Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
Каннабис Марихуана бесплатные пробы ПратоКаннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Гарантии ❗ Качество ❗ Отзывы покупателей ❗
• • • • • • • • • • • • • • • • •
👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇 👇
Наши контакты:
▶️▶️▶️ (НАПИСАТЬ ОПЕРАТОРУ В ТЕЛЕГРАМ)️ ◀️◀️◀️
👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆 👆
• • • • • • • • • • • • • • • • •
🚩 ИСПОЛЬЗУЙТЕ ВПН (VPN), ЕСЛИ ССЫЛКА НЕ ОТКРЫВАЕТСЯ!
🚩 В Телеграм переходить только по ссылке что выше! В поиске тг фейки!
• • • • • • • • • • • • • • • • •
Делеция этой области приводит к потере UBE3A, основного возбудителя АС, кодирующего убиквитин-лигазу E3. Отцовский аллель гена UBE3A в нейронах.
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
В данной рукописи представлен набор высоко воспроизводимых поведенческих тестов для валидации мышиной модели синдрома Ангельмана. В этой рукописи описывается батарея поведенческих тестов, доступных для характеристики фенотипов, подобных синдрому Ангельмана АС , в установленной мышиной модели АС. Мы используем парадигму ротародного обучения, детальный анализ походки и тест на строительство гнезда для выявления и характеристики двигательных нарушений животных. Мы тестируем эмоциональность животных в открытом поле и на повышенных и лабиринтных тестах, а также аффект в тесте на подвеску хвоста. Когда мыши с синдромом Аспергера тестируются в открытом поле, результаты следует интерпретировать с осторожностью, поскольку двигательные дисфункции влияют на поведение мышей в лабиринте и изменяют показатели активности. Воспроизводимость и эффективность представленных поведенческих тестов уже была подтверждена на нескольких независимых линиях мышей Uba3a с различными вариантами нокаута, что делает этот набор тестов отличным инструментом валидации в исследованиях АС. Модели с соответствующей конструкцией и валидностью лица потребуют дальнейших исследований для выяснения патофизиологии заболевания и позволят разработать причинно-следственные методы лечения. Синдром Ангельмана АС является редким заболеванием развития нервной системы. Отцовский аллель гена UBE3A в нейронах заглушается в процессе, известном как импринтинг. Как следствие, отцовский импринтинг гена допускает только материнскую экспрессию в центральной нервной системе ЦНС 2. У людей АС проявляется в возрасте около 6 месяцев, с задержкой развития, которая сохраняется на всех этапах развития и приводит к тяжелым изнурительным симптомам у больных 3,4. Основные симптомы расстройства включают дефицит мелкой и крупной моторики, в том числе судорожную атаксическую походку, серьезные нарушения речи и умственную отсталость. На сегодняшний день единственным доступным лечением являются симптоматические препараты, которые уменьшают эпилептические припадки и улучшают качество сна1. Таким образом, разработка надежных животных моделей с воспроизводимыми поведенческими фенотипами наряду с уточненным анализом фенотипирования будет иметь важное значение для выяснения патофизиологических механизмов расстройства и поиска эффективных лекарств и методов лечения. Сложность человеческого заболевания, поражающего ЦНС, требует, чтобы модельные организмы обладали сопоставимым геномом, физиологией и поведением. Мыши популярны в качестве модельных организмов из-за их короткого репродуктивного цикла, небольшого размера и относительной простоты модификации ДНК. В году Пол Уилнер предложил три основных критерия валидации модели заболевания: конструкт, лицо и прогностическая валидность, которые используются для определения ценности модели. Проще говоря, конструктная валидность отражает биологические механизмы, ответственные за развитие расстройства, валидность лица повторяет его симптомы, а прогностическая валидность описывает реакцию модели на терапевтические препараты. Чтобы придерживаться вышеуказанных принципов, мы выбрали наиболее распространенную генетическую этиологию, большую делецию материнского локуса 15q Мы проверили их мелкую и крупную моторику, эмоциональность и аффект, чтобы повторить основные симптомы синдрома Аспергера. В предыдущей статье мы также оценивали когнитивные функции животных, так как пациенты с синдромом Аспергера также страдают умственной отсталостью6. Более позднее обследование старших животных, в возрасте