Влияние ионов металлов на карбоангидразоподобную активность внешних водорастворимых белков PsbP и PsbQ фотосистемы 2 - Биология и естествознание дипломная работа
Главная
Биология и естествознание
Влияние ионов металлов на карбоангидразоподобную активность внешних водорастворимых белков PsbP и PsbQ фотосистемы 2
Строение и функционирование фотосинтетического аппарата высших растений. Измерение концентрации хлорофилла, скорости фотосинтетического выделения кислорода, фотоиндуцированных изменений выхода флуоресценции хлорофилла. Приготовление диализных трубок.
посмотреть текст работы
скачать работу можно здесь
полная информация о работе
весь список подобных работ
Нужна помощь с учёбой? Наши эксперты готовы помочь!
Нажимая на кнопку, вы соглашаетесь с
политикой обработки персональных данных
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Министерство образования и науки Российской Федерации
Тульский государственный университет
Влияние ионов металлов на карбоангидразоподобную активность внешних водорастворимых белков PsbP и PsbQ фотосистемы 2
1.2 Строение и функционирование фотосинтетического аппарата высших растений
Важную роль в обеспечении стабильности Mn4CaO5 - кластера играет белок PsbO (марганец - стабилизирующий белок). В процесс образования кислорода также принимают участие: ион Ca2+; один или два иона Cl-. Предполагается, что в обеспечении этими ионами в процессе сборки водоокисляющего комплекса, а также в их сохранении в нормально функционирующей ФС-2 участвуют внешние водорастворимые белки ВОК PsbP и PsbQ.
2.Карбоангидразная активность фотосистемы 2
2.1 Карбоангидразная активность ФС-2 высших растений и её свойства
2.2 Носители карбоангидразной активности в ФС-2 высших растений
3. Роль ионов металлов в биохимических процессах высших растений
1. Выделение тилакоидов по методу Berthold, Babcock, Yocum, 1981 с модификациями Ford, Evans, 1983 (на основе оригинальной статьи)
2. Выделение частиц ФС-2 из тилакоидов по методу schiller и dau (2005 г)
3. Измерение концентрации хлорофилла
4.Измерение скорости фотосинтетического выделения кислорода
5. Измерение фотоиндуцированных изменений выхода флуоресценции хлорофилла
6. Получение и очистка белков PsbP и PsbQ
10. Измерение карбоангидрзной активности
1. Получение и характеристика препаратов ФС-2
1.1 Определение концентрации хлорофилла
1.2 Измерение скорости выделения кислорода
2. Получение и очистка белков РsbР и РsbQ
2.3 Разделение белков методом ионнообменной хромотографии
2.5 Определение концентрации белка по методу Брэдфорд
2.6 Измерение карбоангидразоподобной активности белков PsbP и PsbQ
КА-активность-- карбоангидразная активность
КП-активность- карбоангидразоподобная активность
НАДФ- никотинамидадениндинуклеотидфосфат
П680- первичный донор электрона в фотосистеме 2
ССК2- основной светособирающий комплекс переферической антенны фотосистемы 2
BBY- фрагменты тилакоидных мембран, обогащённые фотосистемой 2 (выделенные согласно (Berthold et al., 1981))
CР43 - белок антенны ядерного комплекса ФС2
CР47 - белок антенны ядерного комплекса ФС2
MES - (N-морфолино)этансульфоновая кислота
Mn4CaO5-кластер - неорганическое ядро ВОК ФС2
PsbP и PsbQ- водорастворимые белки ВОК ФС2высших растений и зеленых водорослей с молекулярными массами 23 кДа и 17 кДа, соответственно
Tris-2-амино-2-гидроксиметил-пропан-1,3-диол
QA - первичный хиноновый акцептор электрона в ФС2
QB - вторичный хиноновый акцептор электрона в ФС
Фотосинтез - процесс образования богатых энергией органических веществ из веществ энергетически бедных - углекислого газа и воды. Углекислый газ, поступающий в клетку из окружающей среды, электроны в виде НАДФН и энергия в виде АТФ, поступающие из цепи переноса электронов, ассоциированной с тилакоидной мембраной обеспечивают синтез углеводов. В состав тилакоидной мембраны входят три белковых комплекса - фотосистема 1, фотосистема 2 и цитохромный b6f комплекс.
