити субстрат протягом 3+ годин. Не буде таким ефективним, як скороварка, але варто спробувати, якщо у вас є мотивація. Ви можете зробити це у великій бочці над пальником, якщо ви працюєте з великими кількостями.

 • Вапняна ванна. Занурте субстрат у 0,2% активовану вапняну воду на 12 годин. Це не техніка стерилізації, а спосіб проведення пастеризації. Це добре працює, якщо ви хочете підготувати солому для вирощування устриць.

Серйозні грибники використовують скороварки

Якщо ви серйозно займаєтеся вирощуванням грибів, купіть скороварку. Вони дешеві, легкодоступні та зроблять ваші зусилля виправданими. Шукайте дешеві в комісійних магазинах, в Інтернеті або на гаражних розпродажах. Вам не потрібне шикарне лабораторне обладнання, але принаймні інвестуйте в це невелике обладнання. Повірте, це заощадить ваш час і сили!

Що таке пастеризація та стерилізація субстрату?

Пастеризація — це процес нагрівання субстрату до температури від 65 до 85°C протягом 1,5-2 годин. Це не позбавить усіх домішок, але зменшить загальну популяцію інших бактерій до точки, коли вид грибів матиме перевагу.

Стерилізація - це процес нагрівання субстрату до температури вище 120°C під тиском, щоб знищити будь-які живі або сплячі забруднення.

Яка різниця між пастеризацією та стерилізацією?

Ключова відмінність полягає в тому, що стерилізація спрямована на знищення всіх бактерій і патогенів, тоді як пастеризація просто зменшує кількість конкуруючих організмів у субстраті.

Навіщо потрібно пастеризувати або стерилізувати субстрат?

Субстрати для грибів повинні бути вологими і насиченими поживними речовинами. На жаль, цвіль і мікроби також процвітають у цих умовах, як і багато інших речей, яких ми хочемо уникнути. Оскільки ці забруднення розвиваються набагато швидше, ніж міцелій гриба, потрібно щось зробити, щоб дати грибам перевагу в змаганні за колонізацію субстрату.

Коли пастеризація і стерилізація не потрібні

Не завжди потрібно стерилізувати або пастеризувати грибний субстрат. Це просто мінімізує ризик проблем росту або хвороб, пов’язаних із зараженням. Деякі гриби не можна вирощувати на стерильному середовищі, натомість їх потрібно вирощувати на відкритому повітрі або в насиченому поживними речовинами середовищі, яке не допускає стерилізації. 

Зміна кольору або гниття грибів, які ростуть у нестерилізованих середовищах для росту, є показниками того, що ваші гриби заражені. Забруднення може призвести до виснаження поживних речовин, доступних для грибів, або призвести до того, що гриби руйнуються, викликаючи їх гниття. Якщо ви вирощуєте їстівні гриби, майте на увазі, що якщо ви споживаєте гриби із зараженого середовища через розвиток бактерій, ви можете захворіти.

Субстратна ферментація – альтернативний підхід

Якщо ви починаєте вирощувати багато грибів, у вас можуть виявитися великі купи відпрацьованого субстрату, який ви не знаєте, як утилізувати. Величезна кількість субстрату може швидко накопичуватися, тому гарною ідеєю є план того, що з усім цим робити.

Якщо у вас є невелика кількість відпрацьованого субстрату, найочевиднішим варіантом є його компостування. Просто складіть субстрат назовні та дайте природному процесу розкладання піти своїм ходом. Є ймовірність, що ви отримаєте додаткову порцію або дві гриби у компостній купі! Незабаром ваш старий субстрат розкладеться на насичений суглинистий компост, який ви можете використовувати на своєму городі.

Також можна перепрофілювати субстрат для вирощування нових грибів. Наприклад, якщо у вас є багато відпрацьованих блоків шиітаке, ви можете розбити їх, повторно стерилізувати та використати органічний матеріал для вирощування нових шиітаке!

Майте на увазі, що вам майже напевно знадобляться добавки, і ваші врожаї з часом, швидше за все, впадуть.

Якщо у вас витрачено більше субстрату, ніж ви можете впоратися, дізнайтеся, чи пропонує ваше місто безкоштовну програму компостування, чи місцевий фермер дозволить вам побудувати велику компостну купу на своїй території.

Як пастеризувати грибний субстрат

Пастеризація використовується, щоб зробити субстрат відносно вільним від забруднень і забезпечити перевагу будь-якій грибній культурі.

• Види пастеризації

Пастеризацію можна здійснити декількома способами:

• Пастеризація у гарячій водяній ванні

Занурення субстрату в гарячу воду принаймні на одну-дві години є одним із способів його пастеризації. Для більшості підприємств пастеризації достатньо для вирощування грибів з мінімальним ризиком зараження.

Пастеризація відбувається при температурі від 70 до 80°C. Якщо температура підніметься вище цих рівнів, здорові бактерії будуть знищені, а шкідливі бактерії процвітатимуть. На водяній бані пастеризуйте субстрат, замочивши його на одну годину у воді з температурою 70°C.

• Холодноводна вапняна пастеризація

Хоча технічно це не пастеризація, це метод модифікації субстрату, щоб надати міцелію більше важеля. Цей метод заснований на ідеї, що грибний міцелій значно краще оснащений для обробки високих рівнів pH, ніж багато конкуруючих організмів.

Щоб скористатися цією технікою, занурте субстрат на 24 години у ванну з холодною водою, обробленою гашеним вапном. Це підвищує рН води, таким чином знищуючи забруднюючі речовини.

• Перекис водню

Сторонні мікроби та суперечки-конкуренти можна знищити перекисом водню без шкоди для міцелію. Замочіть субстрат приблизно на годину у воді. Злийте його, потім ретельно промийте у воді, перш ніж знову злити. Залиште солом’яний субстрат на добу на водяній бані з перекисом водню. На кожні 4,5 літра води використовуйте 1 літр перекису водню.

Після того, як ви закінчите, промийте та злийте воду на деякий час.