Основы культивирования
Основы культивированияОсновы культивирования
Рады представить вашему вниманию магазин, который уже удивил своим качеством!
И продолжаем радовать всех!)
Мы - это надежное качество клада, это товар высшей пробы, это дружелюбный оператор!
Такого как у нас не найдете нигде!
Наш оператор всегда на связи, заходите к нам и убедитесь в этом сами!
Наши контакты:
Telegram:
ВНИМАНИЕ!!! В Телеграмм переходить только по ссылке, в поиске много фейков!
У пастеровских и градуированных пипеток широкий конец за-крывают ватой, после чего их помещают в специальные пеналы или обертывают бумагой и стерилизуют. При пересеве бактериальной культуры берут пробирку в левую руку, а правой, обхватив ватную пробку IV и V пальцами, вынимают ее, пронося над пламенем горелки. Вынув петлю, обжигают край пробирки и закрывают ее пробкой. Петлю стерилизуют в пламени горелки и ставят в штатив. После инкубации посева появляется равномерный сплошной рост бактерий. Для культивирования анаэробов необходимо понизить окислительно-восстановительный потенциал среды, создать условия анаэробиоза, т. Это достигается применением физических, химических и биологических методов. Основаны на выращивании микроорганизмов в безвоздушной среде, что достигается: Основаны на поглощении кислорода воздуха в герметически закрытом сосуде анаэро-стате, эксикаторе такими веществами, как пирогаллол или гидросульфит натрия Na2S Основаны на совместном выращивании анаэробов со строгими аэробами. Для этого из застывшей агаровой пластинки по диаметру чашки вырезают стерильным скальпелем полоску агара шириной около 1 см. Получается два агаровых полудиска в одной чашке. На одну сторону агаровой пластинки засевают аэроб, например часто используют S. На другую сторону засевают анаэроб. Края чашки заклеивают пластилином или заливают расплавленным парафином и помещают в термостат. При наличии подходящих условий в чашке начнут размножаться аэробы. После того, как весь кислород в пространстве чашки будет ими использован, начнется рост анаэробов через 3—4 сут. В целях сокращения воздушного пространства в чашке питательную среду наливают возможно более толстым слоем. Т- и В-лимфоциты, макрофаги. Т-лимфоциты выполняют следующие функции: По функциональным характеристикам в популяции Т-лимфоцитов выделяют Т-хелперы гуморального иммунитета, Т-хелперы клеточного иммунитета, Т-супрессоры, Т-цитотоксические клетки. Выделяют две субпопуляции В-лимфоцитов: Зрелые В-лимфоциты и их потомки- плазматические клетки плазмоциты являются антителопродуцентами. Их основным продуктом являются иммуноглобулины. Кроме того, В-лимфоциты являются профессиональными АПК антигенпрезентующая клетка. Они участвуют в формировании гуморального иммунитета, В-клеточной иммунологической памяти и гиперчувствительности немедленного типа. Потомками В-лимфоцитов являются клетки иммунологической памяти и плазматические клетки. Основные морфологические признаки последних — обширная цитоплазма, развитый эндоплазматический ретикулум и аппарат Гольджи с большим количеством рибосом. Активно синтезирующий плазмоцит живет недолго, не более суток. Функциональной активностью В-лимфоцитов управляют растворимые антигены и иммуноцитокины Т2-хелпера, макрофага и других клеток, например ИЛ-4,5,6. В зависимости от строения Т-клеточного антигенного рецептора TCR и функциональной направленности сообщество Т-лимфоцитов может быть разделено на отдельные группы. Различают два типа TCR: Первый тип — гетеродимер, который состоит из двух полипептидных цепей — альфа и бета; он характерен для традиционных Т-лимфоцитов, известных как Т-хелперы и Т-киллеры. Второй тип обнаруживается на поверхности особой популяции гамма-дельта Т-лимфоцитов. Профессионально Т-лимфоциты также разделяют на две субпопуляции: Задачу регуляции иммунного ответа в основном активирующую выполняют Т-хелперы. Предполагалось существование Т-супрессоров, которым приписывали функцию торможения развития иммунной реакции супрессии. О Эффекторную функцию осуществляют цитотоксические лимфоциты: Т-киллеры и естественные киллеры. В организме Т-лимфоциты обеспечивают клеточные формы иммунного ответа