Благодаря фотосинтезу стала возможной жизнь на поверхности нашей планеты. Кроме того, результатом деятельности фотосинтезирующих организмов являются запасы топлива, к сожалению, исчерпаемые. Однако, знание механизмов этого процесса поможет обрести человечеству источник неиссякаемой экологически чистой энергии. Например, знание механизма фотосинтетического расщепления воды позволит получать водород как топливо практически в неограниченном количестве.
Фотосинтетическое окисление воды происходит в ФС-2 в неорганическом ядре, состоящем из ионов Ca и Mn, стабилизированном тремя внешними водорастворимыми белками: PsbO, PsbP, PsbQ. Выяснено, что для стабилизации и функционирования ВОК также необходимы ионы бикарбоната (БК). Для поддержания необходимого уровня бикарбонатов ФС-2 может быть необходим специальный фермент - карбоангидраза, катализирующий обратимую гидратацию углекислого газа.Присутствие КА показано для всех четырех царств живой природы: бактерий, животных, грибов, растений. В последние десятилетия, после того как стало известно, что работа ФС-2 зависит от содержания БК, интерес к изучению КА активности резко возрос.
Известно, что тилакоиды имеют как минимум два источника КА активности в ФС-2. Один из источников - Mn-стабилизирующий белок PsbO (молекулярная масса 33 кДа), другой источник - ассоциирован с ФС-2, который можно выявить путём отмывки белка PsbO 1М раствором CaCl2. В ходе экспериментов было установлено, что источники КА активности зависят от присутствия ионов металлов Ca2+, Mn2+. Возник интерес действию других металлов на КА активность, например, входящих в КА или имеющих сходный радиус с теми металлами, для которых уже показана активность, либо установить действие тяжелых металлов. Выяснение механизма действия ионов тяжелых металлов на ФС-2 является актуальной проблемой, важной для развития сельского хозяйства и фундаментальных представлений о механизме функционирования ФС-2. Так как, по имеющимся в настоящий момент данным, ионы металлов могут влиять на КП-активность белков ВОК ФС-2, необходимо изучить этот вопрос более детально. Поэтому целью нашей работы явилось изучение влияния ионов металлов на карбоангидразоподобную активность внешних водорастворимых белков PsbP и PsbQ фотосистемы 2. Для достижения данной цели мы выделили несколько задач:
1) Выделить фотохимически активные фрагменты тилакоидных мембран хлоропластов, обогащенных ФС-2 из листьев гороха (PisumsativumL. cv. Moscowski 559);
2) Выделить из них белки водоокисляющего комплекса - PsbPи PsbQ;
3) Установить влияние ионов двухвалентных металлов на карбоангидразоподобную активность белков PsbPи PsbQ;
Фотосинтез - это окислительно-восстановительный процесс, протекающий в несколько этапов, в котором происходит восстановление диоксида углерода до углеводов и окисление воды до кислорода.. (http://fizrast.ru/fotosintez/etapy.html)
Результатом возникновения фотосинтеза в процессе эволюции являетсявеликое множество различных представителей живого мира на Земле. Нефть, газ и уголь - это биотопливо, накопившееся в результате захвата и преобразования солнечной энергии фотосинтезирующими организмами. В настоящее время фотосинтезможет помочь человечеству обрести источник неиссякаемой экологически чистой энергии. Так как процесс расщепления воды может дать практически неограниченное количество водорода.
Более трех миллиардов лет назад первые фотосинтезирующие организмы (фотосинтезирующие бактерии) приобрели способность эффективно захватывать и преобразовывать солнечную энергию для синтеза органических молекул в процессе аноксигенного фотосинтеза. Ископаемые животные организмы и растительные остатки, найденные в земной коре, Следующим этапом эволюции фотосинтеза является появление оксигенного фотосинтеза. Этот процесс осуществлялся у первых цианобактерий и сопровождался выделением молекулярного кислорода.Накопление кислорода в атмосфере благодаря широкому распространению цианобактерий привело к первой экологической катастрофе на планете - возникновение аэробной атмосферы. Это позволило предкам современных живых организмов существовать на суше.а также нынешнее разнообразие живых организмов дают представление о значимости фотосинтеза. Ведь именно этот процесс привел к взрыву биологической активности на Земле, позволив жизни процветать и значительно изменяться.
