Пробы Экстази, Лсд 25 Гамбург

__________________________________

Гарантии! Качество! Отзывы!

__________________________________

✅ ️Наши контакты (Telegram):✅ ️

>>>🔥🔥🔥(ЖМИ СЮДА)🔥🔥🔥<<<

✅ ️ ▲ ✅ ▲ ️✅ ▲ ️✅ ▲ ️✅ ▲ ✅ ️

__________________________________

⛔ ВНИМАНИЕ!

📍 ✅ Используйте ВПН (VPN), если ссылка не открваеться!

Пробы Экстази, Лсд 25 Гамбург

📍 В Телеграм переходить только по ссылке что выше! В поиске тг фейки!

__________________________________

Пробы Экстази, Лсд 25 Гамбург

Настоящий протокол описывает интрацеребровентрикулярную ICV инъекцию взрослым рыбкам данио нейротоксического 6-гидроксидофамина 6-OHDA в вентральный диэнцефалон Dn и оценку нарушения и последующее восстановление плавательного поведения после этого с использованием теста в открытом резервуаре, который сопровождается анализом с использованием программного обеспечения для отслеживания видео. Ограничения современных методов лечения в задержке дофаминергической потери нейронов при болезни Паркинсона БП повышают потребность в альтернативных методах лечения, которые могут восстановить эти нейроны. В настоящее время много усилий направлено на лучшее понимание нейрорегенерации с использованием доклинических моделей in vivo. Однако эта регенеративная способность к самовосстановлению неэффективна у млекопитающих. Таким образом, животные, не являющиеся млекопитающими, такие как рыбки данио, стали отличной нейрорегенеративной моделью из-за ее способности постоянно самообновляться и иметь близкую гомологию мозга к людям. В рамках усилий по выяснению клеточных событий, участвующих в нейрорегенерации in vivo , мы создали модель БП взрослых рыбок данио, индуцированную 6-гидроксидотамином 6-OHDA. Это было достигнуто за счет оптимизированной интрацеребровентрикулярной ICV микроинъекции 99,96 мМ 6-OHDA для специфического абляции дофаминергических нейронов DpN в вентральном диэнцефалоне Dn мозга рыбок данио. Результаты показали значительное p Болезнь Паркинсона БП , заболевание, характеризующееся мышечной ригидностью, тремором покоя и брадикинезией, является самым быстрорастущим неврологическим заболеванием в мире1,2. Риск и распространенность БП быстро увеличиваются с возрастом, особенно у лиц в возрасте 50 лет и старше3. Этиология и патогенез БП до сих пор остаются малоизученными. Это часто оставляло раннее начало БП недиагностированным. В настоящее время недостаток дофамина и потеря дофаминергических нейронов DpN у пациентов с БП тесно связаны с проявлением двигательной симптоматики4. Используя эту связь, несколько методов лечения были разработаны либо для того, чтобы действовать непосредственно как замена дофамина то есть леводопа , либо для компенсации потери DpN то есть глубокой стимуляции мозга. Хотя эти методы лечения приносят симптоматические преимущества, они не изменяют ухудшающееся течение заболевания5. Ввиду этой значительной слабости была предложена клеточная заместительная терапия. Эффективность этого подхода, однако, непоследовательна, учитывая проблемы подготовки трансплантата, контроля роста клеток и нестабильности фенотипа. Клеточная заместительная терапия, которая вызвала этические проблемы, также представляет риск индуцирования опухолей головного мозга и нежелательных иммунных реакций6,7. Ограничения современных терапевтических стратегий привели к большему акценту на регенерацию DpN как потенциальный подход в лечении БП. Регенерация DpN или нейрорегенерация стала одним из многообещающих прорывов в лечении БП не только из-за ее потенциала в качестве нового терапевтического метода, но и как средства для понимания механизма заболевания8 , См. Этот подход фокусируется на восстановлении функции нейронов путем дифференцировки, миграции и интеграции существующих клеток-предшественников в поврежденную схему В целях дальнейшего изучения нейрорегенерации были проведены различные исследования in vivo. Было обнаружено, что позвоночные, такие как млекопитающие, амфибии и рептилии, генерируют новые клетки мозга после травмы11, Среди позвоночных млекопитающие животные более востребованы, учитывая их генетическое сходство с людьми. Млекопитающие, однако, демонстрируют ограниченную и плохую репаративную способность в центральной нервной системе ЦНС , которая может длиться до взрослой жизни после поражения мозга В целом, млекопитающие не подходят в качестве животных моделей для понимания нейрорегенерации, учитывая, что низкое количество производимых нейронов будет недостаточным для восстановления поврежденных нейронных цепей, наблюдаемых при БП. Таким образом, модель на основе телеоста, особенно у рыбок данио, пользуется большим преимуществом из-за ее высокой