Получение ледяной уксусной кислоты часть 1

🔥Мы профессиональная команда, которая на рынке работает уже более 5 лет.

У нас лучший товар, который вы когда-либо пробовали!

______________

✅ ️Наши контакты (Telegram):✅ ️

>>>НАПИСАТЬ ОПЕРАТОРУ В ТЕЛЕГРАМ (ЖМИ СЮДА)<<<

✅ ️ ▲ ✅ ▲ ️✅ ▲ ️✅ ▲ ️✅ ▲ ✅ ️

_______________

ВНИМАНИЕ! ВАЖНО!🔥🔥🔥

В Телеграм переходить только по ССЫЛКЕ что ВЫШЕ, в поиске НАС НЕТ там только фейки !!!

_______________

Получение ледяной уксусной кислоты часть 1

ГОСТ Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия / 61 75

Получение ледяной уксусной кислоты часть 1

Поронайск купить закладку LSD 220 mkg

Коробок травы

Получение ледяной уксусной кислоты часть 1

Купить Ганджубас Екатеринбург

Направление подготовки Сирень — замечательный, декоративный кустарник, который часто используется в озеленении. Она уже цветет в нашем городе. Процесс приготовления давленых препаратов для кариологического анализа при рутинной окраске состоит из четырех стадий: предварительная обработка растительного материала, фиксация, окраска и собственно приготовление препарата. Предварительная обработка материала. Для накопления делящихся клеток на стадии метафазы и укорочения хромосом проводится предфиксационная обработка материала. Можно использовать и комбинированные обработки. Концентрации растворов и продолжительность обработки желательно подобрать экспериментально для своего объекта. Продолжительность обработки ориентировочно : при использовании колхицина — 2 часа, при использовании остальных веществ 3—4 часа. Наиболее важный момент этой стадии — определение времени начала предварительной обработки для получения наиболее интенсивного деления меристематических клеток. В условиях Новосибирска это 10—12 часов утра и 16—18 часов вечера зимнее время для большинства видов. Но у части видов высокогорных, эфемеров и некоторых других время смещается ближе к полудню. Это легко объяснимо тем, что в природе именно в это время происходит наибольшее прогревание почвы и начинается рост растений. При работе с отдельными видами или родами растений мы рекомендуем провести суточный цитологический анализ растений с целью выявления наиболее оптимального времени начала обработки для получения максимального числа делящихся клеток. Известны также способы синхронизации митозов в меристеме растений воздействием химических веществ или низкими температурами. При последнем способе проросшие семена помещают в холодильник на 3—5 сут при температуре — После обработки холодом все последующие операции проводятся при комнатной температуре. Второй момент, который также подбирается экспериментальным путем — величина корешка. У некоторых видов корешки в семени находятся в сложенном состоянии и в первые часы или даже сутки происходит не рост, а оводнение и механическое растяжение тканей например, у растений семейства Fabaceae и др. Поэтому иногда корешки длиной 5—7 мм не имеют делящихся клеток. И, наконец, одна из типичных ошибок при предварительной обработке — мелкие или опушенные семена с корешками могут плавать на поверхности раствора, снижая тем самым действие химических агентов! Поэтому при помещении таких семян их нужно 'утопить'. Фиксация материала. Мы рекомендуем использовать Фиксатор Кларка или его еще называют 'уксуснокислый спирт' или упрощенный Карнуа. Здесь следует соблюдать лишь одно правило — фиксатора необходимо примерно в 10 раз больше фиксируемого материала. Длительность фиксации от нескольких часов до одних суток. Несколько дней материал можно хранить и в фиксаторе. Приготовление красителя и окраска. Для более интенсивного окрашивания в рабочий раствор добавляется несколько капель уксуснокислого железа или на несколько секунд в него опускается железный предмет. Приготовленный таким образом раствор красителя годен для употребления неограниченно долгое время. Фиксированный препарат протравливается 2—20 минут в растворе квасцов, излишек квасцов удаляется ополаскиванием в дистиллированной воде или прикосновением фильтровальной бумаги, затем объект помещается в раствор красителя и нагревается 2—3 раза до кипения. Для этого мы рекомендуем использовать фарфоровые тигли объемом 5 мл. У нового тигля необходимо поцарапать дно для образования точек кипения, в противном случае будет происходить выброс красителя. На 2—3 корешка используется 1—1,5 мл раствора. Наша настоятельная рекомендация — не использовать один и тот же краситель дважды! Экономии красителя в этом случае не будет, о вот материал будет, как правило, испорчен! Приготовление давленых препаратов. При этом методе окраски одновременно происходит и мацерация растительного материала, что