Как приготовить метадон
Как приготовить метадонКак приготовить метадон
__________________________________
Как приготовить метадон
__________________________________
📍 Добро Пожаловать в Проверенный шоп.
📍 Отзывы и Гарантии! Работаем с 2021 года.
__________________________________
✅ ️Наши контакты (Telegram):✅ ️
✅ ️ ▲ ✅ ▲ ️✅ ▲ ️✅ ▲ ️✅ ▲ ✅ ️
__________________________________
⛔ ВНИМАНИЕ! ⛔
📍 ИСПОЛЬЗУЙТЕ ВПН (VPN), ЕСЛИ ССЫЛКА НЕ ОТКРЫВАЕТСЯ!
📍 В Телеграм переходить только по ссылке что выше! В поиске тг фейки!
__________________________________
Как приготовить метадон
Изобретение относится к медицине, в частности к наркологии. Изобретение относится к медицине, а именно к наркологии и может быть использовано для определения метадона в биологических жидкостях. Известен способ определения метадона в моче методом твердофазного иммуноферментного анализа В журн. В эксперименте показано, что при сохранении прочих параметров способа по прототипу использование конечного разведения сыворотки крови кролика в ИФА снижает чувствительность метода в 1,5 раза, тогда как применение сыворотки крови кролика с антителами к метадону в титре 1: по предлагаемому способу повышает чувствительность метода только в 2 раза, что не позволяет выявлять наличие метадона в крови. Таким образом, достигнутый нами технический результат - повышение чувствительности метода в 25 раз, не мог быть получен, исходя из известных закономерностей. В основе способа определения метадона в биологических жидкостях лежит конкурентный вариант иммуноферментного анализа, для осуществления которого необходимо: I. Получение гипериммунной сыворотки кролика. Проведение конкурентного ингибиторного иммуноферментного анализа ИФА. Получение характеристики гипериммунной сыворотки кролика титра и аффинности антител к метадону. Построение калибровочной кривой и расчет концентрации метадона в исследуемых биологических жидкостях. Определение чувствительности способа при исследовании различных биологических жидкостей. Источником антител к метадону служит сыворотка крови кролика, иммунизированного конъюгированным антигеном метадон-бычий сывороточный альбумин БСА. Связывание метадона с белками проводили по методике, описанной ранее В журн. Иммунизацию кроликов осуществляют по следующей схеме. Первый курс иммунизации состоит из подкожного введения в 6 точек спины мкг метадона-БСА в мкл воды с добавлением мкл полного адъюванта Фрейнда. Через 2 недели внутримышечно в заднюю лапу вводят такую же дозу антигена, но полный адъювант Фрейнда заменяют на неполный. Второй курс иммунизации проводят через 4 месяца, внутримышечно в заднюю лапу вводят по мкг метадона-БСА в мкл воды с добавлением мкл неполного адъюванта Фрейнда. Через 10 дней проводят вторую инъекцию аналогично предшествующей. Третий курс иммунизации проводят через 6 месяцев. Подкожно в 6 точек спины вводят мкг метадона-БСА в мкл воды с добавлением мкл полного адъюванта Фрейнда. Через две недели вводят внутримышечно в заднюю лапу мкг метадона в мкл воды с добавлением мкл неполного адъюванта Фрейнда. Через 2 недели делают еще одну инъекцию аналогично предыдущей; всего - 7 инъекций антигена. Через 14 дней после последней инъекции антигена из краевой вены уха кролика отбирают кровь и получают гипериммунную сыворотку. Сорбция антигена - метадона, конъюгированного с белковым носителем - лизоцином реагент получен в лаборатории иммунохимии ГНЦ наркологии на луночных полистироловых планшетах для иммуноферментного анализа с плоским дном фирмы Nunc, Дания, или их аналоги отечественного производства. Обычно достаточно 6 циклов такой промывки. После последней промывки остатки промывной жидкости стряхивают на фильтровальную бумагу досуха. Планшет готов к работе. В зависимости от вида анализируемой жидкости калибровочные растворы должны быть приготовлены в соответствующей жидкости моче, сыворотке или плазме крови. В остальные лунки планшета, за исключением двух контрольных бланк вносят по 50 мкл