1.2 Строение и функционирование фотосинтетического аппарата высших растений
Основным органом, где протекает фотосинтез в высших растениях является лист, а органоидами - хлоропласты. Внутри хлоропластов располагаются тилакоиды и в их мембранах находятся фотосинтетические пигменты, улавливающие кванты света. В молекуле хлорофилла - основного фотосинтетического пигмента (рис. 1) -выделяют порфириновую «головку» с атомом магния в центре и фитольный «хвост». Порфириновая «головка» представляет собой плоскую структуру, является гидрофильной, поэтому обращена к водной среде стромы. За счет своей гидрофобности фитольный «хвост» удерживает молекулу хлорофилла в мембране тилакоидов.
Рис. 1. Строение молекулы хлорофилла;
Хлорофиллd: R1 = СООСН3, R2= CH=CH2
Растения имеют характерную зелёную окраску из-за того, что хлорофиллы отражают зеленый, а поглощают красный и сине-фиолетовый свет. Молекулы хлорофилла в мембранах входят в состав пигмент-белково-липидных комплексов, названных фотосистемами. У растений и сине - зеленых водорослей имеются ФС-1 и ФС-2, у фотосинтезирующих бактерий -- ФС-1. Только ФС-2 имеет способность отбирать электроны у воды.
Световая фаза фотосинтеза осуществляется при участии двух фотосистем - ФС-1 и ФС-2, содержащих пигменты и различные белки. Они вместе с цитохромным комплексом являются основными компонентами фотосинтетической цепи переноса электронов. Электрон-транспортная цепь организована в мембране в виде трансмембранных белковых комплексов (ФС-1, ФС-2 и цитохромный b6f комплекс) и подвижных переносчиков электрона (пластоцианин,ферредоксин и пул пластохинонов). (http://fizrast.ru/fotosintez/etapy.html). Эти комплексы фотосинтетического аппарата гетерогенно распределены в мембране тилакоидов (рис.2). (В. Н. Гольцев, 2014)
Рис. 2. Схематическое изображение белковых комплексов, включённых в реакции фотоиндуцированного переноса электронов и протонов в тилакоидной мембране фотосинтетических оксигенных организмов.
Z-схема, или схема нециклического транспорта электронов, получила свое название из-за сходства с буквой Z. Её принцип впервые был предложен в 1960 г. Р. Хиллом и Ф. Бендаллом и в 1961 г. был подтвержден работами Л. Дюйзенса.
Конечным этапом световых стадий фотосинтеза является восстановление NADP+, которое осуществляет ФС-1. При возбуждении П700 в реакционном центре ФС-1 энергией, эквивалентной 1 кванту длинноволнового красного света, электрон захватывается мономерной формой хлорофилла a (A1; акцептор электрона) и затем последовательно передается переносчикам электронов А2 и Ав (железосерные белки FeS), ферредоксину (водорастворимый FeS-белок) и ферредоксин - NADP-оксидоредуктазе с FAD в качестве кофактора. Наконец, редуктаза восстанавливает NADP+. Именно в ФС-2 происходит фотоиндуцированное окисление воды. П700 является сильным окислителем. Донором электронов для него является ФС-2. Электроны от ФС-2 переходят на ФС-1 посредствам мобильных переносчиков и цитохромом b6f-комплексов.Исходным донором электронов для ФС-2 является вода.Энергия, освобождающаяся при движении электронов от П680 до П700, используется для синтеза АТФ из AДФ и неорганического фосфата (фотофосфорилирование). (Холл Д., Рао К., 1983)
Фотохимический реакционный центр ФС-2П680 поглощает энергию, эквивалентную 1 кванту коротковолнового красного света, и переходит в синглетное возбужденное состояние, отдает электрон феофетину (Фео). От Фео электроны, теряя энергию, последовательно передаются на пластохиноны - QA и QB, в пул липидорастворимых молекул пластохинона (PQ), переносящих через липидную фазу мембраны электроны и протоны в цитохромный b6f комплекс, который затем восстанавливает Cu-содержащий белок пластоцианин (Пц). Электроны с Пц переходят на вакантное место в П700.