облегчает приготовление препаратов. Обратите внимание: кислоту наливают в воду! Сверху препарат накрывается покровным стеклом и нагревается на спиртовке 1—2 секунды 2—3 раза. Главное здесь не допустить закипания раствора и его выброс с препарата. Затем концом спички, одновременно придерживая покровное стекло, круговым движением или осторожным постукиванием по покровному стеклу материал равномерно рассредоточивается в один слой клеток и препарат готов для исследования под микроскопом. После предварительного просмотра, последнюю операцию можно повторить, добиваясь более равномерного расположения клеток и лучшего расположения хромосом в них. При использовании хлоралгидрата предпочтительнее или глицерина препараты не высыхают несколько дней. Препараты просматривают под микроскопом с зеленым фильтром сначала при малом увеличении, затем под большим с использованием масляной иммерсии. Клетки с хорошим разбросом хромосом, без наложений и находящиеся в одной плоскости зарисовывают или фотографируют рис. Фото А. При использовании зеленого фильтра хромосомы выглядят черными. Это очень удобно при визуальном наблюдении, но вот при фотографировании на цветную камеру необходимо для получения качественных и контрастных фотографий подобрать другой фильтр или фотографировать без него, используя настройки камеры или программы. Гематоксилин сам не является красителем, но он легко окисляется в гематеин и соединяясь с протравой, образует лаки, которые и окрашивают. Для протравливания материала используют соли алюминия, железа, меди и др. Такое 'механическое' окрашивание маскирует тонкую структуру хромосом. Так, например, у мелких хромосом часто затруднительно найти границы центромеры, у крупных хромосом не всегда заметны вторичные перетяжки и т. Поэтому окрашивание ацетогематоксилином рекомендуется для определения чисел хромосом. Для изучения морфологии хромосом мы советуем проводить окраску ацетоорсеином. Он хорошо окрашивает ядра и хромосомы и гораздо хуже другие структуры, поэтому препараты получаются чистыми, в отличие от окраски ацетогематоксилином. Приготовление красителя. К 2 г орсеина добавляют 50 мл ледяной уксусной кислоты и оставляют на сутки. Затем нагревают под тягой! К остывшему раствору приливают 50 мл дистиллированной воды и снова нагревают до кипения. Через сутки краситель фильтруют и добавляют к нему 1Н соляную кислоту в соотношении 9 : 1. Можно использовать стандарт-титры HCl. Перед употреблением краситель рекомендуется фильтровать. Фиксированные корешки или молодые листочки помещают в раствор красителя на сутки или более, в зависимости от величины корешка и объекта. Краситель в своем составе имеет соляную кислоту и поэтому одновременно с окрашиванием происходит и мацерация тканей. В некоторых случаях для мацерации применяют пектиназу: корешки из фиксатора или спирта промывают дистиллированной водой и обрабатывают при комнатной температуре в течение 30—60 минут в растворе пектиназы 1—3 мг на 1 мл воды. Далее корешки переносят в краситель. После окраски все операции такие же , как и при окраске гематоксилином. Единственное отличие и это важно! При описании кариотипов мы рекомендуем пользоваться методиками 'Ботанического журнала' Агапова, Гриф, ; Гриф, Агапова, О других методах окраски хромосом фуксином, кармином, дифференциальной окраске и др. Там же приводятся и список основных сводок по хромосомным числам растений. Для определения фертильности пыльцевых зерен используют обычно два метода: ацетокарминовый и йодный. Ацетокарминовый метод. Продолжительность фиксации колеблется от 30 мин до нескольких часов. Фертильность пыльцы можно определять ацетокарминовым методом без предварительной фиксации, то есть используя свежий материал. Это особенно важно при экспресс-анализе. Для анализа пыльник выкладывают на предметное стекло и раздавливают пинцетом в капле ацетокармина. Желательно использовать железный пинцет, так как ионы железа способствуют более интенсивному окрашиванию. С хромированных пинцетов предварительно следует убрать напильником или наждачной бумагой защитный слой хрома. Убрав лишние ткани, препарат накрывают покровным стеклом и осторожно подогревают на спиртовке. В этом процессе главное проследить за тем, чтобы слой жидкости под покровным стеклом был не слишком большим и не выходил за края, иначе можно вымыть все зерна. В результате получаем окрашенные пыльцевые зерна на светлом фоне. Временные препараты могут храниться несколько часов. Для более длительного хранения следует по краю покровного стекла нанести слой лака для ногтей или слой парафина: нагревают скальпель на спиртовке горелке , опускают в парафин