Проточная цитометрия

В современной медицине проточная цитометрия становится всё более популярным методом для исследования состава клеточных популяций. Классическими методами для таких исследований являются методы микроскопии – исследователь или врач клинико-лабораторной диагностики вынужден просматривать огромное количество препаратов, вручную или с помощью программ анализа изображений подсчитывать число различных клеток в образце. Это очень долгая, сложная процедура, требующая высокой квалификации. Но даже самый квалифицированный специалист не может проанализировать десятки, сотни тысяч клеток – на это нужно слишком много времени. А именно анализ большого количества клеток дает возможность получить точную информацию о составе образца. Например, количество гемопоэтических клеток в пуповинной крови новорожденного может составлять сотые доли процента. Чтобы точно оценить их количество, надо проанализировать свыше 50 тысяч клеток. Микроскопия такого количества клеток занимает очень много времени. Другое ограничение метода – невозможность выявить некоторые субпопуляции клеток (например, субпопуляции лимфоцитов или онкотрансформированные клетки), так как применяемые классические методы окраски клеток не позволяют их выявить. Их можно обнаружить лишь при окраске сложными наборами антител, связанных со светящимися метками. Но наш глаз не в состоянии правильно распознать такие сочетания цветов.

Эти проблемы были решены путем разработки принципиально нового метода – проточной цитометрии. Он основан на облучении потока клеток лазерным лучом и последующем анализе полученного светового сигнала. Перед помещением в прибор клетки окрашивают специальными светящимися молекулами – флуорохромами. Суспензия клеток проходит через узкую проточную ячейку, в которой клетки выстраиваются по одной благодаря давлению обжимающей жидкости; это называется гидродинамической фокусировкой. Поток клеток пересекает лазерный луч, и флуорохромы вызывают свечение каждой клетки. Свет попадает на детекторы, регистрирующие световые волны разной длины. Некоторые детекторы регистрируют рассеивание света, которое зависит от внешней и внутренней структуры клеток. Затем полученная информация преобразуется в цифровую и выводится на экран для анализа.

Преимущества метода:

• Большая скорость (анализирует десятки тысяч клеток за несколько минут)
• Высокая точность измерений
• Возможность проанализировать каждую клетку
• Большое разнообразие измеряемых параметров
• Удобная работа с данными

Проточная цитометрия позволяет получать огромную по числу клеток выборку, что делает анализ более качественным. С помощью этого метода можно обнаруживать в культуре мелкие популяции клеток, что может помочь диагностировать рак. Также эта особенность используется при исследовании биологических жидкостей, например крови, в которой находятся разные типы клеток, в том числе несколько субпопуляций лимфоцитов. Специальные модификации проточных цитометров – клеточные сортеры даже позволяют отсортировать в отдельную пробирку определенные клетки, чтобы в дальнейшем работать именно с ними. Все эти возможности постепенно делают проточную цитометрию одним из основных методов клинико-лабораторной диагностики.

Покровский Банк стволовых клеток одним из первых в нашем городе перешел на его использование. В настоящее время специалисты лаборатории проточной цитометрии совместно с врачами Медицинского центра Покровский работают над внедрением новых методов диагностики, основанных на использовании проточной цитометрии.

Покровский банк стволовых клеток - https://pokrovcell.ru/

Мы в Facebook: https://business.facebook.com/pokrovskybiobank/

Мы в Instagram: https://www.instagram.com/pokrovsky_scb/?hl=ru

Наш Youtube канал: https://www.youtube.com/user/StemCellbankPokrov