гиперчувствительность замедленного типа, трансплантационный иммунитет, противоопухолевый иммунитет и т. Их созреванием, дифференцировкой и активностью управляют цитокины. Т-киллер анализирует клетки собственного организма в поисках измененной, то есть отличной от собственной, структуры комплекса антиген-МНС I класса. Мутантные клетки, клетки, пораженные вирусом, или клетки аллогенного трансплантата несут на своей поверхности такие признаки генетической чужеродности. Поэтому они являются мишенью Т-киллера. Т-киллер устраняет клетки-мишени путем антителонезависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности, для чего синтезирует ряд токсических субстанций: Перфорин - токсический белок, который синтезируют цитотоксические лимфоциты — Т-киллеры и естественные киллеры. Т-киллеры обеспечивают в организме антителонезависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность, формирование Т-клеточной иммунологической памяти и гиперчувствительности замедленного типа. Специфическая профилактика и лечение. Бруцеллёз - зоонозное инфекционно-аллергическое заболевание, склонное к хронизации, протекающее с преимущественным поражением опорно-двигательного аппарата, сердечно-сосудистой, нервной и половой систем. Brucellaceae,род Brucella состоит из 6 самостоятельных видов, которые подразделяют на ряд биоваров. Бруцеллы отличаются выраженным полиморфизмом: Наиболее часто поражения у человека вызывает В. Несколько реже - В. В редких случаях поражения у человека вызывает В. Строгие аэробы, некоторые штаммы нуждаются в повышенной концентрации СО2. На средах растут медленно более недели. Являются внутриклеточными паразитами ретикулоэндотелиальной системы; выделяют низкомолекулярные продукты, ингибирующие слияние фагосомы и лизосомы клетки. Механизм передачи возбудителя разнообразный, чаще всего фекально-оральный ; также возможны контактно-бытовой при попадании возбудителя на повреждённые кожные покровы и слизистые оболочки и аэрогенный механизмы передачи. Для выделения возбудителя проводят посевы крови, пунктатов лимфатических узлов, спинномозговой жидкости, костного мозга. В последнее время в практику внедряют реакцию агрегатгемагглютинации, ИФА, обнаруживающие антигены бруцелл в биологических средах в первую очередь в крови. Реакция Райта наиболее информативна при остром бруцеллёзе. В последнее время с успехом применяют реакцию лизиса бруцелл под воздействием сыворотки крови больного. Для получения адекватных результатов рекомендовано одновременное применение серологических методов исследования комплексная серодиагностика. Широко распространена внутрикожная аллергическая проба Бюрне с введением бруцеллина белковый экстракт бульонной культуры бруцелл. Учитывая время, необходимое для нарастания специфической сенсибилизации организма к антигенам бруцелл, её постановку рекомендуют не ранее дней от начала болезни. Положительную пробу Бюрне наблюдают при всех формах бруцеллёза, включая латентное течение инфекционного процесса; она годами сохраняется после реконвалесценции. Проба может быть положительной также у лиц, привитых живой противобруцеллезнои вакциной, и у сотрудников лабораторий, длительно контактировавших с антигенами бруцелл. Оптимальным считают назначение двух антибиотиков, один из которых должен проникать через клеточную мембрану. Лечебную убитую бруцеллёзную вакцину в последние годы для лечения больных применяют всё реже из-за её способности вызывать подавление иммунитета, увеличивать возможность рецидивов, вызывать аутоиммунные реакции и реакции на содержащиеся в ней балластные вещества. Энергию, необходимую для синтеза органических веществ, аутотрофы получают при окислении минеральных соединений. К аутотрофным бактериям относятся нитрифицирующие находящиеся в почве , серобактерии живущие в теплых источниках с содержанием сероводорода , железобактерии размножающиеся в воде с закисным железом и др. Универсальным источником углерода служат различные углеводы их часто добавляют в питательные среды , белки и др. Гетеротрофы играют значительную роль в уничтожении различных мертвых органических остатков. Такие бактерии называются сапрофитами