и быстро проводят по краю покровного стекла, последовательно с четырех сторон. Такая заливка позволяет сохранить препарат несколько суток. У фертильных пыльцевых зерен зернистая цитоплазма и спермии окрашены в густой карминово-красный цвет. Стерильные пыльцевые зерна почти не окрашиваются или их окраска неравномерна рис. Подсчитывают процент фертильных пыльцевых зёрен от общего числа, наблюдаемых полях зрения микроскопа или на фотографиях. Приготовление ацетокармина. Растворение ведется в колбе с обратным холодильником на водяной бане в течение 30—60 минут. После остывания раствор фильтруют и помещают в посуду с притертой пробкой. Йодный метод. В его основе лежит определение крахмала при помощи йодной реакции. Фертильные и стерильные пыльцевые зерна отличаются по содержанию крахмала. Обычно фертильное пыльцевое зерно полностью заполнено крахмалом, а стерильное не имеет его совсем или содержит следы. Препарат готовят так же, как и при предыдущем методе, используя вместо ацетокармина йодный раствор. Под микроскопом можно легко отличить фертильные пыльцевые зерна по интенсивному окрашиванию рис. Стерильные пыльцевые зерна остаются неокрашенными Неокрашенными оказываются и оболочки пыльцевых зерен. Приготовление йодного раствора. Затем в раствор добавляют 1 г кристаллического йода, доводят до мл и хранят в склянке из оранжевого стекла. Пыльцевые зерна: а — стерильные и фертильные Rosa sp. Окраска ацетокармином. Красникова; б — зерно Alstroemeria сорта Регина. Окраска йодом. Фото Черемисиной А. Методика изучения мейоза не отличается от вышеописанной ацетокарминовой методики определения фертильности пыльцы, но имеет ряд особенностей. Мейоз изучают в материнских клетках пыльцы. Поэтому фиксировать бутоны необходимо до образования зрелых пыльцевых зерен. Желательно фиксировать бутоны разных размеров, крупные бутоны разрезают на части для ускоренного проникновения фиксатора. Для каждого объекта экспериментально подбираются размеры бутонов и время фиксации утренние часы или обеденное время. Визуально, пыльники должны быть прозрачные или слегка зеленовато-желтоватые, плотные, упругие. Перед изучением, флакон с красителем и пыльниками можно нагреть на водяной бане до кипения и остудить. Но эта операция нужна только для крупных пыльников, мелкие хорошо прокрашиваются в капле ацетокармина. Далее все операции проводятся согласно прописи, только вместо пыльцы мы видим на препарате удивительные картинки фаз мейоза, а их в мейозе 12, в отличие от 4 фаз митоза рис. Стадия диакинеза, хромосомы представлены бивалентами. Фото С. Получение постоянных препаратов для анатомических и гистологических исследований состоит из последовательных стадий: фиксация и промывка материала от фиксатора, обезвоживание, заливка в парафин и получение тонких срезов, окрашивание срезов, заключение срезов в среду, которая обеспечивает длительное хранение препаратов. Фиксация и промывка материала от фиксатора. Цель фиксации — сохранить клеточные оболочки и сделать материал более удобным для резки. При этом объект консервируется и в зависимости от способов фиксации происходит уплотнение или размягчение объекта. Существуют водные и спиртовые фиксаторы. Фиксатор готовится непосредственно перед использованием. Действует фиксатор очень мягко и хорошо сохраняет структуру с точки зрения морфологии. В этом фиксаторе можно оставить материал в холодильнике на неделю и более в зависимости от размеров объекта. Заливка в парафин и получение тонких срезов. При необходимости подсыпают стружку. Материал, заключенный в парафин, хранится в парафиновых блоках. Очень мелкий материал вырезают из блока кубиками и приклеивают к деревянному блоку разогретым шпателем для резки на микротоме. Для работы с более крупным материалом парафиновые блоки расплавляются, и материал помещают в разогретую каплю, предварительно сформированную на деревянном блоке. Объект опускают, ориентируя его в нужном направлении и в плоскости, и закапывают расплавленным парафином или парапластом сверху, чтобы объект утонул в нем. Готовые парафиновые кубики режутся на ротационном микротоме НМ толщиной мкм в зависимости от объекта. Освобождение от парафина парапласта. Стекла с приклеенными лентами освобождают от парафина парапласта с помощью ксилола или толуола трехкратная смена по 1 — 1. Приготовление красителей и окрашивание срезов. На дне посуды должен оставаться избыток квасцов. Созревает краситель 1 месяц на свету в посуде, накрытой марлей, до приобретения вино-красного цвета. Признаками готовности маточного раствора являются запах вишневой патоки и полное отсутствие запаха уксусной кислоты. Для окраски