Вакантное место («дырка») в П680 заполняется двумя электроном из содержащего Мn - неорганического ядра водоокисляющего комплекса. Этот комплекс связывает воду и восстанавливается за счет её электронов. Для осуществления этой реакции в белковом комплексе необходимы Мn и С1-, а также Са2+. Таким образом, основным источником электронов для восстановления NADP+ является вода, разложение которой происходит в ФС-2.
ФС-2 (Рис. 4) содержит более 20 различных белков и пигмент-белковых комплексов, ее состав зависит от условий окружающей среды. Полипептиды ФС-2 выполняют ряд важных функций: часть поглощают энергию света и передают энергию возбуждения, участвуют в разделении зарядов и окислении воды, стабилизируют структуру димеров ФС-2, участвуют в сборке мономера и образовании димера, связывают и ориентируют молекулы хлорофилла а и b, а также каротиноиды. В ФС-2 условно выделяют части, выполняющих разные функции: 1) реакционный центр , 2) светособирающий комплекс, 3) водоокисляющий комплекс.
Рис. 4. Схематическое изображение фотосистемы 2 в тилакоидной мембране. D1 иD2 белкиреакционногоцентра (РЦ). (Mn) - марганцевый кластер, участвующийв фотоокислении воды; P680 (П680) - специальная пара молекул хлорофилла реакционного центра; Phe (Фео) - феофитин; QA - связанный пластохинон; QB - пластохинон, подвижный переносчик электронов;Tyr - аминокислотный остаток тирозина-161 белка D1 (Yz); PQ - пул подвижных молекул пластохинона. Антенные комплексы: LHC-II (ССК-2) - периферийный светособирающий комплекс ФС-2; CP47 и CP43- хлорофилл-белковые комплексы внутренней антенны, имеющие соответственно молекулярные массы 47 и 43 кДа.
Рис. 5. Схема расположения кофакторов переноса электрона в ФС-2 ( Guskovetal ., 2009) . Красные стрелки - этапы переноса электронов с указанием времени переноса электрона. Голубые - возможные пути переноса электрона (Muh et al., 2012) .
РЦ входит в состав более крупного белкового комплекса, называемого «ядерным » В его состав у высших растений , кроме белков D 1, D 2, цитохром b -559 входят белки CP 43, CP 47, PsbO ; могут входить белки PsbP , PsbQ .
Структура ядерного комплекса высших растений крайне близка к структуре цианобактерий: для цианобактерии Thermosynechococcus elongatus показано наличие 35 молекул хлорофилла а, 2 молекул феофитина, 3-х пластохинонов и 12 в-каротинов в расчёте на один мономер, а также марганцевого кластера и других кофакторов. Для «ядерных» комплексов из высших растений (шпината) показано наличие от 35 до 80 молекул хлорофилла, одной молекулы QA и марганцевого кластера в расчете на один РЦ.
Важную роль в обеспечении стабильности Mn4CaO5 - кластера играет белок PsbO (марганец - стабилизирующий белок). В процесс образования кислорода также принимают участие: ион Ca2+; один или два иона Cl-. Предполагается, что в обеспечении этими ионами в процессе сборки водоокисляющего комплекса, а также в их сохранении в нормально функционирующей ФС-2 участвут внешние водорастворимые белки ВОК PsbPи PsbQ.
Он входит в состав фотосинтетического пигмента - хлорофила и участвует в аккумуляции солнечной энергии в ходе фотосинтеза (Якушкина И.И., 2004). Также магний принимает участие в передвижении фосфора и в углеводном обмене, влияет на активность окислительно-восстановительных процессов.
При недостаточности магния снижается содержание хлорофилла в зеленых частях растений Поскольку хлорофилл поглощает солнечную энергию и с ее помощью углекислый газ и вода превращаются в сложные органические вещества: сахара, крахмал и др., само существование зеленых растений невозможно без магния. (Полевой В.В., 1989)
Марганец, как и медь, играет важную роль в окислительно - восстановительных реакциях (он характеризуется высоким показателем окислительно-восстановительного потенциала), протекающих в растении. Он входит в состав ферментов, с помощью которых происходят данные процессы. Марганец непосредственно участвует в фотосинтезе, дыхании, в углеводном и белковом обменах. В растения марганец находится в разной степени окисления (Мn2+, Мn3+, Мn4+), но поступает в растение в виде ионов Мn2+. Среднее содержание данного элемента в растениях 0,001 %.