пролиферативной скорости, способности к непрерывному самообновлению и закрытию гомологии мозга с людьми14, Рыбки данио чаще всего используются для изучения беспорядочного движения при PD Неспособность 6-OHDA пересекать гематоэнцефалический барьер ограничивала его влияние на клеточные и функциональные изменения в мозге, когда он вводится интракраниально, а не внутримышечно Периферическое введение 6-OHDA вызвало глобальное снижение уровня дофамина во всей нервной системе Интересно, что восстановление DpN было зарегистрировано через 30 дней после 6-OHDA-индуцированного поражения, и эти нейроны выжили в течение жизни23, Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian. Эксперименты проводились со взрослым самцом рыбки данио Danio rerio в возрасте более пяти месяцев со стандартизированной длиной 3,,7 см. Препараты для содержания рыбок данио и микроинъекции перед ICV. A Точка микрокапиллярного входа направляется пересечением между метопическим швом MS , корональным швом CS и сагиттальным швом SS , который соединяет лобный и теменной череп мозга рыбок данио вид плана. B На схематическом рисунке виде плана черепа и мозга рыбки данио показан микрокапилляр, который опущен непосредственно над хабенулой Hab , и его точка входа на пересечении между полушариями. C Схематический рисунок сагиттальный срез мозга рыбки данио показывает угол инъекции и глубину проникновения. Черная точка представляет собой поврежденный участок, который расположен над целевой областью, вентральным диэнцефалоном. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка. Рисунок 2 : Экспериментальная установка теста в открытом резервуаре для оценки локомоторного поведения рыбок данио. А Экспериментальный резервуар вид спереди размещен на приподнятой платформе, которая освещается снизу. Четыре стенки резервуара покрыты белой бумагой, а записи захватываются в осевом направлении. B Снимок экрана вид плана видеозаписи, снятой с помощью установки. Причина использования 6-OHDA в качестве нейротоксина выбора была связана с его неспособностью пересекать гематоэнцефалический барьер, который производил специфическую и целенаправленную абляцию DpN в области интереса - вентральный диэнцефалон Dn Субпопуляция DpN здесь имеет анатомическое сходство с субпопуляцией DpN в черной субстанции человека pars compacta Основной областью мозга, представляющей интерес, был Dn, состоящий из преоптической области POA , заднего туберкулеза PT и гипоталамуса Hyp. Эти данные подтверждают регенеративные возможности субпопуляции DpN в Dn взрослых рыбок данио после абляции Адаптировано из Vijayanathan et al. Затем экспериментальную рыбу оценивали на третий день после поражения наблюдалось наименьшее количество TH-ir DpN и на й день полностью восстановленный DpN, зарегистрированный в месте поражения. Плавательное поведение взрослых рыбок данио оценивали до поражения, на третий день и й день после поражения на 99,96 мМ 6-OHDA. Настоящая работа успешно продемонстрировала локомоторную оценку установленной 6-OHDA-индуцированной, взрослой модели PD на основе рыбок данио. Весь эксперимент включал в себя три основных этапа: подготовка микроинъекции до ICV, микроинъекция ICV рыбок данио и оценка локомоторов. Чтобы обеспечить здоровое восстановление взрослых рыбок данио после процедуры микроинъекции ICV и хороший экспериментальный результат, в настоящем исследовании были рекомендованы некоторые хорошие практики для каждого этапа. Подготовка к микроинъекции перед ICV: отбор животных лучше всего проводить за день до эксперимента. Был определен пол и измерена длина рыбы. Самцов взрослых рыбок данио стандартизированной длиной 3,,7 см поместили в отдельный экспериментальный аквариум. Кроме того, рыба должна пройти часовой период голодания, чтобы избежать срыгивания во время анестезии Аквариум с четырьмя стенками, покрытыми белой бумагой с установленным резервуаром для стоячей воды должен быть подготовлен перед экспериментом, чтобы уменьшить внешний стресс и помочь процессу восстановления рыбок данио. Все химические вещества были приготовлены свежими перед началом каждого эксперимента, так как они могли быстро портиться с течением времени и становиться нестабильными при комнатной температуре34, Микроинъекция 6-OHDA: Чистое и бережное обращение с рыбками данио должно выполняться на протяжении всего процесса, чтобы предотвратить введение ненужных травм и инфекций в рыбу. Рыбу следует положить поверх влажной губки и содержать во влажном состоянии, чтобы избежать высыхания Небольшой разрез был сделан с использованием стерильной иглы с твердой и соответствующей силой, чтобы избежать дополнительного