используют маточный раствор, разбавленный в 2 раза дистиллированной водой. Алциановый синий готовят непосредственно перед окраской препаратов. Приготовление среды заключения для длительного хранения срезов. К 12 мл 0,2 М Триc-HCl, pH 8,5 и 60 г глицерина добавляют 24 г Мовиола, тщательно перемешивают и дистиллированной водой доводят до получения объема мл. Размораживают его за сутки до использования. Монтирование препаратов. Полученные окрашенные стекла закапывают Мовиолом 4 — 5 капель и закрывают покровным стеклом, стараясь удалить воздушные пузырьки. Приготовленные таким способом препараты хранятся несколько лет. Фотографии некоторых анатомических препаратов. Окраска гематоксилином по Эрлиху и алциановым синим: а — продольный разрез цветка Allium altissimum ; б — поперечный разрез цветка Allium altissimum ; в — продольный разрез генеративной почки C erasus f ruticosa ; г — поперечный срез генеративной почки гибрида C erasus pensylvanica x C. Фото Т. Получение срезов листьев хвойных пород, как оказалось, имеет свои особенности и ниже приводится довольно простая и действенная пропись. Свежесобранная или с гербарных образцов хвоя вымачивается в дистиллированной или кипяченой воде 2—3 суток или более при комнатной температуре. После этого материал можно хранить в холодильнике долгое время, периодически заменяя воду. Такое длительное вымачивание позволяет получить качественные срезы даже на довольно старом гербарном материале несколько десятков лет. Простое кипячение, особенно на старом материале, не дает такого эффекта. Для дальнейшей работы вырезаются фрагменты в нижней, средней и верхней части хвоинки. Анализируется не менее 30 хвоинок. После охлаждения, до образования изморози, в центр квадрата столика помещают каплю воды и немедленно вертикально опускают в неё отрезок хвоинки длиной 1 см. При определенном опыте можно непосредственно ставить влажную хвоинку на столик. Здесь важно проследить за вертикальным положением хвоинки, особенно в начале заливки. В противном случае на срезах будут искажены форма и размеры внутренних структур. Выждав некоторое время, сверху по каплям добавляют воду, формируя таким способом ледяной конус, в центре которого находится хвоя. Чем больше будет основание конуса, тем крепче будет держаться объект. Высота конуса должна быть не более 5—7 мм. Излишек хвоинки отрезают. Выждав минут, начинают делать срезы толщиной 10—25 мкм. Срезы собирают с ножа мягкой кисточкой на предметное стекло. Временные препараты готовят в воде или, для более длительного хранения и просветления срезов, в глицерине. Дополнительной окраски срезов не требуется рис. На препаратах или фотографиях определяют следующие морфо-анатомические параметры: ширину хвои, толщину кутикулы, количество смоляных каналов, диаметр смоляных каналов и проводящих пучков, толщину клеток эндодермы, ширину клеток мезофилла и др. При серийных срезах можно обнаружить срезы через устьичный аппарат. Поперечный срез хвои Pinus pumila : а — целая хвоя, б — фрагмент. Аналогичным образом готовятся препараты листьев, стеблей, корней и корневищ различных растений рис. Отличается только этап предварительной обработки. Широко используется в анатомии фиксатор ФУС смесь формалина, уксусной кислоты и этилового спирта. Для лучшего проникновения фиксатора в ткани стебля, листа и других органов последние разрезают на небольшие куски, размером 0. При использовании замораживающего микротома материал отмывается от фиксатора в проточной воде 20—30 минут. Сухой материал сначала размачивают в дистиллированной воде, затем кипятят для придания гибкости. Если такая обработка недостаточна, то действуют на размягченный материал слабым раствором аммиака или едкого калия натрия. Продолжительность действия реактивов в каждом конкретном случае различна. Гербарный материал предварительно размачивается в смеси из спирта, глицерина и воды, взятых в равных соотношениях. Для приготовления срезов из сухой древесины небольшие кусочки нужно кипятить в воде 30—60 минут или больше для удаления из тканей воздуха. Время подбирается экспериментально. Перед тем как делать срезы, материал необходимо тщательно промыть в проточной воде. Промывке материала водой необходимо уделять особое внимание, особенно если предстоит делать срезы на замораживающем микротоме, так как остатки глицерина или спирта не позволяют качественно заморозить материал и в результате середина среза окажется смятой. Последний хорошо сохраняет форму объекта. Полученные срезы собираются мягкой кисточкой в чашку Петри с подогретой водой для растворения желатина. Анатомические и гистологические препараты: а — поперечный срез