Меф Страсбург
Меф СтрасбургМеф Страсбург
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Меф Страсбург
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Гарантии ❗ Качество ❗ Отзывы покупателей ❗
• • • • • • • • • • • • • • • • •
👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇
Наши контакты:
▶️▶️▶️ (НАПИСАТЬ ОПЕРАТОРУ В ТЕЛЕГРАМ)️ ◀️◀️◀️
👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆
• • • • • • • • • • • • • • • • •
🚩 ИСПОЛЬЗУЙТЕ ВПН (VPN), ЕСЛИ ССЫЛКА НЕ ОТКРЫВАЕТСЯ!
🚩 В Телеграм переходить только по ссылке что выше! В поиске тг фейки!
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Меф Страсбург
Правоохранители установили, что Бугаев получил наркотические вещества во владение с помощью найденной на улице закладки. На Алексея заведено уголовное дело о покушении на сбыт в особо крупном размере. При задержании Бугаев оказал сопротивление полицейским, получив семь суток заключения в СИЗО за неповиновение. Футболист является воспитанником московского «Торпедо». Также он выступал за такие российские клубы, как «Томь», «Локомотив», «Химки» и «Краснодар», после чего завершил карьеру в году. В годах игрок провёл семь матчей за сборную России. На информационном ресурсе применяются рекомендательные технологии в соответствии с Правилами. Главные новости Обсуждаемые. Adidas выпустит фирменный логотип Джуда Беллингема. Хави Мартинес: Левандовски страдает в «Барселоне» от того, что не получает мяч. Сычёв: реформы — во благо. Уже нельзя сказать, что Вторая лига — дно российского футбола. Сон Хын Мин — о вылете из Кубка Азии: у меня нет сожалений. Я отдал всё, что мог. Источник: минское «Динамо» объявит об аренде игрока «Спартака» Мелёшина 7 февраля. Малком: наша дружба с Месси, Альбой, Бускетсом и Суаресом осталась прежней. Гути — о Хави: тренировать в Катаре — это не то же самое, что быть в «Барселоне». Мальорка — Реал Сосьедад. Прямая трансляция. Начало прямой трансляции. Матч-центр :. Вчера 0 Сегодня 0 Сейчас 0 Завтра 0 0. Раскрыть LIVE-табло. Кубок Испании. Кубок Германии. Сборная Египта назначила главного тренера после увольнения Руи Витории. Мартинес — об уходе Хави: в Барселоне и Мадриде пресса убивает тебя. Трансферная цель «Ювентуса» Бонавентура намерен продлить контракт с «Фиорентиной». Рио Фердинанд: Кобби Майну напоминает мне Зеедорфа. Хави Мартинес: «Барселоне» очень не хватает такой фигуры, как Бускетс. Тренер «Лилля» — об интересе топ-клубов к Йоро. Главные новости спорта — 6 февраля. Подборка «Чемпионата». Клинсманн высказался о возможном уходе из сборной Южной Кореи после вылета с Кубка Азии. Левандовски после завершения карьеры откроет футбольную школу для малообеспеченных семей. Бернд Лено: если честно, в Англии все называют Бундеслигу «Лигой фермеров». Мануэль Нойер: игра «Байера» похожа на то, как действовал Хаби Алонсо, когда был игроком. Игрок «Барселоны» Канселу назвал самого сложного соперника, против которого играл. Все новости RSS. Партнерский контент. Приложение для Android.