Ионы марганца необходимы для нормального протекания фотосинтеза, так как входят в состав активного центра водоокисляющего комплекса ФС-2. Кроме того, марганец участвует в восстановлении С02, играет значимую роль в поддержании структуры хлоропластов. При недостатке марганца хлорофилл незамедлительно начинает разрушаться при освещениирастений. (Якушкина И.И., 2004)
Кальций поступает в растение в течение всей его жизни в виде катионов Са2+ (Полевой В.В., 1989). Часть кальция находится в клеточном соке. Здесь он поддерживает определенное физиологическое равновесие ионов в клетке, главным образом нейтрализуя избыточно образующиеся органические кислоты; влияет на вязкость и проницаемость протоплазмы.(Малиновский В.И., 2004)
Помимо прочего кальций участвует в углеводном и белковом обмене растений, образовании и росте хлоропластов. От кальция в большей степени зависит построение нормальных клеточных оболочек. Кальций также как и марганец как входит в состав активного центра ВОК ФС-2.
Поступает в растение в виде ионов Zn2+. Среднее содержание цинка в растениях 0,002%. В растениях цинк не участвует в окислительно-восстановительных реакциях, поскольку не обладает переменной валентностью. Он входит в состав более 30 ферментов, в т. ч. фосфатазы, карбоангидразы, алкогольдегидрогеназы, РНК-полимеразы и др. Кроме того, цинк участвует в синтезе аминокислоты триптофана, являющеся предшественником ростовых веществ (ауксинов) в растении. (Полевой В.В., 1989). Фермент КА важен для многих этапов процесса фотосинтеза. Например, углекислый газ, поступая в клетку, растворяется в воде, образуя Н2СO3: СO2 + Н2O<-> НСO3 + Н+. Фермент карбоангидраза, катализируя высвобождение С02 из гидрата окиси углерода, способствует его быстрой фиксации в цикле Кальвина-Бенсона.. (Якушкина И.И., 2004)
Цинк благоприятен для процесса синтеза хлорофилла. Вызываемое недостатком цинка нарушение процессов синтеза хлорофилла приводит к появлению на листьях хлоротичных пятен светло-зеленого, желтого и даже почти белого цвета. Однако, избыток цинка токсичен для растения, связан недостатком меди, железа и редких случаях приводит к гибели растения. (Полевой В.В., 1989)
Медь является переходным и тяжелым металлом, для которого доказано токсическое действие. При взаимодействии с НАДФН-оксидазой он вызывает образование Н2О2. В митохондриях и хлоропластах ионы тяжёлых металлов могут являться акцептором при переносе электронов или неправильно направляют перенос электрона (в зависимости от окислительно-восстановительного статуса металла), что вызывает образование свободных радикалов. Кроме того, ионы тяжёлых металлов могут быть причиной мутаций. (ArunK. Shanker, 2008).
Ионы медь входят непосредственно в состав ряда ферментных систем. 75% ионов меди, содержащейся в листьях, сконцентрировано в хлоропластах. Также в хлоропластах находится маленький, водорастворимый, медьсодержащий белок синего цвета -- пластоцианин(молекулярная масса около 10,5 кДа). В пластоцианине содержание меди составляет 0,57%. Медь обладает способностью к обратимому окислению и восстановлению (Сu2+ е --> Сu+), пластоцианин участвует в переносе электронов от ФС-2 к ФС-1. При дефиците меди снижается активность ФС-1. (Якушкина И.И., 2004)
Исследования последних лет свидетельствуют, что ингибирующее действие ионов тяжелых металлов на фотосинтетические функции растений обусловлено их взаимодействием с компонентами ФС-2.
Окраска ведется в течении двух часов в свежеприготовленном растворе.
1.1.) Фиксация белков в геле - 30 минут
1.2.) Окраска - два часа ( на качалке или оставить на ночь без перемешивания)
Растворы рассчитаны на 250 мл конечного объёма
1.2.1.) Кумасси в спирте (раствор А)
1.2.2.) Соль и кислота в воде (раствор Б)
Раствор профильтровать. После фиксации гель инкубируют некоторое время в растворе Б, а затем добавляют раствор А и перемешивают.
