Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
Каннабис Марихуана бесплатные пробы ШовиКаннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Гарантии ❗ Качество ❗ Отзывы покупателей ❗
• • • • • • • • • • • • • • • • •
👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇
Наши контакты:
▶️▶️▶️ (НАПИСАТЬ ОПЕРАТОРУ В ТЕЛЕГРАМ)️ ◀️◀️◀️
👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆
• • • • • • • • • • • • • • • • •
🚩 ИСПОЛЬЗУЙТЕ ВПН (VPN), ЕСЛИ ССЫЛКА НЕ ОТКРЫВАЕТСЯ!
🚩 В Телеграм переходить только по ссылке что выше! В поиске тг фейки!
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
Медицинская автономная некоммерческая организация 'Лечебно-диагностический центр'. Задать вопрос специалисту. Имя: Петр Дата: Имя: Денис Дата: Имя: Артур Дата: Имя: Ксения Дата: Имя: Галия Дата: Имя: Татьяна Дата: Имя: Анна Дата: Имя: Надежда Дата: Имя: Оксана Дата: Имя: Андрей Юрьевич Дата: Имя: Александра Дата: Имя: Светлана Дата: Имя: Ирина Дата: Имя: Галина Дата: Имя: Кристина Макарова Дата: Имя: Наталия Дата: Имя: Наталья Дата: Имя: ирина Дата: Имя: Астанда Дата: Имя: Фёдор Дата: Имя: сергей Дата: Имя: Эля Дата: Имя: Марина Дата: Имя: Валентина Дата: Имя: Алена Дата: Имя: Буажар Дата: Имя: Людмила Дата: Имя: Мария Дата: Имя: Алия Дата: Имя: Натали Дата: Имя: Доня Дата: Имя: Анастасия Дата: Имя: Элита Дата: Имя: Полина Дата: Имя: Сем Дата: Имя: Сусанна Дата: Имя: Ольга Дата: Имя: Елена Дата: Имя: Яна Дата: Имя: Хади Дата: Имя: Зайнаб Дата: Имя: Саша Дата: Имя: Андрей Дата: Имя: Сергей Дата: Имя: Вера Дата: Имя: Екатерина Дата: Имя: Меруерт Дата: Имя: Вопрос специалисту Дата: Имя: люба Дата: Имя: Александр Дата: Имя: Инна Дата: Имя: Алла Дата: Имя: Зуле Дата: Имя: Юлия Дата: Имя: Олеся Дата: Имя: юрий Дата: Имя: Кирилл Дата: Имя: Лиза Дата: Имя: Алина Дата: Имя: анна Дата: Имя: Варвара Дата: Имя: Стелла Дата: Имя: Дарья Дата: Имя: Константин Дата: Имя: Кристина Дата: Имя: Рая Дата: Имя: Леонид Дата: Имя: Евгения Дата: Имя: юлия Дата: Имя: Виктория Дата: Имя: Карина Дата: Имя: Лучия Дата: Имя: Эльвина Дата: Имя: Гербер В. В Дата: Имя: Сабина Дата: Имя: галина Дата: Имя: Марина Александровна Дата: Имя: Регина Дата: Имя: Артём Дата: Имя: Ярина Дата: Имя: Тахир Дата: Имя: Илона Дата: Имя: Лариса Дата: Имя: Зелимхан Дата: Имя: Света Дата: Имя: Маргарита Дата: Имя: Евгений Дата: Имя: Ира Дата: Имя: Руслан Дата: Имя: Олег Дата: Имя: Ульяна Дата: Имя: Настч Дата: Имя: светлана Дата: Имя: Anatolij Дата: Имя: Ларион Дата: Имя: Вячеслав Дата: Имя: андрей Дата: Имя: Ярослава Дата: Имя: Дина Дата: Имя: Анонимно Дата: Имя: Диляра Дата: Имя: Нелли Дата: Имя: Инесса Дата: Имя: Алевтина Дата: Имя: Дмитрий Дата: Имя: Дана Дата: Имя: Тамара Дата: Имя: Настя Дата: Имя: Любовь Дата: Имя: Нина Дата: Имя: Владислав Дата: Имя: Валерия Дата: Имя: Виталий Дата: Имя: лариса Дата: Имя: Маша Дата: Имя: Рома Дата: Имя: Волкова Татьяна Дата: Имя: Алеся Дата: Имя: софия Дата: Имя: наталья Дата: Имя: Дамир Дата: Имя: михаил Дата: Имя: Жанна Дата: Имя: Алеша Дата: Имя: Влад Дата: Имя: Кама Дата: Имя: Анжела Дата: Имя: Диана Дата: Имя: Лиана Дата: Имя: Илья Дата: Имя: Тая Дата: Имя: Чернобылова Ольга Сергеевна Дата: Имя: никита Дата: Имя: Игорь Дата: Имя: ольга Дата: Имя: Марк Дата: Имя: Алёна Дата: Имя: гульшат Дата: Имя: Максим Дата: Имя: Хатира Дата: Имя: Роман Дата: Имя: денис Дата: Имя: Вася Дата: Имя: Малика Дата: Имя: Рита Дата: Имя: Михаил Дата: Имя: Люба Дата: Имя: Владииир Дата: Имя: Вероника Дата: Имя: Нана Дата: Имя: Вера. Дата: Имя: Бахыт Дата: Имя: павленко валерий Дата: Имя: Лилия Дата: Имя: Виктор Дата: Имя: Ольга Ивановна Дата: Имя: Надира Дата: Имя: Азам Дата: Имя: Анатолий Дата: Имя: Раиса Дата: Имя: Лика Дата: Имя: Эльза Дата: Имя: Арман Дата: Имя: Гуля Дата: Имя: нина федоровна Дата: Имя: Тансылу Дата: Имя: Нетзвестно Дата: Имя: Лия Дата: Имя: Сара Дата: Имя: Владимир Дата: Имя: Ольга Владимировна Дата: Имя: Валера Дата: Имя: Салтанат Дата: Имя: Алексей Дата: Имя: Ильгиз Дата: Имя: Макс Дата: Имя: Егор Дата: Имя: Иван Дата: Имя: вячеслав Дата: Имя: Жанар Дата: Имя: Дашв Дата: Имя: тамара Дата: Имя: Катерина Дата: Имя: Назира Дата: Имя: София Дата: Имя: екатерина Дата: Имя: Ангелина Владимировна