от sapros — гнилой, phyton — растение. Микробы, способные существовать за счет органических соединений организма животных и в клетках растений, получили название паразитических parasitos — нахлебник. Среди патогенных микроорганизмов выделяют так называемые облигатные паразиты, которые способны жить только в живых клетках или тканях. К аминогетеротрофам относятся все патогенные микроорганизмы и большинство сапрофитов. Наиболее простой способ — пассивная диффузия, при которой поступление вещества в клетку происходит из-за различия градиента концентрации разницы концентрации по обе стороны цитоплазматической мембраны. Одним из таких механизмов является облегченная диффузия, которая происходит при большей концентрации вещества вне клетки, чем внутри. Облегченная диффузия — процесс специфический и осуществляется особыми мембранными белками, переносчиками, получившими название п е р м е а з, так как они выполняют функцию ферментов и обладают специфичностью. Они связывают молекулу вещества, переносят в неизмененном виде к внутренней поверхности цитоплазматической мембраны и высвобождают в цитоплазму. Так как перемещение вещества происходит от более высокой концентрации к более низкой, этот процесс протекает без затраты энергии. Третий возможный механизм транспорта веществ поучил название активного переноса. Этот прессе наблюдается при низких концентрациях субстрата в окружающей среде и перенос растворенных веществ также в неизмененном виде осуществляется против градиента концентрации. В активном переносе веществ участвуют пермеазы. Поскольку концентрация вещества в клетке может в несколько тысяч раз превышать ее во внешней среде, активный перенос обязательно сопровождается затратой энергии. Расходуется аденозинтрифосфат АТФ , накапливаемый бактериальной клеткой при окислительно-восстановительных процессах. В переносе радикалов участвуют пермеазы. Р СК широко используют для лабораторной диагностики венерических болезней, риккетсиозов, вирусных инфекций. Реакция протекает в две фазы. Первая фаза - взаимодействие антигена и антител при обязательном участии комплемента. Вторая - выявление результатов реакции при помощи индикаторной гемолитической системы эритроциты барана и гемолитическая сыворотка. Разрушение эритроцитов гемолитической сывороткой происходит только в случае присоединения комплемента к гемолитической системе. Если же комплемент адсорбировался ранее на комплексе антиген-антитело, то гемолиз эритроцитов не наступает. При наличии в исследуемой сыворотке антител, комплементарных антигену, образующийся комплекс антиген-антитело связывает адсорбирует на себе комплемент. При добавлении гемолитической системы гемолиза не происходит задержка гемолиза , так как весь комплемент израсходован на специфическую связь комплекса антиген-антитело, а эритроциты остались неизменными. При отсутствии в сыворотке антител, комплементарных антигену, специфический комплекс антиген-антитело не образуется и комплемент остается не связанным. Поэтому при добавлении гемолитической системы комплемент присоединяется к ней. РСК позволяет выявить антитела к любому штамму одного и того же серотипа вируса. Диагностическое значение имеет четырехкратное увеличение титра антител в парных сыворотках в период эпидемии гриппа и двукратное нарастание в сыворотках крови больных при характерной клинической картине. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых стафилококками. Расщепляют углеводы, глюкозу, манит до кислоты и газа; в анаэробных условиях расщепляют липиды, белки, выделяют каталазу. Ровный край, блестящие, бывают золотистые, с лимонным пигментом или белые колонии. Ферментация маннита в анаэробных условиях характеризует вид S, aureus. Протеолитическая активность стафилококков проявляется в способности выделять сероводород при разложении белков и разжижать желатин в течение 4—5 суток в виде воронки по ходу укола. АГ - свойства - У стафилококков выделяют более 50 антигенных субстанций, разделяемых на родовые, видовые и типовые Аг. Видоспецифичными Аг стафилококков могут служить тейхоевые кислоты. Патогенность — стафилококки вызывают гнойно-воспалительные