исследуемых образцов биологической жидкости с неизвестной концентрацией препарата. Время развития достаточной цветной реакции при комнатной температуре в темноте составляет обычно мин. Йошкар-Ола, при длине волны нм. Из показаний ОП в опытных лунках вычитают среднее показание ОП в контрольных лунках бланк. Определение титра и аффинности антител к метадону в гипериммунной сыворотке кролика. Сыворотка была получена после трех циклов иммунизации антигеном метадон-БСА. Гипериммунную сыворотку кролика титруют двукратным шагом в лунках полистиролового планшета, на котором сорбирован конъюгированный антиген метадон-лизоцим. Затем в лунки добавляют антитела к иммуноглобулину кролика, меченные пероксидазой хрена, в оптимальном, заранее подобранном разведении 1: После добавления субстратной смеси и экспозиции в течение 20 мин. За титр гипериммунной сыворотки принимают то максимальное ее разведение, которое дает в ИФА ОП, превышающую значение в контроле контрольной служит лунка, содержащая все компоненты системы за исключением сыворотки на 0,1. В результате реакции установлено, что титр этой сыворотки составляет Установлено, что титр гипериммунной сыворотки кролика в данном способе превышает титр сыворотки в прототипе в 2 раза Приблизительную константу аффинности Ka вычисляют как величину, обратную IC50 в журн. Вопросы наркологии, , N 4, с. Во все лунки приливают постоянное количество гипериммунной кроличьей сыворотки в конечном разведении , в отличие от способа по прототипу, где сыворотку брали в конечном разведении После инкубации в течение 90 мин. Когда калибровочные растворы метадона были приготовлены не в ЗФР-АТ, а в неразведенной сыворотке плазме крови или моче, то Ka соответственно снизилась лишь в 2 раза. Построение калибровочной кривой и расчет концентрации метадона в биологических жидкостях. Для определения метадона в биологических жидкостях используют конкурентный вариант ИФА. В основе его лежит конкуренция между метадоном, сорбированным на твердой фазе полистироловых планшетах и метадоном, присутствующим в исследуемых образцах, за центры связывания со специфическими антителами, содержащимися в сыворотке крови кролика, иммунизированного конъюгатом метадона с белком. Для выявления иммунологических комплексов антиген-антитело, образовавшихся на поверхности полистирола, в лунки планшета вносят антитела против иммуноглобулинов кролика, меченные ферментом, с последующим добавлением субстрата и хромогена. В результате ферментативной реакции происходит изменение окраски реакционной смеси, которое легко зарегистрировать с помощью спектрофотометра для микропланшетов. Интенсивность развивающейся окраски - оптическую плотность ОП - сравнивают с окраской в лунке, не содержащей метадон в жидкой фазе контрольная лунка. В случае присутствия в исследуемой жидкости метадона наблюдают снижение интенсивности окрашивания, возникающего в лунке после внесения субстратной смеси. Для того чтобы определить не только качественное, но и количественное содержание метадона в исследуемых образцах биологических жидкостей, строят калибровочную кривую. Калибровочную кривую строят по точкам, добавляя в жидкую фазу растворы с заведомо известной концентрацией метадона калибровочные растворы. В зависимости от вида биологической жидкости для приготовления калибровочных растворов метадон необходимо разводить на конечной стадии соответственно контрольной не содержащей метадон мочой или сывороткой плазмой крови. Величины ОП отмечают на оси ординат, а соответствующие им концентрации метадона в растворе на оси абсцисс. Найденные точки соединяют и полученную таким образом кривую используют для количественного определения метадона в тестируемых образцах. С этой целью значение ОП, выявленное при исследовании мочи или сыворотки плазмы крови, находят на оси ординат и, используя построенную калибровочную кривую, определяют на оси абсцисс соответствующую концентрацию метадона. Умножив полученную концентрацию на