Купить Марихуана Перво-Уральск закладкой
Почему во Франции легализовали и зачем борются с 'легкой коноплей'
Меф Страсбург
Меф Страсбург
Рас-эль-Хайма купить закладку Конопля
Mash: экс-защитника сборной России Алексея Бугаева задержали с наркотическими веществами
Меф Страсбург
Приложение
Цитотоксической активности фенантридин PJ в раковых клетках митоз было зафиксировано в реальном времени с помощью конфокальной микроскопии живых. В отличие от обычных бифокальные митоза, экстра-центросомам не были сосредоточены в двух полюсах веретена в присутствии PJ Фенантрен производные действуют как мощные ингибиторы PARP1 помешало бифокальные кластеризации нештатных центросомам в мульти-центросомной человеческих раковых клеток в митозе. Фенантридин PJ был самым мощным молекулы. Декластеризация экстра-центросомам вызывает отказ митотических и гибель клеток в многоквартирных центросомной клеток. Большинство твердых опухолей человека имеют высокую возникновения экстра-центросомам. Un-кластерной экстра-центросомам в два полюса шпинделя предшествовало их гибели клеток. Эти результаты связаны FOR впервые недавно обнаружены эксклюзивные цитотоксической активности PJ в раковых клетках человека с очень центросомам де-кластеризации в митоза и митотического недостаточности приводит к гибели клеток. В соответствии с предыдущими выводами наблюдали конфокальной микроскопии фиксированных клетках, PJ исключительно искоренить раковые клетки с несколькими центросомам не повреждая нормальные клетки митоз с двумя центросомам и бифокальные шпинделей. Живите конфокальной микроскопии предложили полезным инструментом для выявления новых молекул искоренения клетки во время митоза. Однако в последнее время мы обнаружили, что PJ, в два раза большей концентрации, чем вызывающие PARP1 торможения, может только вызвать гибель клеток в раковые клетки человека 2,3. Чем быстрее пролиферацию клетки было, тем более эффективным искоренением клетки было. Цитотоксической активности PJ был приписан к дополнительным центросомам-де-кластеризации в митозе 2. Многие человеческие раковые клетки гавани multicentrosomes 4,5. Инкубация человека клеток рака молочной железы MDA-MB, который питает сверхштатный центросомы, с 20 мкМ PJ эффективно искоренить эти клетки в течение часов без ухудшения покоящихся клеток или некоторые доброкачественные пролиферативные клетки несущий две центросомы в митозе 2,3. Биполярное центросоме Ассамблеи имеет решающее значение для формирования биполярного веретена в митозе 4,5. Таким образом, клетки, имеющие более двух центросомы разработали едва понимать молекулярные механизмы, кластеризации их дополнительное центросомы на два полюса Понимание этого механизма смерти позволит эксклюзивные искоренение раковые клетки, щадя здоровые ткани 5, Таким образом, соединения, которые активируют митотической катастрофы гибель клеток предложить новый способ селективной терапии рака, который может быть эффективным в широком диапазоне человеческого твердых cancers. Our результаты показывают, что конфокальной микроскопии может быть использован для идентификации молекул, влияющие экстра-центросомы кластеризации митоза 2,3, оказания этих соединений рака таргетинга лекарств-кандидатов. Мы документировали цитотоксической активности фенантридин PJ при сканировании фиксированных и живых раковых клеток человека с высокими возникновения экстра-центросомы в митоз по сравнению с нормальными клетками. Шаг за шагом, описание процедуры отображения используются для определения цитотоксической активности PJ в человеческих раковых клеток приведен ниже. Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian. PJ является стабильным водорастворимые фенантридин 1 рис. Наши предыдущие результаты показали гибель клеток и де-кластерной экстра-центросомам в нескольких видов основных несколькими центросомной раковые клетки, которые лечились PJ В отличие от нормальных пролиферирующих клеток не нарушается 2,3. Здесь цитотоксической активности PJ было зафиксировано в эти живые экстра-центросомной клетки в реальном времени с использованием живых конфокальной микроскопии. От шести до десяти живых трансфицированные клетки сканировании параллельно в каждом эксперименте. Эти клетки инкубировали с PJ в течение 18 - 24 часов до начала сканирования и еще 16 ч во время сканирования рис. В режиме реального времени документации клеточного де-ате при митозе решительно поддерживает определенные ранее положительная корреляция между количеством человеческих злокачественных клеток с многополярного веретена в митозе и процент гибели клеток в клетки, инкубированные с PJ 20 мкМ 2. Таким образом, мы рассмотрели возможность PARP1 ингибирования вызывая гибель клеток, связанных с митотической недостаточности. В отличие от живого