Дата: Имя: Юлия Александровна Дата: Имя: Елена Михайловна Дата: Имя: Светлана Н Дата: Имя: Таня Дата: Имя: Вадим Дата: Имя: Котоманов Дмитрий Андреевич Дата: Имя: Станислав Дата: Имя: Павел Дата: Имя: людмила Дата: Имя: Аня Дата: Имя: Розалия Дата: Имя: Мэри Дата: Имя: Надя Дата: Имя: Oleg Дата: Имя: Нафис Дата: Имя: Лидия Дата: Имя: валерий Дата: Имя: Галина Ивановна Дата: Имя: Генрик Дата: Имя: Валерий Дата: Имя: ehakup Дата: Имя: uragucoq Дата: Имя: Елизавета Дата: Имя: Лена Дата: Имя: елена Дата: Имя: Костя Дата: Имя: Елена Ильинична Дата: Имя: Юрий Дата: Имя: татьяна Дата: Имя: Родионова Ольга Дата: Имя: алла Дата: Имя: Геннадий Алексеевич Дата: Имя: оксана Дата: Имя: Николай Дата: Имя: Асмик Дата: Имя: Гена Дата: Имя: Никита Дата: Имя: Матвей Дата: Имя: таися Дата: Имя: Катя Дата: Имя: Потапенкова Наталья Николаевна Дата: Имя: Валентин Дата: Имя: Татьяя Дата: Имя: Фелура Дата: Имя: евгений Дата: Имя: Мирослава Дата: Имя: Тоита Дата: Имя: Софья Дата: Имя: Светлана Владимировна Дата: Имя: Малина Дата: Имя: Бахтиёржон Дата: Имя: Юлианна Дата: Имя: Иванна Дата: Имя: Валентина А. Имя: Семён Дата: Имя: Наташа Дата: Имя: Янна Дата: Имя: мария Дата: Имя: Снежана Дата: Имя: тайя Дата: Имя: олег Дата: Имя: Равиль Дата: Имя: Анжелика Дата: Имя: Антон Дата: Имя: Нафисет Дата: Имя: Гузель Дата: Имя: лейсан Дата: Имя: любовь Дата: Имя: Азиза Дата: Имя: Марианна Дата: Имя: Даша Дата: Имя: Аноним Дата: Имя: Andrey Дата: Имя: Пешкова Лариса Дата: Имя: Гулноза Дата: Имя: Керн Валентина михайловна Дата: Имя: Анатасия Дата: Имя: Olga Дата: Имя: Оля Дата: Имя: николай Дата: Имя: Nella Дата: Имя: Валентина Николаевна Дата: Имя: Шамиля Дата: Имя: Степан Дата: Имя: Ангелина Дата: Имя: вера Дата: Имя: Алиса Дата: Имя: Лина Дата: Имя: Христина Дата: Имя: Дилшод Дата: Имя: Димитрий Дата: Имя: Жора Дата: Имя: Zlata Дата: Имя: Юля Дата: Имя: Мира Дата: Имя: Арина Дата: Имя: Кристина. Имя: Злата Дата: Имя: Дима Дата: Имя: Ольга Г. Имя: Арюна Дата: Имя: ОЛьга Дата: Имя: Олег Юрьевич Дата: Имя: Альберт Дата: Имя: шерали Дата: Имя: Марина Михайловна Дата: Имя: Ковалева Зоя Федоровна Дата: Имя: Шилов Владимир Афанасьевич Дата: Имя: марина Дата: Имя: Евтухов А. Имя: Григорий Дата: Имя: Яна Александровна Дата: Имя: Таньяна Дата: Имя: Раиль Дата: Имя: Нколай Дата: Имя: Серафима Дата: Имя: валентина Дата: Имя: Эргард Дата: Имя: Эдуард Дата: Имя: Данил Дата: Имя: Дина Игоревна Дата: Имя: Наталья Анатольевна Дата: Имя: Татьяна Ивановна Дата: Имя: Соболевская Алёна Валерьевна Дата: Имя: Любовь Тарасовна Дата: Имя: Соня Дата: Имя: Негадий Дата: Имя: негадий Дата: Имя: Геннадий Дата: Имя: Александр Вениаминович Дата: Имя: алексаедр Дата: Имя: Юлич Дата: Имя: ВладиславаСергеевна Дата: Имя: алексей Дата: Имя: Семен Дата: Имя: Борис Дата: Имя: Ната Дата: Имя: Северина Людмила Леонидовна Дата: Имя: Галина Митченко Дата: Имя: Грачёва Дата: Имя: игорь Дата: Имя: зоя Дата: Имя: Влада Дата: Имя: Алефтина Дата: Имя: Клавдия Дата: Имя: Людмила шадрина Дата: Имя: семён Дата: Имя: Nadia Дата: Имя: парень Дата: Имя: Кузьменко Тамара Петровна Дата: Имя: Олег Владимирович Дата: Имя: антон Дата: Имя: Радик Дата: Имя: Зорин И. Имя: Дмитирий Дата: Имя: Пациент Дата: Имя: ксения Дата: Имя: Еленаliw Дата: Имя: Пациентка Дата: Имя: Клиент Дата: Имя: Влалимир Дата: Имя: евгения Дата: Имя: александр Дата: Имя: Вера Инёшина Дата: Имя: диана Дата: Имя: fg Дата: Имя: Владислава Дата: Имя: Викторияя Дата: Имя: галина ивановна Дата: Имя: владимир Дата: Имя: Артем Дата: Имя: Валя Дата: Имя: Юра Дата: Имя: Сергей Иванович Дата: Имя: лвб Дата: Имя: максим Дата: Имя: валентин Дата: Имя: Юко Дата: Имя: лена Дата: Имя: Ибрагим Дата: Имя: ОЛеся Дата: Имя: Ася Дата: Имя: Викория Дата: Имя: Любовь Евгеньевна Дата: Имя: Нталия Дата: Имя: anna Дата: Имя: Юлияpp Дата: Имя: катерина Дата: Имя: Светлавна Дата: Имя: Василиса Дата: Имя: анастасия Дата: Имя: Фомин Павел Дата: Имя: Виктория Денис Дата: Имя: Аександр Дата: Имя: Эмилия Дата: Имя: Ольга Васильевна Дата: Имя: Баир Дата: Имя: Анна Геннадьевна Дата: Имя: алена Дата: Имя: Зинаида Дата: Имя: Заряна Дата: Имя: заряна Дата: Имя: таня Дата: Имя: Магарита Дата: Имя: маргарита Дата: Имя: Надежаi Дата: Имя: Александра. Имя: элинка Дата: Имя: Сеня Дата: Имя: надежда Дата: Имя: виктория Дата: Имя: Елене Дата: Имя: Василий Дата: Имя: кристина Дата: Имя: яна Дата: Имя: Наталья ш. Имя: Саетлана Дата: Имя: Олга Дата: Имя: Алекс Дата: Имя: валя Дата: Имя: larisa Дата: Имя: Руслана Дата: Имя: muz-a8 Дата: Имя: Сергей Геннадьевич Дата: Имя: дарья Дата: Имя: Ефим Дата: Имя: Ольга Борисовна Дата: Имя: Сергей Владимирович Дата: Имя: Тина Дата: Имя: OЛЯ Дата: Имя: хельга Дата: Имя: Леся. Имя: Леся Дата: Имя: Анасиасия Дата: Имя: лидия Дата: Имя: Инга Дата:
