Определение методом тонкослойной хроматографии

Скачать файл - Определение методом тонкослойной хроматографии

Хроматография разработана русским ученым М. Цветом в г. В настоящее время она бурно развивается и широко используется в фармацевтической химии. Хроматографическое разделение основано на том, что вещество, растворенное в жидкости, перемещается вместе с нею и то же время удерживается на поверхности твердой фазы за счет адсорбции, ионного обмена или другого механизма. Хроматографию можно определить как процесс, основанный на многократном повторении актов сорбции и десорбции вещества при перемещении его в потоке подвижной фазы вдоль неподвижного сорбента. В зависимости от природы подвижной и неподвижной фазы выделяют различные методы хроматографии. Этот метод широко применяется в аналитической токсикологии при исследовании веществ, вызывающих острое отравление. Он позволяет провести качественное и полуколичественное определение яда. В основе ТСХ лежит разделение смеси лекарственных веществ, происходящее на слое адсорбента, нанесенном на подложку. Является простым, достаточно чувствительным и доступным для практической работы, не требующим дорогостоящих приборов. Он дает возможность проводить качественный и количественный анализ фармакологических средств минерального, животного, растительного и микробного происхождения. Основные этапы анализа включают экстракцию ядовитых веществ из исследуемого материала, очистку экстрактов от посторонних примесей, концентрирование их, хроматографическое разделение на тонком слое пластинки, проявление полученных пятен и количественное определение исследуемого вещества. Экстракция — это процесс переноса растворенного вещества из одной жидкой фазы в другую, не смешивающуюся с ней. В качестве экстрагирующего растворителя берут обычно органические вещества, в которых хорошо растворяется исследуемое вещество. Метод распределения между двумя несмешивающимися жидкостями основан на различии коэффициентов распределения ядовитых веществ и сопутствующих веществ между двумя несмешивающимися растворителями. С этой целью обычно используют н-гексан и диметилформамид или ацетонитрил. Осаждение жиров основано на плохой их растворимости в холодном ацетоне, для чего экстракт вымораживают в холодильнике или в приготовленных охлаждающих смесях со льда снега и различных солей хлорида натрия, сульфата и карбоната натрия, нитрата аммония и натрия. Концентрирование экстрактов осуществляют при помощи вакуумного ротационного испарителя, испарения с капилляром под вакуумом на водяной бане или в токе воздуха на водяной бане. Самые низкие потери препаратов бывают при использовании ротационного испарителя. Разделение лекарственных веществ, содержащихся в концентрированном экстракте после нанесения исследуемого материала производится на пластинках с тонким слоем сорбента в хроматографических камерах, на дне которых находится подвижный растворитель. С этой целью можно использовать готовые пластинки отечественного и зарубежного производства диафол, силуфол и др. Перед анализом на стартовую линию пластинки 1,5 см от края наносят в виде точек анализируемые пробы и известные количества стандартных растворов предполагаемых ядовитых веществ при помощи микропипетки или специального микрометрического шприца. Иногда во время нанесения пробы пятно обрабатывают струей теплого воздуха. Размер пятна на слое сорбента в диаметре не должен превышать нескольких миллиметров. За 1 ч до анализа в хроматографическую камеру заливают подвижный растворитель, уровень которого не должен превышать 0,5 см. Пластинки помещают в растворитель и камеру плотно закрывают. После поднятия фронта растворителя по сорбенту на расстояние 1 см от верхнего края пластинки ее вынимают, отмечают верхнюю границу подъема растворителя линию фронта , высушивают на воздухе и обрабатывают проявляющим реагентом. Качественная идентификация ядовитых веществ проводится по величине Rf отношение расстояния от линии старта до центра пятна к расстоянию от линии старта до линии фронта , которая для каждого яда постоянна. Результаты ТСХ регистрируют в виде коэффициентов удерживания Rf. Расстояние, пройденное от старта анализируемым образцом. Расстояние, пройденное от старта фронтом растворителя. Более удобным является показатель Rfx hRf , особенно в случаях, когда используется стандартная пластина 10 см. На воспроизводимостьRfможет оказать влияние ряд факторов, но это влияние может быть сведено к минимуму, если вместе с каждым образцом анализируются стандартные соединения. Развитие аналитической ТСХ идет по пути повышения чувствительности, унификации процесса и условий хроматографии. Использование готовых систем, пластин, камер, проявителей и идентификационных атласов гарантирует высокую воспроизводимость, надежность анализа и исключает субъективный фактор. Количественный анализ заключается в измерении площадей пятен исследуемого вещества и известного количества стандартного вещества. Более точный результат дает определение интенсивности окраски и диаметра пятен при помощи специальных приборов- денситометров. Прибор регистрирует их в виде пиков, по площади и высоте которых рассчитывают количество исследуемого вещества. FAQ Обратная связь Вопросы и предложения. Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Омский государственный аграрный университет им. Идентификация органических лекарственных веществ. Общие химические реакции идентификации органических соединений. Специальная фармацевтическая химия - методы анализа отдельных лекарственных веществ. Расстояние, пройденное от старта фронтом растворителя Более удобным является показатель Rfx hRf , особенно в случаях, когда используется стандартная пластина 10 см.

Определение методом тонкослойной хроматографии

Скачать файл - Определение методом тонкослойной хроматографии

Справочник химика 21

Определение аминокислот методом тонкослойной хроматографии

Тонкослойная хроматография

Хроматографические методы анализа.

Report Page