используемое в ИФА разведение, получают концентрацию метадона в 1 мл биологической жидкости. Определение чувствительности способа при исследовании различных биологических жидкостей 1. При приготовлении калибровочных растворов метадон необходимо разводить в контрольной моче, также разведенной ЗФР-АТ в отношении 1: 4. Чувствительность метода рассчитывают общепринятым способом, то есть определяют в ИФА оптическую плотность для нескольких контрольных образцов мочи от лиц, не употреблявших метадон, вычисляют среднее значение X и стандартное отклонение S. Поскольку в случае присутствия метадона в образце значения ОП снижаются, то определяют нижнюю границу контрольных значений после вычитания из значения X трех стандартных отклонений - 3S. Эта величина составляет 0, Для анализа метадона в крови исследуют плазму в кровь добавляют антикоагулянт, обычно гепарин или ЭДТА или сыворотку дефибринированная плазма, антикоагулянт в кровь не добавляют. При работе с плазмой допускается лишь однократное замораживание и оттаивание образца. Предел обнаружения чувствительность метода рассчитывают аналогичным описанному выше способом. Обычно бывает достаточно определить ОП для 6 точек, соответствующих концентрации 0, 5, 20, 50, и нг метадона в 1 мл раствора. Калибровочная кривая имеет при этом вид прямой линии. Калибровочная кривая, построенная с использованием сыворотки, разведенной ЗФР-АТ в отношении , практически идентична кривой, полученной с неразведенной сывороткой. Пример 1. Провели ИФА по предлагаемому способу. В свободные лунки в дуплетах внесли по 50 мкл исследуемых образцов сыворотки крови человека, содержащих различные концентрации метадона. После инкубации в течение 60 мин. Через 20 мин. Развившуюся окраску реакционной смеси в лунках планшета измеряют на спектрофотометре Minireader II Dynatech. В результате измерения ОП во всех лунках и вычитания из этих показаний значений ОП в 2 контрольных лунках бланк была построена калибровочная кривая фиг. ОП в лунках с образцами сыворотки крови, содержащими метадон, представлена в следующей табл. Таким образом, применение предлагаемого способа дало возможность определить в образцах сыворотки крови концентрации метадона, лежавшие за пределами чувствительности способа по прототипу. Пример 2. ИФА проводили так же, как и в примере 1. Калибровочную кривую строили на моче с известными концентрациями метадона: 0, 10, 25, 50, , , фиг. ОП в лунках с образцами мочи, содержащими метадон, и соответствующая ей концентрация метадона, представлена в следующей табл. Способом по прототипу ни в одном из образцов метадон выявлен не был. Метод прост в исполнении, не требует дорогостоящего оборудования и реагентов и может заменить зарубежные коммерческие наборы для исследования мочи, основанные на радиоиммунном и иммунофлуоресцентном анализе. RUC1 ru. Grauballe et al. CNB zh. RUC2 ru. Tencer et al. JPHA ja. CNA zh. JPB2 ja. USA1 en. Lanzillo et al. Development of competitive enzyme immunoassays for human serum angiotensinconverting enzyme: a comparison of four assay configurations. CAA1 en. A method for determining total analyte concentration in a sample having both free and bound analyte. Tagata et al. Quantitative capillary reversed passive latex agglutination test for C-reactive protein CRP in the dog. Anti-triiodothyronine autoantibodies interfere with two recently commercialized radioimmunoassays for free triiodothyronine. Murthy et al. Activity concentration and mass concentration monoclonal antibody immunoenzymometric method compared for creatine kinase MB isoenzyme in serum. JPSB2 ja. Beck et al. Maeda et al. Urinary carboxylesterase 5A fragment as an early diagnostic marker of cat chronic kidney disease. Martinez et al. WOA1 ja. Preliminary clinical studies of C-reactive protein quantified by enzyme-linked immunoassay. Clinical and analytical performance of automated immunochemiluminometric assays for determination of cardiac markers in serum. USA en.