Сбор и извлечения образцов профессиональных воздуха для анализа ДНК, грибковых
Гашиш купить наркотик Ханья Греция
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
Платные услуги
Сен-Мало Франция Купить закладку Кокаин
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
Бошки Москва Восточное Измайлово
Платные услуги
Определение грибковых разнообразия в среде — это метод, используемых в профессиональных медицинских исследований для выявления опасностей для здоровья. Этот протокол описывает экстракции ДНК от профессиональных воздуха образцов для амплификации и последовательности грибковых ее регионов. Этот подход обнаруживает много грибковых видов, которые могут быть пропущены методами традиционной оценки. Традиционные методы выявления грибковых облучения профессиональных средах, таких как культуры и подходы на основе микроскопии, имеют некоторые ограничения, которые привели к исключению многих видов. Достижения в области за последние два десятилетия привели исследователей гигиены обратиться к молекулярной основанные подходы для выявления грибковых опасностей. Эти методы привели к выявлению многих видов в крытый и производственной среды, которые не были обнаружены с использованием традиционных методов. Этот протокол детали подход для определения грибковых разнообразия в воздухе образцы через геномной ДНК добычи, усилители, последовательности и таксономической идентификации грибковых внутренней трансляции распорку СТС регионах. ЕГО результаты секвенирования в обнаружении многих грибковых видов, которые не обнаружены или трудно определить на уровне видов, с использованием культуры или микроскопия. Хотя эти методы не обеспечивают количественные показатели грибковых бремени, они предлагают новый подход к идентификации опасностей и может использоваться для определения общей видовое богатство и разнообразие в профессиональной среде. Грибковые облучения в крытый и производственной средах может привести к респираторных заболеваний, включая аллергической сенсибилизации и астмы 1. Определение опасностей, грибковых имеет важное значение для оценки рисков и предотвращение воздействия на работников. Эти грибковых опасности может быть результатом крытый заражения, проникновения наружного воздуха или экологические нарушения, которые приводят к перевозки грибковых материалов в районы, где работники являются настоящей 2. Методы оценки воздействия грибковых включали выборки жизнеспособных культуры, а также микроскопические идентификация грибковых спор. Эти подходы имеют несколько ограничений и часто упускаем многие грибковых видов, которые могут способствовать общей грибковая бремя 3. Подходы, основанные на культуру можно только дифференцировать эти жизнеспособных грибковых организмов, которые можно выращивать на питательных средах. Выявления грибковых спор до уровня видов через микроскопии могут быть confounded, споры, обмена аналогичными морфологии. Оба метода являются сильно зависит от микологи для анализа и выявления грибковых видов, с многих оставшихся неизвестными. Для улучшения существующих методологий, используемых в профессиональных рисков идентификации и оценки воздействия, многие исследователи обратились к молекулярно-технологий. Подходы на основе виртуализации для оценки микробного разнообразия в крытый и профессиональной среде выявили широкий спектр плесневые столкнулись по сравнению с методами микроскопии и жизнеспособной культуры 3 , 4 , 5. Метод, представленный здесь описывает отбор проб воздуха профессиональной среды и извлечение геномной ДНК для идентификации потенциальных опасностей грибковые. Идентификация опасности осуществляется путем