давления, которое может расколоть череп рыбки данио. Этот разрез должен допускать проникновение микрокапилляра в полость мозга. Затем микрокапилляр опускали до глубины 1 мкм от точки входа, которая находится между двумя полушариями — теленцефалоном и тектумом рисунок 1B , C. Точка входа была выбрана между этими полушариями, чтобы предотвратить любую дополнительную рваную рану нейронов Этот метод предполагал использование микроинжектора, давление и сроки доставки должны быть откалиброваны, чтобы обеспечить доставку 0,5 мкл нейротоксина. Эта калибровка может быть выполнена путем измерения размера капли, образующейся на фильтровальной бумаге Наша практика обычно включала следующую настройку программируемых параметров, при которой интенсивность впрыска снижалась с каждой последующей инъекцией давление впрыска: гПа, продолжительность инъекции: 0,3 с и компенсационное давление: 10 гПа. Чтобы избежать утечки нейротоксина из полости мозга, между инъекцией и выводом микрокапилляра35 был применен интервал в 20 с. Из-за небольшого размера капилляра микрокапилляр может блокироваться после каждой инъекции. Таким образом, микрокапилляр должен быть по существу промыт перед следующей инъекцией, чтобы очистить закупорку и обеспечить, чтобы интенсивность инъекции была достаточной для получения желаемого объема 0,5 мкл 6-OHDA. Если рыба не может восстановиться в течение 30 с, промойте ее жабры и рот дистиллированной водой до полного восстановления мышечных движений. Локомоторная оценка: Чтобы обеспечить хорошую оценку локомоторов на 6-OHDA-индуцированной взрослой рыбке данио, поведенческое исследование должно проводиться в течение одного и того же периода времени для каждой точки времени. Каждое поведенческое исследование должно предусматривать минимум 2-минутный период акклиматизации и должно проводиться в течение 4 ч Настоящий эксперимент проводился ранним утром между и , так как рыбки данио были более активны в этот период Более длительный период акклиматизации необходим, если рыбки данио демонстрируют какое-либо ненормальное поведение с явными признаками стресса и тревоги замерзающее и неустойчивое поведение Однако, чтобы избежать несоответствия в плавательном поведении более ранней и последней партии записей, акклиматизация не должна превышать 10 мин Для испытаний в открытом поле экспериментальный резервуар любого размера, цвета, формы и текстуры может быть использован для записей, которые варьируются от минимум 5 до 30 мин42, На поведение рыбок данио сильно влияет температура окружающей среды. Стенки резервуара были покрыты белой бумагой для создания контраста между испытуемым и экспериментальной ареной, а также для уменьшения внешних раздражителей, которые могут вызвать непроизвольную реакцию у испытуемых Рыбы из каждой группы были протестированы индивидуально в соответствии с текущей стандартной практикой нейроповеденческих исследований рыбок данио23,37, Учитывая склонность рыбок данио к социальным взаимодействиям, есть опасения, что изоляция в течение периода тестирования может повлиять на их поведение Тем не менее, текущая экспериментальная установка была ограничена максимум 10 минутами на испытание, и было обнаружено, что этот короткий период изоляции не оказывает никакого влияния на двигательную активность взрослых рыбок данио Чтобы обеспечить точный сбор данных для поведенческого исследования, оценка проводилась путем случайного выбора рыбок данио из разных экспериментальных групп т. Записанные видео были проанализированы с использованием системы отслеживания видео, которая обычно используется для отслеживания поведения грызунов. Поскольку рыбка данио является новой моделью животных, поведенческие тесты, проводимые с использованием рыбок данио, обычно адаптированы из установленной научной литературы о грызунах Здесь мы продемонстрировали способность программного обеспечения для отслеживания видео автоматически отслеживать рыбок данио на экспериментальной арене и эффективно вычислять желаемые параметры. Программное обеспечение для отслеживания видео выделялось среди других доступных программ благодаря разнообразию видеофайлов, поддерживаемых программным обеспечением, регулярным выпускам пакетов обновлений и поддержке, предоставляемой для различных операционных систем Одним из ограничений существующих моделей БП на животных является отсутствие механистических сходств, имитирующих двигательные нарушения, наблюдаемые после потери дофаминергических нейронов в черной субстанции pars compacta человеческого мозга Однако появление модели БП на основе взрослых рыбок данио может решить эту конкретную проблему. По-видимому, специфическая абляция