процессы различной локализации, местного характера и генерализованные - сепсис, септикопиемию. Особенно опасными являются больничные или госпитальные инфекции. Выделяют три группы токсины, ферменты патогенности и поверхностные структуры:. Именно эти токсины ответственны за развитие пищевых отравлений. Наиболее часто регистрируют интоксикации, вызываемые энтеротоксинами А и D. Чувствительность к физическим и химическим факторам — стафилококки очень устойчивы к высушиванию, могут сохраняться в гное очень долго до нескольких месяцев. Погибают при прямом воздействии солнечного света в течение 10—12 ч. Они довольно устойчивы к нагреванию— при 0 погибают за мин, при 0 — за 10 мин; сухой жар убивает их за 2 ч. Бактерии менее устойчивы к действию дезинфицирующих средств, но резистентны к чистому этанолу. Источник инфекции Основным источником стафилококковой инфекции являются люди, больные стафилококковой ангиной, носители стафилококка на слизистых оболочках, а также загрязненные стафилококками предметы Пути передачи заражения: Стафилококки, как и все УПМ, вызывают оппортунистическую инфекцию. Большое значение имеют факторы НФЗ неспецифические факторы защиты , особенно - фагоцитоз; Постинфекционный иммунитет — клеточно-гуморальный, нестойкий и ненапряженный, как при всех оппортунистических инфекциях. В окрашенных мазках отделяемого из очага поражения видны типичные стафилококки. Но при микроскопировании мазка практически невозможно отличить непатогенные S. Для этой цели используют культуральные методы исследования. При посеве материала на чашки с ЖСА через ч при инкубации образуются типичные колонии круглые, гладкие, выпуклые , которые различные пигменты: Наряду с реакцией плазмокоагуляции, большое значение приобрела еще одна важная способность стафилококков, характеризующая их потенциальную патогенность, -дезоксирибонуклеазная активность. Стафилококки, выделенные из патологического материала, как правило, обладают ДНК-азой. Коагулазопозитивные штаммы, полученные от носителей, могут не иметь этого фермента, и обычно отсутствие дезоксирибонуклеазной активности сочетается с низкой биохимической способностью и атоксигенностью таких культур стафилококков. Типирование бактериофагами золотистого стафилококка достаточно широко применяют в клинической эпидемиологии. Лечение стафилококковых инфекций Специфическое этиотропное лечение проводится антибиотиками широкого спектра действия, используются полусинтетические пенициллины оксациллин , цефалоспорины с обязательным учетом антибиотикограммы. При тяжёлом или хроническом течении следует применять антистафилококковый иммуноглобулин. Существует стафилококковый бактериофаг, обладающий способностью специфически лизировать стафилококковые бактерии. Многие виды бактерий подразделяют по одному признаку на биологические варианты — биовары. Культуры микроорганизмов одного и того же вида, или биовара, выделенные из различных источников или в разное время из одного и того же источника, называют штаммами. Колонии бактерий разных видов отличаются друг от друга по своей мор-фологии, цвету и другим признакам. Морфологические и тинкториальные признаки бактерий изучают при микроскопическом исследовании мазков, окрашенных разными методами, и нативных препаратов. Для установления биовара хемовара, серовара, фаготипа проводят дополнительные исследования по выялвениб соответствующего маркера — определению фермента, антигена, чувствительности к Фанам. Иммуноферментный анализ ИФА В основе иммуноферментного анализа лежит известная иммунная реакция антигена и антитела. Один из этих реагентов является определяемым веществом, а другой - узнающим, обладающим известной стандартной специфичностью избирательностью по отношению к определяемому веществу. Для выявления образовавшихся иммунных комплексов антиген-антитело используется фермен т, которым предварительно метится узнающий компонент антиген или антитело. Сам фермент, естественно, не виден, поэтому визуализация присутствия вещества, определяемого методом ИФА, достигается применением посредника - хромогена. Это особое химическое соединение, которое хорошо растворимо в воде, и раствор