около 18 недель, выявило дефицит поведенческой гибкости во время реверсивного обучения в парадигме предпочтения места. Однако сложность используемого оборудования для такого анализа требует отдельного методологического модуля, который здесь не включен. Представленные здесь поведенческие тесты относятся к распространенным инструментам фенотипирования в генетических исследованиях, благодаря их высокой прогностической ценности и достаточной конструктной валидности 8,9, Мы использовали эти тесты для валидации мышиной модели АС путем повторения основных симптомов заболевания человека воспроизводимым, независимым от возраста образом. Эмоциональность животного оценивалась в тестах повышенного плюса лабиринта и открытого поля. Оба этих теста основаны на конфликте приближения-избегания, когда животные исследуют новую среду в поисках пищи, укрытия или возможностей для спаривания, одновременно избегая анксиогенных компартментов Кроме того, тест в открытом поле используется для проверки локомоторной активности мыши 8. Тест на подвеску хвоста широко используется в исследованиях депрессии для скрининга новых антидепрессантов или депрессивных фенотипов в моделях нокаута мышей Этот тест оценивает отчаяние, которое животные развивают с течением времени в неизбежной ситуации. Моторика и детальные характеристики походки определялись на ротароде и в DigiGait соответственно. Выносливость животного на ускорительном стержне характеризует его навыки равновесия и координации движений, в то время как детальный анализ шаговых паттернов мыши является чувствительной оценкой нервно-мышечных нарушений, связанных со многими нейрогенеративными двигательными расстройствами 13,14, Тест на измельчение гнезд является частью стандартной методики выявления импульсивного поведения грызунов, и, поскольку он использует естественное поведение грызунов, он указывает на благополучие животного 16, Размер экспериментальных групп был достигнут в результате компромисса, направленного на выполнение требований правила 3R и эффективное использование показателей размножения колоний. Однако для получения статистической мощности в группах насчитывалось не менее 10 особей, что обусловлено установлением достаточного количества размножающихся пар. К сожалению, племенная продуктивность не всегда приводила к достаточному количеству животных. Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian. Исследование было одобрено Чешской центральной комиссией по защите животных. Мышам давали мышиный корм и воду вволю. Мышей помещали группами от трех до шести животных в клетке. Перед испытанием не выполнялось никаких действий, кроме взвешивания. Подробную информацию обо всех материалах и оборудовании, используемых в этом протоколе, см. Это относится к каждому испытанию, за очевидным исключением испытания на измельчение гнезда, которое проводится в помещении для содержания и не требует использования какого-либо экспериментального оборудования. Испытания в лабиринте на возвышенности и в открытом грунте Тесты EPM и OF используют естественную склонность грызунов исследовать новые среды 18, Исследование регулируется конфликтом приближения-избегания, когда грызуны выбирают между исследованием новой среды и избеганием возможной опасности. Животные исследуют неизведанные места в поисках убежища, социальных контактов или добывания пищи. Однако новые места могут быть связаны с факторами риска, такими как хищники или конкуренты. Грызуны, естественно, предпочитают темные, закрытые отсеки, а не открытые, возвышенные и ярко освещенные места. Время отдыха, средняя скорость и общее пройденное расстояние дают дополнительную информацию о спонтанной активности животных. A-E Исследование открытого поля. Количество посещений и продолжительность пребывания в центре не различались у разных животных Д,Е. Процент посещений открытых и закрытых рук не зависел от генотипа F , а время, проведенное в анксиогенных открытых объятиях, не различалось между опытными группами G. Данные, изображенные на ящичковой диаграмме, показывают медианное значение, межквартильный размах и диапазон значений. Эта цифра была адаптирована из Syding et al. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка. Испытание хвостовой подвески ТСТ измеряет отчаяние животных, развившееся в неизбежной ситуации. Подвешенные за хвост, грызуны быстро становятся неподвижными после начального периода активной деятельности. Продолжительность неподвижности указывает на величину «отчаяния». Многочисленные лаборатории показали, что широкий спектр клинически активных антидепрессантов уменьшает продолжительность неподвижности 9,20, Этот несложный тест стал широко использоваться для скрининга потенциальных антидепрессантов, а также может быть использован для характеристики фенотипа различных штаммов животных, а также трансгенных мышей в исследованиях, изучающих нейробиологические основы депрессивных состояний. Рисунок 2 : Время неподвижности при испытании хвостовой подвески. Анализ ротарод и походки История ротародного тестирования на моделях нейромоторного дефицита восходит к середине го века Ротарод используется для оценки равновесия и координации движений животных, поскольку их нарушения проявляются в значительно более короткой задержке падения с вращающегося стержня Повторное тестирование на ротароде используется для изучения двигательных способностей животных. Стремительное развитие современной техники и цифровых технологий позволило проводить автоматизированную, точную и объективную оценку локомоторных фенотипов грызунов на основе подробных описаний их походки Автоматизированный анализ походки пришел на смену анализу отпечатков ног, а также более чувствителен к нервно-мышечным дефицитам 14,24, Изменения пространственно-временных характеристик походки животных характерны для моделируемой нозологической единицы 26,27, Рисунок 3 : Детальный анализ походки и моторного обучения на ротароде. Продолжительность движения задних конечностей E и замедление F также были увеличены. Анализ также выявил большую площадь лап в пиковой стойке G. Ни метрические параметры, ни вес животных не различались данные не показаны , что указывает на то, что наблюдаемые различия не были связаны с различиями в размерах животных. Параметры походки, изображенные на ящичковой диаграмме, показывают медианное значение, межквартильный размах и диапазон значений. Измельчение гнезд - строительство гнезда Тест на измельчение гнезд в основном используется для выявления стереотипного компульсивного поведения у мышей 29, Тем не менее, мыши проявляют естественную склонность рвать предоставленный материал для строительства гнезда. Таким образом, неспособность измельчить хлопчатобумажное гнездо используется в качестве индикатора их благополучия, на которое влияют нарушения нервно-психического развития 16, Рисунок 4 : Использование материала гнезда для строительства гнезда. Данные были преобразованы в выровненные ранги, чтобы удовлетворить предварительным требованиям нормальности. Временная шкала тестирования Каждая группа контрольная и опытная подвергается одним и тем же испытаниям в одни и те же дни. Перерыв между тестами составляет 1 день, чтобы свести к минимуму потенциальные эффекты переноса. По возможности самки и самцы тестируются в последовательные дни; в противном случае самки тестируются после того, как самцы были протестированы рисунок 5 6. Рисунок 5 : Временная шкала тестирования. Временная шкала тестирования для первой когорты представлена на верхней панели, а для второй когорты — в нижней. Синим цветом обозначены дни, в которые тестировались самцы, зеленым — самки. Желтым цветом обозначены дни, в которые тестировались оба пола. В выходные дни тестирование не проводилось. Цифры были адаптированы из Syding et al. Модели АС, созданные на различных линиях мышей, обычно проверяются с помощью тестов эмоционального состояния, двигательных функций и когнитивных способностей животных, чтобы облегчить сравнение с человеческими симптомами 31, Двигательный дефицит в моделях АС является наиболее последовательным выводом в разных лабораториях, за ним следует неизменное эмоциональное состояние мутантов и трудности с постройкой гнезд 31,32, Напротив, когнитивные нарушения либо слабо выражены, либо отсутствуют 7,31, Расхождение в когнитивном фенотипе, по-видимому, зависит от возраста испытуемых животных, как показали Huang et al. Поэтому для данной работы была выбрана батарея тестов на основе их воспроизводимости, а также возрастной и видовой независимости, поскольку сопоставимые результаты наблюдаются как у мышей, так и у крыс на моделях AS 6,31, Важно иметь в виду, что многократное тестирование животных в различных экспериментальных установках