дофаминергических нейронов в этой области, представляющей интерес, необходима для нарушения нисходящей двигательной сигнализации из мозга, вызывая замедление движения Caldwell , et al. Абляция DpN в вентральном Dn имеет решающее значение, поскольку популяция DpN в Dn взрослых рыбок данио действует как единственный источник дофамина для двигательных нейронов рыбок данио. Это аналогично человеческой substantia nigra В настоящем исследовании также наблюдалась более высокая скорость плавания и большее расстояние, пройденное пораженными рыбками данио в более поздних временных точках после смерти, что указывает на продолжающееся и, в конечном счете, полное восстановление дофаминовой сигнализации, которая управляет плавательным поведением рыбок данио. Таким образом, эти результаты подтвердили способность недавно регенерированных дофаминергических нейронов восстанавливать свою функциональную активность у пораженных взрослых рыбок данио. Текущий путь применения 6-OHDA включал слегка инвазивную инъекционную парадигму, которая требовала введения микрокапилляра глубоко в мозг, к области поражения вентрального Dn. Этот метод немного трудоемкий по сравнению с периферической инъекцией и должен быть выполнен в течение 3 минут на рыбу, чтобы снизить риск смертности после инъекции. Таким образом, предварительная практика инъекции ICV требуется для обеспечения того, чтобы метод мог быть выполнен в пределах критической продолжительности в целевой области Dn. Чтобы достичь достоверной локомоторной оценки взрослых рыбок данио, тест в открытом аквариуме ограничен только 4 часами периода оценки в день. Следовательно, требуется предварительное планирование в экспериментальной структуре, в которой участвует большое количество животных, при этом должно быть выделено дополнительное время для обеспечения того, чтобы установка соответствовала минимальным требованиям для каждой записи например, температура и глубина воды. Это планирование особенно важно в экспериментах, основанных на времени, таких как текущее исследование, поскольку каждая запись должна быть выполнена в намеченную точку времени. Настоящая экспериментальная установка была ограничена изучением двух параметров плавания, которые специально оценивали двигательную функцию рыбок данио. Однако другие поведенческие параметры, такие как мелководье и тревожное поведение, требовали других экспериментальных установок и различных аналитических методов. Таким образом, это воспроизводимый и полезный метод изучения процесса нейрорегенерации DpN у взрослых рыбок данио, индуцированных 6-OHDA, который может дать важную информацию о стратегиях клеточной заместительной терапии против БП. Md Hamzah, N. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr jove. You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions jove. Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login. You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free. To get started, a verification email has been sent to email institution. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your 'Spam' folder. Your access has now expired. Provide feedback to your librarian. If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team. Login processing JoVE Journal Neuroscience. Болезнь Паркинсона БП , заболевание, характеризующееся мышечной ригидностью, тремором покоя и брадикинезией, является самым быстрорастущим неврологическим заболеванием в мире1,2. Разместите максимум 25 рыб на 45 л аквариума или одну рыбу на 1,8 л воды и подвергайте их графику часового света и часового темного фотопериода. Кормите рыбу не реже двух раз в день пищевыми гранулами, дополненными сублимированными червями. Готовят концентрированный раствор трикаина метансульфоната MS путем растворения 2,5 г MS и 5 г бикарбоната натрия в мл дистиллированной воды. Развести 2 мл исходного раствора для получения мл рабочего раствора для анестезии. Процедите раствор 0,2-микронным фильтром перед добавлением в раствор 25 мг 6-OHDA в виде порошка. ВНИМАНИЕ: Носите соответствующие средства индивидуальной защиты например, перчатки, лабораторное пальто и маску для лица и практикуйте надлежащую лабораторную практику при обращении с химическими веществами. Все обращения с химическими веществами должны выполняться в шкафу биобезопасности. Обезболивание и инъекции ICV рыбок данио Голодайте с рыбой в течение 24 ч, чтобы избежать срыгивания во время анестезии. Поместите обезболенную рыбу на пропитанную водой губку, помещенную под стереомикроскоп, и регулярно смачивайте рыбу. Определите положение для инъекции на основе пересечения между метопическим швом MS , корональным швом CS