изображения, изображение основных MDA-MB клетки включен рассмотрении большой популяции клеток в культурах клеток, тем самым позволяя статистического анализа эффектов PARP1 ингибиторов в различных линий раковых клеток человека. Эти клетки были получены доктором Франсуаза Dantzer, Страсбург, Франция. Рисунок 2. Би-координационного кластеризации экстра-центросомам в случайно выбранных живой MDA-MB клетки в митозе. Шесть клетки сканировании параллельно в каждом эксперименте. Четыре различных экспериментов. Нажмите здесь, чтобы увеличить рисунок. Рисунок 3. Случайно выбранных живой MDA-MB клетки в митозе с разбросанными центросомам 1-й кадр слева закончилась гибелью клеток 2-й и 3-й кадры. Ячейка была отсканирована в течение 16 часов живой конфокальной микроскопии. Три различных экспериментов. Рисунок 4. Процент многополярного шпинделей рассчитывалась из 20 шпинделей Всего обнаружено в 3 различных экспериментов. Выживаемость клеток анализировали с помощью клеток АТФ протокол 5. Средние значения 4 измерения для каждой клеточной линии в 3 различных экспериментов представлены B. PJ вызвало многополярного шпинделей. Хромосомы были помечены реагент DAPI синий. Представитель результаты из 3 различных экспериментах C. Хромосомы помечены реагент DAPI синий. Аналогичные результаты были получены в 3 различных экспериментов. Рисунок 2B. Справочная рис. MDA-MB клетки инкубировали с PJ в течение 24 ч перед сканированием и в течение 16 ч живых конфокальной микроскопии. Живой конфокальной микроскопии при условии реального времени документацию цитотоксический эффект PJ в живом мульти-центросомной клеток при митозе фиг. Это было первое живое документации приписывая цитотоксичность PJ в человеческих раковых клеток к дополнительным центросомам де-кластеризации и гибели клеток, предполагая, индукция отмирания клетки катастрофу PJ В противоположность этому, бифокальные кластеризации супер-нумерарий центросомам наблюдался в живых необработанных MDA-MB клеток, подвергающихся нормальной митоза с би-focali кластерных дополнительные центросомам рис. Согласно этим результатам, жить конфокальной микроскопии Трансфицированные клетки могут быть полезны для выявления транслокации белков, участвующих в дополнительное центросомам кластеризации в Трансфицированные клетки во время митоза 5,9,15, Идентификация белков, пострадавших от PJ в нескольких CentrosOMAL клетки могут обеспечить некоторые подсказки для понимания смерти механизмы активируются дополнительные центросомам-де-кластеризации. Преимущество живых конфокальной микроскопии в предоставлении информации в реальном времени во время митоза в живых клетках, обязан также ряд ограничений. Число клеток отсканированы в эксперименте ограничена. Поэтому возможности для обнаружения клеток в митоз низки, и несколько повторяющихся экспериментов, необходимых для реального времени документации митоза в сканированном клеток. Кроме того, успех в значительной степени зависит высокую эффективность трансфекции клеток векторами, экспрессирующими меченых белков. Таким образом, несмотря на то, надежная, живая конфокальной микроскопии занимает много времени и требует опытных работяг. Для сравнения, иммуноцитохимия и конфокальной микроскопии фиксированные клетки включить рассмотрение большого количества клеток на эксперимент, который необходим для надежного статистического анализа. Этот метод был использован для сравненияэффекты PJ в митозе нормальных доброкачественные клетки к его последствиям в раковых клетках митоз с внештатным центросомам 2,3. Таким образом, наши результаты показывают преимущество объединения наиболее ценным в реальном времени информацию, предоставленную конфокальной микроскопии живых клеток в митозе фиг. Сочетание этих методов может быть полезным для определения цитотоксической активности малые молекулы, которые, как PJ, ориентированы на конкретные механизмы решающее значение для выживания клеток. Уникальная зависимость многих раковых клетках человека на дополнительной-центросомам биполярной кластеризации для их распространения и Survivдр. СА и СИ. И Израиль научного фонда СИ. Castiel, A. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr jove. You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions jove. Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login. You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free. To get started, a verification email has been sent to email institution. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your 'Spam' folder. Your access has now expired. Provide feedback to your librarian. If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team. Login processing JoVE Journal Medicine. Удалить из культуральной среды блюдо и отказаться. Добавить 2,0 мл трипсина-EDTA решение блюдо и наблюдать клетки инвертированного микроскопа, пока слой клеток не разгоняется обычно в пределах от 5 до 15 мин. Добавить 18 мл полной среды роста и осторожно аспирации клеток с помощью пипетки. Трансфер в трубке. Центрифуга клеточной суспензии при оборотах в минуту. Повторное приостановить осадок клеток в 24 мл Culture среды. Блюда: Диаметром 92 мм чашки Петри. Диаметром 35 мм поли-D-лизин покрытием блюд со стеклянным дном культуры. Подготовка Клетки для живых конфокальной микроскопии Семенной 2 х 10 5 MDA-MB клеток в культуре со стеклянным дном блюда в 2 мл полной среды, как указано в разделе 1. Вкратце, смешать с 2 мкг каждой плазмиды в пробирке с помощью мкл NaCl мМ. Смешать реагента для трансфекции мкл с помощью мкл NaCl мМ в вторую трубку, и инкубируют 5 мин при комнатной температуре RT. Затем объединить два решения, смеси с использованием мягкого вихря и спин-вниз. Инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре. Через 24 часа после трансфекции, замените среда клеток с 2 мл полной среды, содержащей 20 мкМ PJ Параллельно, изучить эффективность трансфекции 36 ч после трансфекции с использованием флуоресцентной микроскопии следующим образом: Семенной 2 х 10 5 MDA-MB клеток в 6-луночный планшет, содержащий 1 покровное на лунку в 2 мл полной среды. Трансфекции клеток, как указано в разделах 2. Аспирируйте фиксирующем растворе и пусть покровное с установленными клетки для просушки в химической капотом. Применить продлить реагента золото Antifade с DAPI и пусть йэлектронной покровного сушить в темноте в течение 6 часов. Изучите скользят под флуоресцентным микроскопом и вычислить процент трансфекции клеток красный и зеленый сигналы от общей популяции клеток ДНК окрашивания DAPI. Изображение 3-D презентация были подготовлены Imaris обработки изображений 7. Добавить PJ мкм в среду и инкубировать клетки в течение требуемого периода обычно до 96 ч. Выдержите проницаемыми фиксированные клетки с первичными Antibodiы в течение 2 ч при комнатной температуре для окрашивания шпинделей и центросомы. Первичные антитела применяются следующим образом: применяют мкл по капле смеси из антител в блокирующем растворе для каждого покровное на 6-луночный планшет крышки крышки вверх дном. Осторожно положите покровное на каплю антитела, отобранные клетки, стоящие перед падением. Инкубируйте покровные сталкивается с антителами в течение 2 ч при комнатной температуре. Поместите покровные обратно в скважины и промыть клетки 3 раза PBST. Затем с помощью той же процедуры, описанной в 4,6 мечения клеток на покровных стеклах с флуоресцентным вторичных антител. Инкубируйте клетки на покровных стеклах с вторичными антителами в течение 1 часа, РТ, в темноте. Антитела разводили в блокирующем растворе следующим образом: Alexa Fluor разведении ; зеленый и Alexa Fluor разведении ;красный. Установите покровные использованием реагента продлить Золото Antifade с DAPI для окрашивания хромосом и инкубировать в течение ночи при комнатной температуре в темном, чтобы высохнуть. Изучите покровные стекла с помощью конфокальной микроскопии. Семенной клеток в луночный планшет, приблизительно клеток в мкл среды в каждую лунку. Три контрольных лунок следует использовать для определения фонового свечения среды. Подготовка АТФ стандартной серии разведений от приблизительно 10 мкм до мкм и держать на льду. Добавить 50 мкл моющего средства в каждую лунку и встряхните пластине в течение 5 мин в орбитальный шейкер, оборотов в минуту. Добавить 50 мкл восстановленного раствора субстрата в лунки и встряхиваютпластине в течение 5 мин на орбитальном шейкере, оборотов в минуту. Храните в темном пластину в течение 10 мин. Play Video. Cite this Article Castiel, A. Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account. Continue with Shibboleth or Forgot Password? Please enter your email address so we may send you a link to reset your password. You might already have access to this content! Please enter your Institution or Company email below to check. Please enter an institutional email address. Check access. Create Account. Forgot Password? Reset Password. Phone number. Request trial. Thank You! A JoVE representative will be in touch with you shortly. Waiting for verification email? Please click here to activate your free 2-hour trial. If you do not wish to begin your trial now, you can log back into JoVE at any time to begin. Enable Javascript for audio controls. Get cutting-edge science videos from J o VE sent straight to your inbox every month. We use cookies to enhance your experience on our website. Continue Learn more Close.
Меф Страсбург
Меф Страсбург
Героин бесплатные пробы Трубчевск
Почему во Франции легализовали и зачем борются с 'легкой коноплей'
Меф Страсбург