которого бесцветен. Превращение бесцветного хромогена в цветное вещество хромофор происходит под действием фермента, для которого хромоген является субстратом. В крови и других биологических материалах при комнатной температуре вирус сохраняет жизнеспособность в течение нескольких суток З. Заражение макрофагов также возможно при поглощении иммунных комплексов, содержащих вирус. Её своеобразие заключается лишь в тропности возбудителя к определённым клеткам организма, что отличает инфекционные заболевания друг от друга. Характерны иммунные расстройства, вызываемые ВИЧ. Наиболее типичны; пневмоцистная пневмония, токсоплазмоз, кандидоз патогномоничны поражения пищевода и дыхательного тракта , криптококкоз, гистоплазмоз, атипичные микобактери-озы, генерализованные ЦМВ и герпетические инфекции. ИФА — основной метод диагностики вич. Он позволяет выявить вирусные Аг и AT к ним. Метод позволяет обнаружить специфические AT в сыворотке и является только подтверждающим тестом. Результаты рассматривают как положительные после обнаружения AT к р24, р31, а также к gp41 либо к gp Грибы относятся к эукариотам, то есть по строению клеток сходны с растениями и животными. Ядро содержит набор хромосом, реплицирующихся путем митоза. Благодаря ней наш организм надежно защищен от повторных антигенных интервенций. Этому имеется множество примеров: Это обеспечивает постоянную готовность иммунной системы реагировать на повторный контакт с антигеном по вторичному типу. Однако феномен иммунологической памяти имеет и отрицательные стороны. Проявляется она отсутствием специфического продуктивного иммунного ответа организма на антиген в связи с неспособностью его распознавания. Ими могут быть практически все вещества, однако наибольшей толерогенностью обладают полисахариды. Различают высокодозовую и низкодозовую толерантность. Низкодозовая толерантность, наоборот, вызывается очень малым количеством вы-сокогомогенного молекулярного антигена. Механизмы толерантности многообразны и до конца не расшифрованы. Известно, что ее основу составляют нормальные процессы регуляции иммунной системы. Элиминация из организма антигенспецифических клонов лимфоцитов. Блокада биологической активности им-мунокомпетентных клеток. Возбудители коклюша и паракоклюша. Коклюш — острое инфекционное заболевание преимущественно детского возраста, сопровождающееся характерным судорожным кашлем. Возбудитель коклюша Bordetella pertussis и паракоклюша Bordetella parapertussis относятся к роду Bordetella, семейства Alcoligenaceae. Морфология и тинкториальные свойства. Бактерии имеют вид палочек длиной до 2 мкм, овоидной формы, неподвижны, не образуют спор. При специальной окраске у возбудителя коклюша обнаруживается нежная капсула. Легко окрашиваются обычными анилиновыми красителями, грамотрицательны. Культивирование и ферментативные свойства. Бордетеллы являются аэробами, культивируются на специальных питательных средах: Для подавления роста сопутствующей флоры к средам добавляется пенициллин. Коклюшные и паракоклюшные бактерии на среде Борде—Жангу образуют мелкие блестящие выпуклые колонии, напоминающие капельки ртути и серовато-кремового цвета колонии на КУА. Оба вида бактерий обладают гемолитическими свойствами. Колонии бактерии паракоклюша по внешнему виду очень похожи на бактерии коклюша, но они более крупные по размерам и появляются раньше, чем коклюшные колонии. Положительный ответ при бактериологической диагностике коклюша выдается только при обнаружении микроба в I фазе. Антигенная структура и токсинообразование. Бактерии имеют сложную антигенную структуру: В зависимости от наличия ведущихагглютиногенов, принято выделять четыре серотипа 1. Причем в последнее десятилетие преобладающими являются серовары 1. В то же время серовары 1. Содержат биологически активные субстанции, обладающие токсическими свойствами: Во внешней среде бактерии малоустойчивы. В сухой мокроте сохраняются несколько часов. Входными воротами инфекции являются слизистые оболочки дыхательных путей. После перенесенного коклюша остается пожизненный, стойкий. Механизм передачи — аэрозольный; путь передачи — воздушно-капельный. Бактериологический