виртуализации ядерной рибосомных внутренней трансляции распорка, или ее, регионы, которые сильно варьируется среди грибов и часто используются для различения плесневые 6 , 7 , 8 , 9. Многие виды найдены в профессиональной настройки, такие, как некоторые виды, принадлежащие к типу Базидиомицеты, не поддаются в жизнеспособные культуре и трудно дифференцировать микроскопически. Эти грибы были отмечены в высокое относительное изобилие в крытый и профессиональной среды, оценку последовательности грибковых ее регионы 3 , 4 , ЕГО виртуализации предоставляет больше знаний в разнообразие грибов, возникших в крытый и профессиональной среде. Протокол описанные здесь методы, используемые для сбора, извлекать и усилить грибковых ее регионов от биоаэрозоли для анализа последовательностей детали. Этот подход использует Национальный институт профессиональной безопасности и здоровья NIOSH две ступени циклонов аэрозоля сборники для сбора твердых частиц в воздухе. Другие пробоотборники воздуха, включая циклон пробоотборники, доступны на рынке, имеют возможность собирать частицы в вдыхаемых диапазоне 12 , В противоположность этому сборники аэрозоля-двухступенчатый циклон NIOSH отделяет грибковых видов, основанный на их аэродинамический диаметр в одноразовые, полипропиленовые трубы, которые могут быть немедленно обработаны для нисходящие приложения Процессы извлечения геномной ДНК и усиливая грибковых регионах ее подробно изложены в настоящем Протоколе. Извлечения представлены были разработаны методологии специально для извлечения геномной ДНК от грибков и бактерий, как многие коммерческие наборы целевой mammalian клеток, бактерии или специально дрожди Грунты, используемые в данном исследовании отбираются на основе их общий охват грибковых ее 1 и 2 ее регионов 4 , 5. Последовательность этих регионов позволяет сравнивать многих накренился ее последовательностей, включая те, что последовательность ее 1 региона, ее 2 региона или в ее 1 и 2 ее регионах. Грибковые разнообразие проб воздуха, собранных в крытый настройки с помощью приведены эти методы, выявить значительное число последовательностей, типы, облеченных микологии и микологии, а также другие последовательности, принадлежащих к менее доминирующим грибковых типы, такие как Отдела зигомицетов. Широкое разнообразие грибковых последовательности, определенные с помощью этого подхода будет не захвачен с помощью методологии идентификации традиционные опасности как культивирование или микроскопии. Секвенирования грибковых ее регионов обеспечивает метод расширения для выявления грибковых опасностей и позволяет для лучшего понимания воздействия крытый и профессиональных грибковых. Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian. Распределение видов в среде может быть оценена с помощью относительного изобилия, определяя количество клонов каждого OTU, определенных в пробах воздуха. Рисунок 6 -крона единицы, представляющие таксономически размещены видов в помещении после 60 мин отбора проб воздуха. Можно отметить, что среда содержит целый ряд видов в рамках двух основных грибковых типы, микологии и микологии, а также виды, принадлежащие к типу отдела зигомицетов патогену microsporus. Традиционные методы оценки будут смещены в сторону Аскомицеты видов, как многие Базидиомицеты не culturable или не смогите быть продифференцировано с использованием методов на основе микроскопии. Секвенирование грибковых ее регионов позволяет для обнаружения многочисленных грибковых видов, в частности некоторые Базидиомицеты, которые часто остаются незамеченными. Таксономическое данные, полученные с помощью подходов на основе последовательности может использоваться для определения таксономического разнообразия в среде. Разнообразие индексов, таких, как те, которые представлены в таблице 1, определить, как богатой окружающей среды является, которое описывает количество видов, определенных в каждом образце, а так же как окружающей среды разнообразна, который учитывает количество видов и обилие каждый. Таблица 1 показывает 1 ЧАО богатство индексов и Шеннон индексы разнообразия для двух закрытых средах. Индексы указывают выше богатство и разнообразие в кондиционерами средах, по