требует их тщательного упорядочения, начиная с тестов, наиболее чувствительных к предварительным манипуляциям, и в то же время с минимальным влиянием на последующие тесты, такие как тесты ЭПМ и ОФ Дополнительные опасения связаны с тестом на измельчение гнезда, при котором животные содержатся в одном доме, что, как известно, является стрессовым состоянием Впоследствии объединение самцов в общую клетку часто приводит к повышенной агрессии из-за установления иерархии. Таким образом, испытание на измельчение гнезда должно завершать график испытаний. Также хорошей практикой является тестирование самцов перед самками, чтобы избежать влияния на поведение самцов следящих женских обонятельных следов. Чередование животных, принадлежащих к разным экспериментальным группам, во время тестирования имеет решающее значение в поведенческих исследованиях, чтобы сбалансировать влияние непредсказуемых факторов на поведение животных. Хорошо известно, что обращение с животными перед тестированием в EPM влияет на их наблюдаемую реакцию на стресс. Поэтому объем обработки должен быть одинаковым для всех животных Также очень важно поддерживать условия содержания одиночные или групповые , освещение во время тестирования, время тестирования и перед тестированием для каждого животного, так как все эти факторы влияют на реакцию мыши в тесте EPM и OF и могут исказить результаты Несмотря на то, что представленные тесты относятся к хорошо зарекомендовавшим себя инструментам скрининга при разработке лекарств и фенотипированию генетически модифицированных мышей, которые дают воспроизводимые результаты в разных лабораториях, некоторые тесты все же могут подвергаться незначительным изменениям. Поскольку двигательные нарушения являются основной чертой фенотипа животных моделей АС, ротародный тест может быть ограничен 1 днем тестирования вместо 5 последовательных дней. Кроме того, параметры, описывающие качество построенного гнезда, могут быть включены в тест 38 на измельчение гнезда. Одним из явных ограничений представленных результатов является неоднозначность их интерпретации. В частности, двигательный дефицит у животных с синдромом Аспергера может объяснить изменения в задачах, связанных с передвижением, таких как тест ОФ и ЭПМ. Аналогичным образом, длительное время неподвижности при ТСТ может быть результатом большей физической усталости, которую животные с синдромом Аспергера развивают во время этого сложного теста, в отличие от депрессивного поведения. Кроме того, в тесте на измельчение гнезд сокращение использования хлопка может быть связано с нервно-мышечным фенотипом, а не с потерей инстинкта строительства гнезда. Интерпретация изменений длины шага неоднозначна, так как укорочение наблюдается в некоторых мышиных моделях болезни Паркинсона, в то время как удлинение наблюдается у стареющих мышей 39, Тем не менее, мы считаем, что увеличение общей длины шага является следствием большей продолжительности замаха. Продолжительность качания увеличивается с болью и увеличивается в моделях артрита, что означает, что более длительная продолжительность качания у мышей потенциально может позволить правильно расположить конечности перед тем, как нести вес 41, Продолжительность движения относится к продолжительности времени, необходимого животному для инициирования и поддержания поступательного движения. Таким образом, короткая продолжительность у здоровых животных может свидетельствовать о большей силе и лучшем контроле. Эти результаты не только характеризуют эту модель мышей с синдромом Аспергера, но и указывают на нарушение походки. Несмотря на дилемму интерпретации, представленная батарея поведенческих тестов обеспечивает воспроизводимые результаты, согласованные в разных лабораториях, и может служить элегантным инструментом валидации для новых мышиных моделей синдрома Ангельмана и новых терапевтических подходов 6,31,32,43,44, Kubik-Zahorodna, A. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr jove. You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions jove. Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login. You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free. To get started, a verification email has been sent to email institution. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your 'Spam' folder. Your access has now expired. Provide feedback to your librarian. If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team. Login processing JoVE Journal Behavior. Размещайте животных в исследовательском центре не менее 14 дней до тестирования, чтобы свести к минимуму любой стресс, связанный с транспортировкой и изменениями окружающей среды. Записывайте вес животных перед тестированием, так как вес является распространенным искажающим фактором в поведенческих исследованиях. Оставьте животных акклиматизироваться в экспериментальной комнате не менее чем на 1 час после транспортировки из помещения для содержания животных, чтобы свести к минимуму транспортный стресс, когда бы ни происходила такая транспортировка то есть все тесты, описанные ниже, за исключением измельчения гнезд, которое проводится в помещении содержания. Пометьте каждое животное на хвосте нетоксичным маркером на водной основе, чтобы обеспечить быструю идентификацию во время эксперимента. Удаляйте всю мочу и фекалии, отложенные животными в экспериментальном аппарате во время тестирования после каждого испытания. Очистка удаляет обонятельные следы, отложенные во время тестирования, и помогает сохранить стабильные условия эксперимента. Транспортируйте животных из домашней клетки в экспериментальную установку с максимально возможной осторожностью, желательно в небольшом непрозрачном контейнере, а затем свободно выпускайте их, если не понадобятся другие манипуляции. Поместите каждое животное во временную клетку после тестирования, чтобы они не повлияли на непроверенных животных в домашней клетке. Тестируйте самцов и самок в последовательные дни. Чередуйте порядок различных генотипов во время тестирования, чтобы уравновесить непредсказуемые факторы окружающей среды между экспериментальными группами. Поместите животных обратно в домашнюю клетку после того, как все животные будут протестированы, и верните их обратно в комнату содержания. В случае повторного тестирования животных соблюдайте интервал между каждым тестом не менее 1 дня. Вес животных варьировался от 22 до 36 г для самцов и от 18 до 28 г для самок на момент тестирования. Разместите лабиринт в форме плюса на тестовой платформе прямо под камерой. С помощью потенциометра на стене установите интенсивность света на 70 люкс в его центре с помощью люксометра, при этом его датчик будет размещен в центре лабиринта во время регулировки. Откройте программное обеспечение, дважды щелкнув по значку программного обеспечения Viewer , и загрузите конфигурацию для тестирования EPM, щелкнув по значку в верхней левой части вкладки Configuration. Загрузите плагин EPM из меню Файл. Заполните информацию о животном с помощью клавиатуры компьютера — идентификатор животного, генотип, пол и информацию об эксперименте дата, интенсивность света — в соответствующих полях вкладки «Эксперимент ». Проверьте, правильно ли настроено положение зоны, открытые и закрытые руки. С помощью визуального управления и компьютерной мыши убедитесь, что виртуальные очерченные зоны совпадают с соответствующими зонами EPM на предварительном просмотре видео. EPM — это тест, используемый для оценки общей тревожности животного, который основан на конфликте «подход-избегание». Грызуны, естественно, склонны избегать хорошо освещенных незащищенных мест открытые объятия , предпочитая их более безопасным сомкнутые объятия. Поскольку этот полностью автоматизированный тест основан на системе видеонаблюдения, программное обеспечение автоматически рассчитывает время, проведенное в каждой зоне, а также количество входов. Во время тестирования запишите животных на видео с помощью промышленной инфракрасной светочувствительной камеры. Позволяет программному обеспечению определять положение животного в режиме реального времени во время записи. После этого программное обеспечение автоматически оценивает следы животного, чтобы рассчитать все параметры, описывающие поведение животного в лабиринте. Используйте время, проведенное в анксиогенных распростертых объятиях, и процент посещений с распростертыми объятиями, чтобы оценить уровень тревожного поведения у животных. Наведите курсор мыши на значок стрелки в левом верхнем углу вкладки «Сбор». Извлеките животное из домашней клетки вручную и аккуратно поместите его в центр ЭПМ. Запустите протокол, щелкнув левой кнопкой мыши на компьютере, и немедленно покиньте экспериментальную