На окрашивание (одного или двух гелей) необходимо взять 45 мл раствора Б и 5 мл раствора А.
2.) Расчеты для электрофореза (табл. 1)
Табл. 1. SDS электрофорез в ПААГ по Laemmli
0, 18 M Tris - HCI (pH = 6, 8) - 2, 18 g
0, 015% BPB ( бромфеноловый синий) - 1,5 mg
Содержание белка определяли методом Бредфорда.(Bradford, 1976)
1. Стандартный белковый раствор (0,5 мг/мл БСА), 0,5 мг/мл БСА имеет А280=0,33)
2. 0,15М NaCl (0,0875 г в 10 мл H2Odd)
3. Раствор Кумасси (кумасси G-250 растворить в спирте, добавить к полученному раствору 85% фосфорную кислоту, довести водой полученный раствор. Профильтровать через фильтровальную бумагу. Хранить при +4оС.
Концентрация хлорофилла (СХл), мг/мл
Скорость выделения кислорода является наиболее достоверным показателем функциональной активности ФС-2. Измерение проводили при рН 6.5. Концентрациюхлорофилла доводили до 10 мкг/мл. Скорость фотосинтетического выделения кислорода была рассчитана исходя из данныхграфика(рис.6).
Рис. 6. График фотосинтетического выделения кислорода ФС-2. Стрелкой вверх показан момент включения света. Стрелка вниз - момент выключения света.
Вычисление скорости выделения О2 за 1 час по формуле: V(О2) = ДU*K*60мин/СХл, где ДU- значение изменения вольтажа за 1 минуту, K- калибровочный коэффициент(мкМО2/мл*мин*В), СХл- концентрация хлорофилла(мг/мл). Значение калибровочного коэффициентавычисляется по специальному калибровочному графику (рис.7). Его значение равно665, 79 мкМО2/ мл*мин*В. За тем по графику (рис.6) нашли изменение напряжения (В) за 1 минуту после включения света (начальная скорость на прямолинейном участке).
Скорость выделения кислорода составила 344,7 ± 12 мкМО2/ ч *мг/мл
Для этого метода получения BBYмаксимальное значение для выделения кислорода показано порядка 600 мкМО2/ч*мг/мл, а среднее значение колеблется в пределах от 300 до 450 мкМО2/ч*мг/мл. Полученные нами данные свидетельствуют о достаточно хорошей функциональной активности ФС-2.
Рис. 7. Калибровочнаякривая для расчета скорости выделения кислорода
Ионообменная хроматография позволяет разделять молекулы, основываясь на ионных взаимодействиях. Чаще всего ионообменная хроматография является первым шагом к дальнейшей очистке белков.
Для разделения белков использовалась анионная ионообменная хроматография. Она характеризуется неподвижной фазой с положительно заряженными функциональными группами и задержкой отрицательно заряженных анионов.
Изначально система хроматографа (ActaFPLCc колонкойMonoQ) промывается этиловым спиртом и деионизованной водой. Разделение смеси белков PsbQ и PsbP проводилось в присутствии буфера HEPES (рН 7.5). Cкорость нанесения белка на колонку выбиралась в зависимости от давления и варьировала от 0,2 до 0,5 мл/мин.
После нанесения белковой смеси на колонку наблюдалось возрастание показателя поглощения в ультрафиолетовой области, что свидетельствовало о выходе белка из колонки(рис.10). Длина волны при поглощении в УФ области составляет 280 нм. Первым из колонки выходил белок PsbQ (он был собран во фракцию, обозначенную номером 1). Его выход был связан с тем, что он имеет изoэлектрическую точку (рI) равную 8.3, а белок PsbР - 6.5. Общий заряд белка определяется величиной рН. Если значение pH ниже изоэлектрической точки - заряд белковой молекулы является положительным, при pH выше - отрицательный. Таким образом при рН 7,5, белок РsbQ (заряженный положительно) выходит из колонки, а PsbР (заряженный отрицательно) задерживается на ней. Белок PsbР элюировали в градиенте NaCl от 0 до 500 мМ (время элюации 58 минут, выход белка наблюдался при 165-260 мМ NaCl). По мере элюции выходящий раствор собирали в различные фракции. Исходя из данных поглощения в ультрафиолетовой области, белки предположительно должны содержаться во фракциях 1, 6, 7 и 11. Эти фракции взяли для анализа на содержание белков. Для этого использовали электрофорез в денатурирующих условиях. Так как ряд фракций содержал высокую концентрацию NaCl, которая мешает проведению электрофореза, белки предварительно осадили с помощью трихлоруксусной кислоты (надосадочную жидкость с высоким содержанием соли слили), а затем перевели осадок в буфер для нанесения образцов для электрофореза.