сравнению с испарений кулер средах. Кроме того, включены Брей-Кертис несходство коэффициенты. Они описывают как разнородных образцов в рамках окружающей среды относительно видов, определенных в рамках каждой выборки. Рисунок 1: Схематическое представление сборки трехсекционный фильтр кассетный. Кассетный фильтр состоит из трех частей: верхней или крышка кусок вход , расширение капота и базовый кусок выход. Подушка опоры и фильтр размещаются на решетчатой поверхности базового образца. Капот расширения затем опечатаны на базу, с помощью ручной или Пневматический пресс. Для использования с NIOSH Биоаэрозоль циклон сэмплер верхняя часть остановились во время отбора проб и затем заменяется для хранения и транспортировки. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры. Сборники аэрозоля циклон NIOSH собирает воздухе частиц путем нагнетания воздуха в сборники через вход и производит циклона, отложений частиц на стене пробоотборные трубки. Воздух затем течет из первой трубки и обращается в 1,5 мл microcentrifuge трубку, где собирают мелкие частицы мкм. Остальные частицы Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры. Рисунок 3: пример настройки статического сэмплер. Изображение демонстрирует пробоотборники для статических территориальной выборки. NIOSH Пробоотборники устанавливаются до сбора 40 дюймов см и 60 дюймов см от пола, представляющие высот сидя и стоя взрослого, соответственно. Рисунок 4: пример личного сборники Ассамблеи. Сборники и питания коммутатора расположены на лямках пакета, а насос отбора проб расположен в рюкзак, сам. Рисунок 5: Пример визуализации гель агарозы усиливается ее ДНК от пробы воздуха. На изображении показана ДНК полосы между и пар оснований. Эти группы представляют усиливается грибковых ее регионы от извлеченного воздуха образцов. ЕЕ регионах варьируется в зависимости от видовой принадлежности. Рисунок 6: пример крона диаграммы представления таксономически помещены грибковых видов, определенных в помещении. Крона диаграмма изображает относительное обилие грибковых видов, обитающих в 4 пробах из домов после периода отбора проб воздуха 60 мин с NIOSH Биоаэрозоль циклон сэмплер. Наиболее распространенным ее последовательности в этой среде принадлежал ордену грибы и были определены как Phanerodontia chrysosporium и Gelatoporia Дихроа. Таблица 1: пример данных, представляя разнообразие видов и богатство индексов, сравнивая помещениях. В таблице 1 ЧАО богатство индексы количество видов на сэмпл , индексы разнообразия Shannon количество видов и обилие каждого и Брей-Кертис несходство коэффициенты как разнородных видов распределяются между выборками по шкале 0 - 1. Эти данные свидетельствуют о более богатство и разнообразие в кондиционерами сред и высоких различие среди образцов в обеих средах. Эта таблица была изменена из лимонов и др. Определение грибковых разнообразия в профессиональной среде, используя подходы, основанные на последовательности улучшилась идентификации и воздействия оценки грибковых опасности. Используя этот подход позволил для выявления многих дополнительных грибковых видов, которые часто не обнаруживаются с помощью культуры или микроскопия основе методов оценки. Здесь представлен метод отбора проб биоаэрозоли от профессиональных и крытый сред и добыча геномной ДНК из проб воздуха для его усиления и последовательности. Сильно зависит от определений грибковых разнообразия с помощью этих методов: образцы 1 успешного и полного извлечения геномной ДНК из воздуха, 2 усиление геномная ДНК с праймерами, которые позволяют для сравнения усиливается ее последовательности накренился последовательности в базу данных и предел усиления предубеждения и 3 правильно таксономической идентификации последовательностей в пределах базы данных. Успешной геномной ДНК добычи зависит от методики экстракции и реактивы, используемые в исследовании. Как указано в протоколе, много биоаэрозоли и других биологических и небиологических частиц, собранных в трубку фазы сборники две ступени циклонов NIOSH собирать в верхней части трубки. Это очень важно, что трубы тщательно открыт при добавлении литического буфера не терять любой частицы и что они быть vortexed