комнату. После того, как протокол записи завершится после 5 минут свободного исследования лабиринта, сохраните записанные данные, нажав OK в окне, которое появится после завершения протокола, присвойте файлу соответствующее имя и нажмите кнопку Сохранить. Экспортируйте результаты в файл. Вытащите животное из лабиринта вручную и поместите его во временную клетку. Проведите тестирование всех животных таким же образом. Скопируйте результаты по всем испытуемым животным в файл Блокнота для автономного анализа, нажав на значок « Копировать результаты » на вкладке результатов плагина лабиринта «Повышенный плюс ». Кроме того, экспериментальная установка, такая как освещение или размещение компьютера, может варьироваться в зависимости от конструкции помещения для животных. Кроме того, он обычно используется в качестве скринингового инструмента для выявления общей тревожности в незащищенном, хорошо освещенном помещении. Это полностью автоматизированный тест, в котором используется система видеослежения, которая также использовалась в предыдущем тесте. Разместите четыре тестовых бокса OF на испытательной платформе прямо под камерой. С помощью потенциометра на стене установите интенсивность света на люкс в центре каждого теста OF с помощью люксометра, датчик которого будет размещен в центре каждой коробки во время регулировки. Откройте программное обеспечение, дважды щелкнув по значку программного обеспечения Viewer, и загрузите конфигурацию для тестирования OF, нажав на значок в верхней левой части вкладки Configuration. Заполните информацию о животных с помощью компьютерной клавиатуры — идентификатор животного, генотип, пол и информацию об эксперименте дата, интенсивность света — в соответствующих полях вкладки «Эксперимент ». Проверьте, соответствует ли положение зоны центр и периферия тестовым полям OF, и при необходимости отрегулируйте их. С помощью визуального управления и компьютерной мыши убедитесь, что виртуальные очерченные центральная и периферийная зоны соответствуют соответствующим тестовым зонам OF на предварительном просмотре видео. Позволяет программному обеспечению определять положение животного в режиме реального времени во время записи и автоматически оценивать следы животного для расчета всех параметров, описывающих поведение животного в тестовом боксе OF. Пройденное расстояние, средняя скорость и время отдыха являются параметрами, используемыми для оценки активности животных в новой среде, в то время как количество входов в центр и продолжительность пребывания в центре описывают тревожное поведение у животных. Вручную извлеките четырех животных из домашней клетки и аккуратно поместите их в угол каждой тестовой коробки. Запустите протокол, щелкнув левой кнопкой мыши по компьютерной мышке, и сразу же покиньте экспериментальную комнату. Когда протокол завершит работу после 10 минут свободного исследования лабиринта, сохраните данные, нажав OK в окне, которое появится после завершения протокола, присвойте файлу соответствующее имя и нажмите кнопку Сохранить. Вытащите животных из лабиринта вручную и посадите их во временную клетку. Проанализируйте экспортированные данные. Кроме того, экспериментальная установка, такая как освещение, количество лабиринтов или размещение компьютера, может варьироваться в зависимости от конструкции помещения для животных. Поддерживайте интенсивность освещения в помещении на уровне люкс. На вкладке « Настройки » в разделе «Глобальные » установите продолжительность съемки на с. На вкладке « Эксперимент » выберите «Новый список испытуемых» и создайте новый файл эксперимента и новый список испытуемых , следуя инструкциям в открывшейся вкладке. Запустите прогон, щелкнув Начать прогон продолжить на вкладке Сбор. Проденьте крючок подвески через ленту и подвесьте животное на ней. Начните собирать данные по каждому животному индивидуально сразу после того, как повесите его на крючок, нажав значок «Старт » под визуализированным положением для каждого животного, и непрерывно наблюдайте за животными во время теста. После завершения сбора для первой группы животных нажмите кнопку Инициировать следующий прогон , снимите животных с крючка, отсоедините клейкую ленту от их хвостов, аккуратно разрезав ленту ножницами вдоль хвоста, и поместите животных во временную клетку для содержания. На вкладке « Анализ » выберите последние 4 минуты сбора данных для анализа, затем выберите все допустимые прогоны в периоде анализа, нажмите «Анализировать выбранные объекты», выберите нужный формат данных и нажмите «Экспортировать выбранные данные», чтобы экспортировать собранные данные для дальнейшего анализа. В течение первых 2 минут животные будут энергично бороться, но поскольку реакция отчаяния становится преобладающей в течение оставшихся 4 минут, для анализа берется время неподвижности в течение этого периода. Программное и аппаратное обеспечение могут отличаться, и необходимо следовать соответствующим руководствам. Кроме того, само оборудование может отличаться например, количество контрольных позиций. Включите свет устройства, повернув ручку по часовой стрелке. Выньте первое животное из домашней клетки вручную и аккуратно положите его на ленту беговой дорожки. Закройте дверцу отсека для животных. Визуально осмотрите, чтобы убедиться, что хвост животного не застрял между дверью и рамой. Позвольте мыши исследовать ленту беговой дорожки перед записью. Запустите ленту, нажав кнопку «Пуск » на панели оборудования, и записывайте в течение примерно 10 секунд. Убедитесь в том, что можно четко и плавно передвигаться, по крайней мере, в шагов. Остановите ремень, нажав кнопку «Стоп» на панели оборудования, и вручную верните мышь во временную клетку для удержания. Выберите плавных движений, вручную записав их начальный и конечный номера кадров в соответствующие поля From frame для первого кадра и To для последнего кадра. Заполните информацию о животном — идентификатор животного, дату рождения, пол, вес, скорость ремня и угол наклона ремня — и при необходимости прокомментируйте его в соответствующих полях. Сохраните файл для дальнейшего анализа, нажав кнопку Сохранить. Очистите пояс водой и проделайте то же самое с остальными животными. Когда записи будут получены по всем животным, приступайте к анализу. Отходы животного происхождения собираются в лотки либо спереди, либо сзади беговой дорожки. После каждого исследования капы опорожняют и промывают теплой мыльной водой. Ремень протирается влажной тряпкой. Выполняйте анализ походки на основе полностью автоматизированного анализа видеозаписей следов животных. Скорректируйте данные в программном обеспечении DigiGait Analysis. Программное обеспечение позволяет выполнять небольшую коррекцию шума трассировки шагов, которая должна быть выполнена перед статистическим анализом. Тест требует, чтобы мышь ходила по вращающемуся стержню фиксированного диаметра 5 см , при этом вращение ускорялось в течение определенного периода времени 5 минут до тех пор, пока животное больше не сможет держаться на нем. Инициализируйте новый файл на вкладке Файл и сохраните его под соответствующим именем. В окне Настройка введите сведения об эксперименте, такие как дата, имя пользователя и возможные комментарии. Подготовьте график для тестируемых животных в поле «Животные » и назначьте каждому животному свое положение на стержне. Позиции не указываются в программном обеспечении явно, но они соответствуют строке списка; Например, первая строка будет обозначать первое положение стержня, пятая строка — пятое положение стержня и так далее. Не забывайте уравновешивать каждое положение стержня между экспериментальными группами. Закройте панель « Настройка », нажав кнопку « Закрыть », и откройте панель измерений, нажав кнопку «Измерение ». Когда все животные окажутся на стержне, запустите протокол тестирования, нажав « Стартовый профиль », и удилище постепенно ускорится до 40 оборотов в минуту в течение 5 минут. Если животное упало с удилища, верните его на удилище до начала протокола. Важно запастись терпением при размещении животных на стержне с постоянной скоростью вращения на старте. Цель теста состоит не в том, чтобы определить выносливость животного на стержне при фиксированной скорости вращения, а в том, чтобы найти скорость, при которой животное не может удержаться на стержне. Скорость стержня пропорциональна латентности пребывания на нем; Таким образом, он используется для выражения равновесия животного. Переместите животных во временную клетку после того, как все они упадут с удилища, или по прошествии 5 минут. Удалите все отходы животного происхождения и очистите стержень и лоток спиртом. После тестирования всех животных закройте