метод — выделение B. Посев осуществляют на казеиново-угольный агар. Идентификация и дифференциация коклюшных и паракоклюшных бактерий осуществляются по культуральным, биохимическим и антигенным свойствам. При необходимости интервал между прививками можно удлинить до 6 месяцев, а в исключительных случаях — до 12 месяцев. Вторая ревакцинация против коклюша не проводится. Ферменты бактерий классифицируются на экзоферменты и эндоферменты. Экзоферменты выделяются бактериальной клеткой в окружающую среду для внеклеточного переваривания. Этот процесс осуществляется с помощью гидролаз, которые расщепляют макромолекулы питательных веществ до простых соединений — глюкозы, аминокислот, жирных кислот. Такие соединения могут свободно проходить через оболочку клетки и с помощью пермеаз передаваться в цитоплазму клетки для участия в метаболизме, являясь источниками углерода и энергии. Некоторые экзоферменты выполняют защитную функцию, например, пенициллиназа, выделяемая многими бактериями, делает клетку недосягаемой для антибиотика — пенициллина. Ферменты бактерий классифицируются также на конститутивные и индуцибельные. Конститутивными называются такие ферменты, которые синтезируются клеткой независимо от наличия субстрата в среде, индуцибельные ферменты образуются бактериями только при наличии в среде соответствующего индуцирующего соединения, т. Например, в геноме кишечной палочки заложена способность разлагать лактозу, но только при наличии в среде лактозы клеткой синтезируется фермент, катализирующий ее гидролиз. Известны также ферменты, которые получили название аллостерических. Кроме активного центра у них имеется регуляторный или аллостерический центр, который в молекуле фермента пространственно разделен с активным центром. Патогенные бактерии обладают наряду с ферментами обмена также ферментами агрессии, являющимися факторами вирулентности. К таким ферментам относятся. FAQ Обратная связь Вопросы и предложения. Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Место микробиологии и иммунологии в современной медицине. Роль отечественных ученых в развитии микробиологии, вирусологии и иммунологии. Роль кишечной палочки в норме и патологии. Понятие о генотипе и фенотипе. Возбудители гепатитов а, в и с. Основные принципы классификации микробов. Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в иммунитете. Неспецифические факторы защиты организма. Иммуноглобулины, структура и функции. Микробиологическая диагностика и лечение. Методы микроскопии люминесцентная, темнопольная, фазово-контрастная, электронная. Рост и размножение бактерий. Способы получения бактериями энергии дыхание,брожжение: Основные принципы культивирования бактерий: Микробное число, коли-титр, перфрингенс-титр почвы. Искусственные питательные среды, их классификация. Требования, предъявляемые к питательным средам. Понятие о стерилизации, дезинфекции, асептике и антисептике. Условия возникновения инфекционного процесса. Возбудитель клещевого сыпного тифа. Роль в патологии человека. Микрофлора воздуха и методы ее исследования. Типы и механизмы питания бактерий. По усвоению углерода бактерии можно разделить на два типа: По способности усваивать азот бактерии делятся также на две группы: К аминогетеротрофам относятся все патогенные микроорганизмы и большинство сапрофитов По источникам энергии различают 1. Механизм питания бактерий 1. Выделяют три группы токсины, ферменты патогенности и поверхностные структуры: Принципы и методы выделения чистых культур бактерий: Принципы и методы выделения чистых культур бактерий. Эндоферменты катализируют метаболические реакции, происходящие внутри клетки. Соседние файлы в папке Экзамен
ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ
Биотехнологические основы культивирования микроорганизмов.
Как получить коноплю
1.Основные принципы культивирования бактерий:
Перт С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток
Физиолого-биохимические основы культивирования клеток растений. Лекция 3
Биотехнологические основы культивирования микроорганизмов.
1.Основные принципы культивирования бактерий:
Купить закладки кокаин в Вытегре