Определение влияния гипотермии на содержание водорастворимых белков в тканях высших растений, бактерий и водорослей. Применение электрофореза для разделения растительных белков. Влияние развития морозоустойчивости на синтез белков, изменение экспрессии. реферат [22,1 K], добавлен 11.08.2009
Рецепторные системы растений и животных. Становление и функционирование системы восприятия света фотосистемами. Включение энергии фотона в процессы фотосинтеза. Основные химические формулы хлорофилла. Защитная фотопротекторная функция каротиноидов. реферат [26,1 K], добавлен 17.08.2015
Клеточные структуры, строение, состав и свойства основных компонентов растительной клетки. Поглощение и выделение веществ и энергии клеткой. Хлоропласты, их строение, химический состав и функции. Строение молекулы хлорофилла, флавоноидные пигменты. контрольная работа [1,0 M], добавлен 05.09.2011
Обзор особенностей автотрофного питания высших цветковых растений. Описания паразитов, полностью или частично лишенных хлорофилла. Изучение наиболее известных корневых полупаразитов. Анализ влияния цветковых паразитов на качества урожая растений-хозяев. реферат [12,7 K], добавлен 19.03.2014
Отделы моховидных, плауновидных, хвощевидных, голосеменных и покрытосеменных. Эволюция высших растений, их морфологические и биологические особенности, распространение. Развитие специализированных тканей как важное условие для выхода растений на сушу. презентация [2,3 M], добавлен 25.10.2010
Световые и темновые реакции. Фотосинтез как один из мощных процессов преобразования солнечной энергии. Локализация фотосинтетического аппарата в клетке зеленого растения. Фотосистема в тилакоидной мембране. Нециклический и циклический поток электронов. презентация [3,3 M], добавлен 01.03.2016
Значение фотосинтеза и причины его дневных изменений. Факторы, влияющие на образование хлорофилла. Механизм фотосинтеза и световые его реакции. Поглощение двуокиси углерода фотосинтезирующими тканями. Общий фотосинтез и характер его сезонных изменений. реферат [866,4 K], добавлен 05.06.2010
Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д. PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах. Рекомендуем скачать работу .
© 2000 — 2021
Влияние ионов металлов на карбоангидразоподобную активность внешних водорастворимых белков PsbP и PsbQ фотосистемы 2 дипломная работа. Биология и естествознание.
Реферат по теме Методологические подходы к психодиагностике интеллекта
Курсовые Работы Адаптивная Физическая Культура
Курсовая Работа На Тему Обзор Радиостанций
Реферат: Хунну 2
Культура Явление Реферат
Контрольные Работы По Информатике 1 Класс
Дипломная работа по теме Заключение, изменение и расторжение гражданско-правовых договоров в соответствии с российским законодательством
Лекция На Тему Философия Нового Времени
Реферат: Мебельный магазин
Доклад: Родительское наказание
Дипломная работа по теме Радиостанция 'Минская волна': особенности формирования программной политики
Реферат На Тему Имидж Человека
Курсовая работа: Отношения усыновления в международном частном праве
Сочинение По Обществознанию 2022
Шпаргалки На Тему История России В Периодах
Реферат по теме Место хозяйств аквакультуры в экономике России
Дипломная работа по теме Международные интеграционные связи субъектов промышленного сектора экономики
Дипломная работа по теме Проблемы и перспективы развития малого бизнеса в России
Реферат: Сущность, функции и роль денег в экономике
Курсовая работа по теме Психологическое развитие детей и готовность к школьному обучению
Взаимосвязь группы крови и характера человека - Биология и естествознание курсовая работа
Антропогенез: от человекообразной обезьяны к человеку - Биология и естествознание реферат
Производственная безопасность - Безопасность жизнедеятельности и охрана труда отчет по практике