окно Измерение , щелкнув Закрыть и щелкнув Показать , чтобы отобразить собранные данные. Экспортируйте полученные данные в файл формата. Протестируйте каждое животное на стержне три раза с минутным интервалом между испытаниями. Для дальнейшего статистического анализа используйте усредненное значение задержки для снижения по трем испытаниям. Оцените двигательную способность животного, повторяя тест в течение 5 дней подряд. Кроме того, само оборудование может отличаться, например, количеством испытательных позиций, общей конструкцией и размерами штанги. Измельчение гнезд и строительство гнезда Разделите животных в одинарные клетки для мышей из поликарбоната со стандартным оборудованием подстилка, кормовая сетка, водоснабжение на 1 неделю. Возьмите с помощью щипцов примерно 12 г хлопчатобумажного гнезда, запишите его вес вручную с помощью весов и поместите в клетку случайным образом, но с противоположной стороны от водопровода. Верните клетки с животными в помещение для содержания. Взвешивайте каждое гнездо в одно и то же время каждый день в течение следующих 4 дней вручную с помощью весов. Запишите весовые коэффициенты на бумаге или в готовую электронную таблицу. Убедитесь, что каждое гнездо сухое при взвешивании; Если нет, просушите на грелке и верните всех гнездяшек в назначенные им клетки одновременно в том месте, где мышь устроила свое гнездо. Если гнездышко разорвано на несколько частей, взвесьте самую большую. Для анализа данных выразите уменьшение веса гнезда в каждый день по отношению к исходному весу и представьте его в процентах от использованного материала. Таким образом, испытание на измельчение гнезд должно быть запланировано ближе к концу процедуры тестирования, чтобы избежать ущерба для благополучия животных. Play Video. Cite this Article Kubik-Zahorodna, A. Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account. Continue with Shibboleth or Forgot Password? Please enter your email address so we may send you a link to reset your password. You might already have access to this content! Please enter your Institution or Company email below to check. Please enter an institutional email address. Check access. Create Account. Forgot Password? Reset Password. Phone number. Request trial. Thank You! A JoVE representative will be in touch with you shortly. Waiting for verification email? Please click here to activate your free 2-hour trial. If you do not wish to begin your trial now, you can log back into JoVE at any time to begin. Enable Javascript for audio controls. Get cutting-edge science videos from J o VE sent straight to your inbox every month. We use cookies to enhance your experience on our website. Continue Learn more Close. Material was bought from Velaz vendor via direct email request. Velaz do not provide any catalogue no. Cotton nestlets for nest building test. Nestlet discription: g each, with diameter around 5 x 5 x 0. Rotarod for 5 mice, hardware and software provided. Drum dimensions: Diameter: 30 mm, width per lane: 50 mm, falling distance mm. Fully automated equipment for immobility time evaluation of 3 mice hanged by tail, hardware and software provided. Software with custom made hardware: maze, IR base, IR sensitive cameras. Custom-made OF dimensions: 42 x 42 cm area, 49 cm high wall, central zone area: 39 cm 2. A custom-made EPM was elevated 50 cm above the floor, with an open arm 79 cm long, 9 cm wide, and closed arm 77 cm long, 7.
Ганджубас купить наркотик Москва Кузьминки
Редакционная коллегия. Бакланов В. Н. — и. о. декана факультета компьютерной математики Филиала МГУ в г. Севастополе, канд. техн. наук.
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
Москва Силино купить кокаин в интернете
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
Вам потребуется минут, чтобы ответить на все вопросы. Пожалуйста, убедитесь, что у Вас достаточно времени для ответов на вопросы, а у Вашего компьютера.
Экстази бесплатные пробы Феодосия
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
ЕЛІКВІС (апіксабан), таблетки, вкриті плівковою оболонкою; таблетки по 5 мг, по 10 таблеток у блістері, по 3, по 6 або по 10 блістерів у пачці з картону.
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
Гашиш HASH бесплатные пробы Куангбинь
Каннабис Марихуана бесплатные пробы Прато
Бошки Ерейментау Купить закладку