и сагиттальным швом SS , который соединяет лобный и теменный череп мозга рыбок данио. Сделайте небольшое отверстие площадью 1,0 мм2 с помощью острой иглы 27 G в черепе, ориентируясь на конкретное анатомическое положение на черепе рыбки данио рисунок 1A,B. Нажмите Z-предел, чтобы зафиксировать положение. Установите начальное давление впрыска на уровне гПа и давление компенсации на 10 гПа. Установите продолжительность инъекции на 0,3 с. Снижайте интенсивность инъекции с каждой последующей инъекцией. Продолжайте смачивать рыбу дистиллированной водой на протяжении всего процесса инъекции, чтобы предотвратить высыхание. Медленно удалите микрокапилляр и реанимируйте рыбу под проточной дистиллированной водой. Поместите рыбу в изолированный резервуар для восстановления и удалите любые отвлекающие факторы, которые могут потенциально нарушить процесс восстановления. Промывайте микрокапилляр перед следующей инъекцией, чтобы очистить закупорку и убедиться, что интенсивность инъекции достаточна для получения желаемого объема 0,5 мкл 6-OHDA. Видеозаписи Поместите экспериментальный резервуар длина 20 см, ширина 11,5 см, высота 13 см с его стенками, покрытыми белой бумагой, на приподнятой платформе рисунок 2А. Освещайте бак снизу с помощью источника света. Измерьте температуру с помощью термометра и регулируйте ее с помощью коммерческого аквариумного обогревателя. После минимум 2 мин акклиматизации запишите поведение рыбы при плавании с плана на 2-мерной 2D плоскости экспериментальной арены с помощью видеокамеры в течение 5 мин рисунок 2В. Чтобы избежать непоследовательности в плавательном поведении более ранней и последней партии записей, не превышайте акклиматизацию на 10 мин Анализ данных Дважды щелкните значок, чтобы открыть программное обеспечение для отслеживания видео. Перейдите на вкладку Файл и выберите Создать новый пустой эксперимент. Это позволит пользователю настроить параметры эксперимента в соответствии с целями исследования. Перейдите на вкладку «Протокол », выберите «Источники видео» и нажмите « Добавить новый источник видео ». Нажмите на доступный выпадающий список и выберите опцию Видеофайл. Это вызовет всплывающее окно просмотра файлов, из которого можно выбрать интересующие видеозаписи. Нажмите на подвкладку Устройство и выберите прямоугольный значок, чтобы настроить устройство. Перетащите прямоугольный значок, чтобы охватить всю экспериментальную арену. Установите шкалу шкалы соответствующим образом и введите числовое значение измерения шкалы, используемого в длине секции линейки. В настоящем эксперименте для испытания открытого резервуара использовалась шкала толщиной 10 мм. Установите цвет животного, выбрав Животные темнее, чем Фон аппарата. Оставьте другие доступные параметры в отслеживании для предустановленных настроек по умолчанию. На подвкладке Зоны нажмите на ранее нарисованное устройство. Эта зона устанавливается в качестве стандартной зоны, положение которой одинаково для всех тестов. Выберите следующие параметры в разделе Планирование тестирования и отчет о тестовых данных: Продолжительность теста, Общее пройденное расстояние и Средняя скорость. Другие доступные тесты в списке являются необязательными и зависят от исследовательского интереса исследователя. На вкладке Эксперимент назначьте животных в соответствии с их тестовой группой, введя название группы в разделе Имя и количество животных в группе в разделе Количество животных. Перейдите на вкладку Тесты , чтобы запустить эксперимент. Нажмите на значок Начать тест и подождите, пока все видео не будут проанализированы. На вкладке Результаты щелкните значок Просмотреть отчет , чтобы просмотреть данные локомотора в текстовой форме отчета. Play Video. Cite this Article Md Hamzah, N. Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account. Continue with Shibboleth or Forgot Password? Please enter your email address so we may send you a link to reset your password. You might already have access to this content! Please enter your Institution or Company email below to check. Please enter an institutional email address. Check access. Create Account. Forgot Password? Reset Password. Phone number. Request trial. Thank You! A JoVE representative will be in touch with you shortly. Waiting for verification email? Please click here to activate your free 2-hour trial. If you do not wish to begin your trial now, you can log back into JoVE at any time to begin. Enable Javascript for audio controls. Get cutting-edge science videos from J o VE sent straight to your inbox every month. We use cookies to enhance your experience on our website. Continue Learn more Close.

Пробы Экстази, Лсд 25 Гамбург

Roupas para gatos: como escolher?

Наркотики в телеграме Марнеули

Пробы Экстази, Лсд 25 Гамбург

Врач Республиканской больницы в Кишинёве заразилась коронавирусом

Купить Бошки, Кокаин Опатия

Пробы Экстази, Лсд 25 Гамбург

Варениковская купить наркотик Героин, Метадон в телеграм

Врач Республиканской больницы в Кишинёве заразилась коронавирусом

Медик была в защитном костюме, но, как предполагается, заразилась, сняв очки, при работе с пациенткой. Фото: facebook. Речь идет о женщине из отделения интенсивной терапии, сообщает publika. Врач больницы заразилась коронавирусом от пациентки, хотя она была в защитном костюме. Предположительно, это произошло, когда медик сняла защитные очки. Бригада из шести врачей, которая была тогда на дежурстве, находится сейчас на карантине. Министерство здравоохранения труда и соцзащиты этот случай не подтверждает и не опровергает. В сегодняшнем пресс-релизе ведомства подчеркивается, что защита врачей и медработников является приоритетной в сложившейся эпидемиологической ситуации. Также отмечается, что весь медицинский персонал обучается и обеспечивается специальными защитными костюмами и оборудованием. По данным ведомства, тесты выявили у женщины коронавирус 19 марта. Связано ли заражение с ее работой — пока неизвестно. Бельцкий независимый портал. Что получишь взамен? Врач Республиканской больницы в Кишинёве заразилась коронавирусом. Семидневная Панорама. Суждениями Поделись Правила обсуждения. Справочник Потребителя. Бизнес-услуги, финансы. Бытовая техника, электроника, телефоны, гаджеты. Городские службы, власть. Дача, сад, огород. Интернет, связь, телефония. Компьютеры, оргтехника, информационные технологии. Магазины, торговые центры, рынки. Медицина, здоровье. Оптовые базы и склады. Праздничные услуги. Продукты питания, напитки. Реклама, полиграфия. Строительные материалы. Строительство продукция. Строительство услуги. Товары для дома, хозтовары. Транспорт, такси, перевозки. Юридические услуги. Кишиневский аэропорт остается в собственности государства. Какой будет погода в пятницу: прогноз для Бельц на 2 февраля. Доллар растёт, евро падает: официальный курс валют на 2 февраля Светила предсказывают: гороскоп на 2 февраля Сделаем Промоушен Новости компаний. Новое преимущество от gama: теперь ты решаешь, когда вывести кешбэк и сколько. Румынское гражданство в срочном порядке: мифы, реалии и практическое руководство. С 18 января maib запускает второй выпуск корпоративных облигаций в рамках второй программы. Больше новостей. Сделаем Промоушен Медиа-кит Объявления Реклама на сайте. Стань Почитателем! Старая Подшивка Архив сайта «СП» 2. Все права защищены.

Соль, бошки, шишки Пас-де-ла-Каса