таким образом, который позволяет для всех частиц попасть в буфер lysis справа вверх и вверх вниз. Важно также и то, что фильтр быть тщательно обработаны с помощью асептических методов не сорвать любые биоаэрозоли, собрали на поверхности до извлечения или ввести загрязняющих ДНК. Было продемонстрировано, что существует большое количество вариации между многими из коммерчески доступных геномной ДНК извлечения наборы Некоторые извлечения процедуры уклон в сторону конкретных видов грибковых и результат в той или иной ДНК дает Не только меняют извлечения урожайности, но многие из этих комплектов вносить значительное количество контаминацию ДНК. По этой причине важно включать надлежащий контроль на протяжении всей процедуры для выявления и устранения потенциальных реагента примеси из анализа. ЕГО усиления является еще одним критическим шагом протокола. Методики извлечения может варьироваться в их способности удалять ингибиторы ПЦР из экологических проб. Это особенно касается с окружающей пыли образцы Амплификации PCR образцов, извлеченные с помощью метода, представленные здесь выставлены ингибитирование некоторых PCR после добавления 10 мг пыли Хотя ПЦР ингибирование имеет наибольшую озабоченность в пробах окружающей среды пыли, он все еще должен быть рассмотрение при усилении ДНК, извлеченные из проб воздуха для определения грибковых разнообразия. PCR праймер, используемую в этом методе обеспечивает охват ее 1 и 2 ее регионов. Это позволяет для сравнения, многие из последовательностей, помещены в базах данных последовательности. Как и в случае с процедурой извлечения, многие усилители и грунтовка предубеждения были ранее описанных Грибковые генома размер и Джин номер копии также могут оказывать влияние его усиления Эти предубеждения должны учитываться при интерпретации данных результирующей последовательности. Таксономической идентификации ее последовательностей является, пожалуй, наиболее важным компонентом этого метода. Важно сохранить согласованность критериев идентификации. Способность определить свои последовательности зависит от последовательности, накопленные в базах данных. Многие последовательностей не могут быть идентифицированы на уровне видов. Имея конкретные критерии при принятии таксономической идентификации основе складированные последовательности, как процент личность предохранители, имеет решающее значение для поддержания наборы данных последовательно от исследования для изучения. По сравнению с традиционной оценке подходов, извлечение и секвенирования грибковых ДНК пробы профессиональных воздуха обеспечивает более полное представление грибковых разнообразия в среде. Помимо ограничения, обсуждавшиеся выше необходимо отметить, что результаты этих видов анализов полуколичественного в отличие от культуры, споро счетчиков или количественного PCR 24 , может принести количественных данных. Виртуализация данных может использоваться для определения относительного изобилия на сэмпл, а также рассчитать метрики грибковых разнообразия. Эти методы может использоваться в сочетании с другими методами, как ПЦР, чтобы получить больше поддающихся количественной оценке данных. Наборы данных, созданные с помощью этих подходов может использоваться в профессиональных медицинских исследований для лучшего понимания грибковых опасностей в конкретных условиях труда. Разработка более стандартизированной, лучше характеризуют и сравнить исследования, основанные на последовательности, грибковых разнообразия необходимы подходы добычи и грунтовка отбора. Результаты и выводы в настоящем докладе, принадлежат авторам и не обязательно отражают официальную позицию национального института профессиональной безопасности и здравоохранения, центры по контролю и профилактике заболеваний. Lemons, A. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr jove. You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions jove. Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login. You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free. To get started, a verification email has been sent to email institution. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your 'Spam' folder. Your access has now expired. Provide feedback to your librarian. If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team. Login processing JoVE Journal Environment. Перед Ассамблеей внимательно осмотрите сэмплер. Проверьте сэмплер, чтобы убедиться, что он не поврежден, все винты находятся на месте и уютно и уплотнительной ленты вокруг шов формируется две половинки нетронутыми. Осмотрите сборники уплотнительное кольцо, чтобы убедиться, что он не имеет каких-либо вмятин, трещин или слезы и что он имеет очень тонким слоем силиконовой смазки. Примечание: Сэмплер включает в себя 37 мм 3 мкм PTFE фильтр в полистироловые или полипропиленовые трехсекционный фильтр кассетный. Соберите Кассетный фильтр, поместив целлюлозы или пластиковый фильтр поддержки пеленального с фильтрами на решетчатой поверхности базового образца см. Рисунок 1. Используете фильтр щипцы поставить фильтр на верхней части фильтра площадку поддержки коллекции стороной вверх. Уплотнение кассеты фильтра, с помощью ручной или Пневматический пресс. Рука закрытие позволит воздух течь вокруг фильтра и уменьшить эффективность. Вставьте кольцевой кусок капот расширения и использовать прессу для протолкните его вниз, плотно и равномерно. Нажмите вниз капот расширения на фильтр достаточно плотно, чтобы убедиться, что воздух не протекает вокруг фильтра. Примечание: Верхняя часть кассеты не используется во время выборки, но должен быть сохранен для покрытия фильтр после завершения отбора проб. Установите собранный кассеты на вершину сэмплер и протолкните его вниз, насколько это возможно. Ввинтите каждую пробирку плотно и полностью в сборники до тех пор, пока она днища и оберните лентой вокруг каждой трубы в качестве вторичного уплотнения против утечки. Второй трубы, Трубы полипропиленовые microcentrifuge 1,5 мл, собирает вдыхаемых частиц между 1 и 4 мкм. Оставшиеся мелкие частицы, Рисунок 2. Калибровка потока воздуха через NIOSH сборники с банкой калибровки перед каждым использованием, как различия в фильтры и пробоотборники вызовет поток воздуха меняться. Чтобы использовать калибровки jar, вставьте кувшин Luer фитинга в верхней части Кассетный фильтр, место сэмплер в банку и печать банку. Подключите калибровки jar расходомер калибровки и насос для отбора проб. Включите расходомер и позволить ему теплый на несколько минут. Обратите внимание, что расходомер всегда должна иметь фильтр прилагается к его входе чтобы избежать загрязнения расходомер и сэмплер. Включите насос для отбора проб и позволить ему баллотироваться на несколько минут, чтобы согреться и стабилизации. Другие скорости потока может использоваться, если размеры различных отсечения желательны или уменьшить уровень шума, но следует знать, что если используется другой расхода, то пробоотборник будет больше не соответствуют вдыхаемых выборки критериям. Когда калибровка закончена, отключите насос и расходомер. Примечание: Статические выборки относится к с помощью аэрозоля сборники, пока он присоединен к штатив или другое устройство Холдинг см. Рисунок 4. Для статических территориальной выборки, держите изучается пробоотборники как можно ближе к конкретной области. Держите пробоотборники от воздухозаборников, номер входов и места, которые могут быть на пути воздушного потока. Примечание: Концентрации аэрозолей может значительно изменяться даже на короткие расстояния, особенно если источник аэрозоля в номер Для личного выборки, настроить сборники в зоне дыхания человека. Прикрепите сэмплер отворот, плечо или грудь и поместите насос отбора проб на талии или в рюкзаке. Примечание: В зоне дыхания обычно считается 30 см полушария, окружающих человека нос, из которой будет нарисована большинство воздуха во время ингаляции Убедитесь, что сборники трубы хорошо очищают от заливов сборники и что ничто не препятствует заливов или вмешательства с воздуха в сборники. Сборники трубки должны не пережат или сильно перегнут. Любые блокировки вызовет насос, чтобы остановить. Включите насосы. Через минуту или две проверьте, если насосы по-прежнему работает. Примечание: Проведение воздуха выборки для периодов времени, начиная от как мало, как 10 мин до полного 8 h рабочей смены, в зависимости от окружающей среды 10 , 18 , Результаты представлены на рисунке 6 , представитель в течение 60 мин выборки в помещении. После завершения отбора проб воздуха, собирайте образцы труб и фильтров. Удаление Уплотнительная лента, отвинтить трубы и ограничить их. Поместите третья часть фильтр кассетный фильтр. Обработки воздуха, выборки коллекции трубок и отдельно фильтрации для определения вдыхаемых и не вдыхаемых микробной аэрозолей в образце. Примечание: в качестве альтернативы, трех этапов можно комбинировать и извлечены, если образец посевным материалом слишком мал. В классе II биологической безопасности кабинета или ламинарного потока чистого скамейке асептически удалите фильтр. Используйте фильтр стеклоподъёмника нажать панель фильтра и поддержка вверх. Понять фильтр с помощью фильтра щипцами и поместите его в стерильных Петри. Cut фильтр на 6 равных частей и поместите их в 2 мл усилены тубы мг стеклянные бусины 0,2 - 0,5 мм. Повторите шаг 3. Небольшие кусочки нетронутыми фильтра могут оставаться. Добавление 0,3 мл буфера lysis 15 мл и 1,5 мл воздуха сборники трубы. Вихревой трубе для s при вертикальном положении и затем еще s перевернутой. Передавать содержимое каждой трубы армированные 2 мл пробирки, содержащие мг стеклянные бусины. Примечание: Большинство материалов, собранных в каждой тюбике сборники будут накапливаться в верхней части трубки. Обрабатывать все трубы в гомогенизатор мельница шарик, 4. Повторите этот шаг. Отменить коллекции трубок и поместить фильтр трубы в новой коллекции трубок 2 мл. Повторите этот процесс. Отменить коллекции трубок и поместить фильтр трубы в новой коллекции трубок. Передать пробки microcentrifuge стерильные 1,5 мл трубки пустой фильтр и повторно применить элюаты из шага 3. Комбинат, что тройные ПЦР-реакции очистить, используя комплект для очистки на основе мембранных кремнезема. Объединить три реакции для каждого образца всего мкл в стерильных 1. Примечание: Спина столбцы содержат кремний мембраны, которая позволяет для адсорбции ДНК в столбцы. Отменить фильтратами и добавьте мкл Отмывающий буфер 10 мм трис-HCl, pH 7. Примечание: Этот процесс удаляет примеси из реакции PCR, упомянутых выше. Примечание: Этот шаг заключается в удалении любых остаточных отмывающего буфера, который может вмешиваться в нисходящие приложения. Передать стерильные 1. После затвердевшим геля агарозы, погружать гель в 1 x TAE и подготовить ампликонов загружаться на геле. До 8 мкл амплифицированного ДНК 2 мкл 5 x загрузки буфера. Примечание: Эти тома может быть скорректирована в зависимости от концентрации желаемого загрузки буфера. Загрузите образцы, все 10 мкл, на гель наряду с ДНК лестница для размера ссылкой. Рисунок 5. Среднее мин, Макс. Play Video. Cite this Article Lemons, A. Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account. Continue with Shibboleth or Forgot Password? Please enter your email address so we may send you a link to reset your password. You might already have access to this content! Please enter your Institution or Company email below to check. Please enter an institutional email address. Check access. Create Account. Forgot Password? Reset Password. Phone number. Request trial. Thank You! A JoVE representative will be in touch with you shortly. Waiting for verification email? Please click here to activate your free 2-hour trial. If you do not wish to begin your trial now, you can log back into JoVE at any time to begin. Enable Javascript for audio controls. Get cutting-edge science videos from J o VE sent straight to your inbox every month. We use cookies to enhance your experience on our website. Continue Learn more Close. Please contact William Lindsley, PhD wlindsley cdc. Kit used for genomic DNA extraction. Contains: Lysis buffer, Binding buffer, Proteinase K, Inhibitor removal buffer, Wash buffer, Elution buffer, Glass fiber filter tubes and 2 ml collection tubes. Kit used to purify fungal amplicons.
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
Альфа-ПВП купить наркотик Ольгин
Сбор и извлечения образцов профессиональных воздуха для анализа ДНК, грибковых
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Шови
Скорость ск купить наркотик Норвегия