средней жилки листа Prun us sp. Локализация кадмия в корне Eichh o rnia cr a ssipes после выращивания на среде с добавлением солей Cd окраска дитизоном : а — общий вид; б — фрагмент. Для приготовления срезов от руки используется опасная бритва и сердцевина бузины классический вариант! И первое и второе в настоящее время, к сожалению, малодоступно. Опасную бритву можно заменить лезвием для бритья, предварительно сделав из полоски металла оправку. Можно использовать оправку от сменных лезвий для скребков Stayer рис. Эти лезвия можно использовать для получения срезов после дополнительной точки на камне и правки. Сердцевину бузины можно заменить пенопластом или пенополистиролом сердцевина утеплителя для стен, обычно светло-оранжевого цвета. Для удобной работы вырезается цилиндр или усеченный конус длиной 4—5 см. Сверху в прорезь вставляется листовая пластинка иногда несколько , стебель и т. При изготовлении срезов такой цилиндр берется в левую руку, большим и указательным пальцами сжимается верх фиксируется объект , а правой рукой с зажатым лезвием делают срез. Лезвие нужно двигать на себя наискось одним плавным быстрым движением. Для уменьшения прилипания среза к лезвию, объект режут во влажном состоянии. Для этого бритву и материал смачивают водой, если срезы делают с живого материала, или спиртом, если он хранился в спирте. Полученные срезы снимают с лезвия при помощи препаровальной иглы или мягкой кисточки в чашку Петри с дистиллированной водой. Временные препараты можно приготовить в капле воды или, для более длительного хранения, в глицерине. Здесь мы намеренно не останавливаемся на способах и методах окраски анатомических препаратов, цели и задачи которых разнообразны. На Рис. С методами окраски рекомендуем ознакомиться в приводимом ниже списке литературы. Пробоподготовка является ключевым этапом в исследовании любого объекта. Некачественная или недостаточная пробоподготовка может служить причиной ошибок и сбоев в работе оборудования. Это может не только повлиять на результаты работы и качество анализа, но и вывести оборудование из строя. Материал для исследования не более 10х10 мм монтируется на стандартные алюминиевые или латунные столики диаметром 20 мм. Для этого существует несколько способов:. Образец не должен быть слишком влажным или слишком сухим. Свежесобранные б. Во втором случае, наоборот, образец следует подержать во влажной камере от нескольких минут до нескольких часов. Время, как в первом, так и во втором случае подбирается экспериментально. Листья, семена, плоды многих растений покрыты толстым слоем кутикулы, маскирующей рисунок поверхности. Для удаления кутикулы материал обрабатывают в органических растворителях: бензоле, ксилоле, хлороформе, нефрасе бензин для зажигалок. Используют как чистые растворы, так и в различной комбинации, например хлороформ и метанол в соотношении 1 : 1. Для каждого объекта пропорции и время обработки подбирается экспериментально, но не менее суток иногда 2—3 при использовании органических растворителей. С большой осторожностью можно обработать объект в чистой серной кислоте, в течение нескольких секунд, после чего материал необходимо хорошо промыть в дистиллированной воде и высушить. Материал для исследования монтируется на стандартные алюминиевые или латунные столики диаметром 10 мм. Одновременно в камеру микроскопа помещается 9 или 16 столиков. Образец приклеивается серебряным или углеродным проводящим клеем на столик или закрепляется на столике при помощи двухсторонней проводящей углеродной или металлической ленты-скотча или на специальных круглых проводящих углеродных держателях таблетках. Проводящие металлические образцы обычно не требуют специальной подготовки и могут быть непосредственно помещены в камеру микроскопа. Если требуется, образцы могут подвергаться очистке, например, ультразвуком. Непроводящие образцы обычно подвергаются напылению тонкого проводящего слоя для снятия заряда и экранирования падающего пучка от накопленного в объёме материала заряда. Для проводящих покрытий чаще всего используют углерод, алюминий, медь, золото или сплав золота с палладием. Напыление производится на установке Mini SC Если невозможно напыление пленки на образец, то в СЭМ с переменным вакуумом возможно снятие заряда с образца ионами вводимых в камеру газов обычно водяные пары или азот. Накопления заряда на образце так же можно избежать при работе при низких ускоряющих напряжениях. Прием в аспирантуру ЦСБС. Диссертация Шанмак Р. Новые публикации в GBIF. Решение диссовета. Д Новосибирска от

Cocaine телеграмм Солигорск

Получение ледяной уксусной кислоты часть 1

Попперсы в Казани