Общая информация

Залогом успеха всех микробиологических операция является стерильность материалов, среды и инструментов. Когда мы говорим о стерильности мы имеем ввиду, что все формы жизни были уничтожены. Это значит полное отсутствие вегетативных клеток или их спор.

Как правило стерильность достигается температурой в 170 С с выдержкой по крайней мере 45 минут. Это означает, что для сухого жара подходит оборудование, которое нужно сохранять сухим, хорошо переносит высокие температуры, и обладает хорошей теплопроводностью. В эту категорию ходят все стеклянные сосуды и контейнеры, которые слишком велики для автоклава.

Авторы учебников по микробиологии не всегда согласны друг с другом о лучшей температуре. В таблице ниже представлены их рекомендации:

У меня есть собственно мнение. Все зависит от того что вы стерилизуете. Если это стекло или нержавеющая сталь, 170 С на 45 минут должно быть достаточно. Единственное, когда нужно быть более осторожным это если в том, что вы хотите обработать есть хлопковые пробка, как например в пробирках. Белый хлопок до процедуры приобретает кремовый цвет при 150 С. При более длительной выдержке хлопок желтеет. Пожелтение можно считать признаком окончания стерилизации. При 180 в хлопке формируются различные смолы, которые снижают фильтрующую способность, так же хлопок может стать коричневым и даже черным.

Эти особенности можно использовать для проверки вашего оборудования. Просто положите что ни будь из хлопка в печь и включите на 160 С. Через 45 минут хлопок должен поменять цвет с белого на от кремового до желтый.

Хотя нагревание до 100 С эффективно разрушает вегетативные клетки, общепринятым способом для абсолютной стерильности является влажный жар под давлением. Это единственный способ уничтожить и бактерии, и их споры. Споры погибают только когда температура достигает 121 С и держится хотя бы 15 минут. Споры могут сохранять жизнеспособность при 100 С несколько часов. Они так же устойчивы к сухому жару. Споры не являются главной опасностью для пива и сусла. Стерилизация под давлением в основном нужна что бы разрушить споры плесени, которые могут прорасти на поверхности питательного агара.

Достижение температуры в 121 С в автоколаве или скороварке основывается на простом факте, что чистый пар под давлением достигает больших температур чем температура закипания воды при атмосферном давлении.

Очень важно работать именно с чистым паром. Под чистым паром понимается только водяной пар без примесей воздуха.

В маленькой бытовой скороварке для этого нужно дать пару минут выйти воздуху. Для больших устройств рекомендуется подождать хотя бы 10 минут. Для устройств с манометром отсчет времени можно начинать только когда давление внутри достигнет 15 фунтов или одной атмосферы и затем стабилизируется. При этом давлении, с полностью вышедшим воздухом, температура будет 120С. Это давление нужно удерживать хотя бы 15 минут. Если объем стерилизуемой жидкости больше 500 мл следует немного увеличить время.