Формула и синтез метадона
Как приготовить метадон
Как приготовить метадон
Синтез Метадона 3 способами
Как приготовить метадон
RU2137135C1 - Способ определения метадона в биологических жидкостях - Google Patents
Как приготовить метадон
Как приготовить метадон
Рецепт на дозу: 25 лет метадоновой программе в Германии
Войти или зарегистрироваться. RC Forum Legalizer. Для просмотра полной версии форума нужно Войти или зарегистрироваться. В период военного положения в Украине рекомендуем сохранять трезвость, это жизненно важно как вам так и вашим близким, возможно вам придётся их защищать и для этого лучше оставаться трезвыми! Нужно пережить это не лёгкое время, помогайте друг другу чем можете, мы с вами! Гуманитарная помощь жителям Украины. LegalizeR Война. Формула и синтез метадона Синтез метадона довольно несложный процесс. Потребуется лишь некоторые химические реагенты и минимальный лабораторный инвентарь. Вот, один из способов получить метадон в условиях домашней лаборатории. Итак, для начала в 3-литровую емкость добавляем мл обычной воды. Туда же насыпаем грамм гидроокиси натрия и перемешиваем. Полученный раствор оставляем остывать при комнатной температуре. После перелейте раствор в другую емкость. Теперь, полученный раствор добавляем к граммам 1-диметиламинохлорпропана гидрохлорида. Хорошенько перемешиваем. Появившееся основание масляное вещество коричневого цвета отделяем от основной массы с помощью делительной воронки. Основание промываем соленой водой раза. Масла должно получиться около гм. Теперь приступаем к осуществлению основной реакции. Берем 4-литровую колбу и добавляем туда гм дифенилацетонитрила и раствор гидроокиси натрия, который мы приготовили выше. После этого в обязательном порядке добавляем 25 мл тетрабутиламмония. Все это начинаем медленно варить, периодически помешивая. Затем, в эту смесь постепенно начинаем добавлять мл приготовленного ранее основания. В течение часов, если все было сделано правильно, основание будет полностью израсходовано. На протяжении часов температура варки должна держаться в районе градусов по Цельсию. В итоге должна получить густая смесь, светло-бежевого цвета. Переливаем ее в отдельные емкости и замораживаем в морозильнике. Далее, полученную смесь размельчаем и промываем водой. Все это лучше делать в противогазе и перчатках, так как отдельные части смеси могут быть крайне токсичны. Берем ступку, добавляем туда петролейный эфир, кладем туда кусочки полученного нитрила и растираем. Нужно тщательно измельчить каждую частицу вещества. Нужно заменить эфир в ступке на новый около раз. Полученные бежевые кристаллики сушим на открытом воздухе. Теперь вторая стадия синтеза. Затем к этому раствору заливаем мл этилмагния бромида в эфире. Раствор кипятим при температуре 80Со в течение трех часов. После того, как кислотная реакция будет осуществлена, перелейте все в стаканы и отправьте в морозильник на 10 часов. Полученные кристаллы нужно еще пару раз перекристаллизировать из метанола и все, синтез закончен. Полученного вещества хватит на одну дозу в мг. Мне нравится x 3. Мне нравится x 1. Мне нравится x 1 Согласен x 1. Мусора и писали чтоб,неправильно делали. Ну да глупость полнейшая И эфиром не моют а на нем упаривают. А после метадона Большенство наркотиков не действует какое то время. Это продукт жесток. Полнейшая бредятина. Начиная с самого синтеза, и никто в открытый доступ не выложит данную инфу. Не вводите людей в заблуждение. Кто - то ведь попробует слепить конструктор из данной инфы и в лутшем случае полиняет на кэш, в худшем лишиться здоровье. First of all, 50 miles is wrong, but I did a similar synthesis and concluded, of course it is not. Вы должны войти или зарегистрироваться, чтобы ответить. Показать игнорируемое содержимое. Похожие темы - Формула синтез метадона. Ответов: 0 Просмотров: Ответов: 1 Просмотров: Ваше имя или e-mail: У Вас уже есть учётная запись? Нет, зарегистрироваться сейчас. Да, мой пароль: Забыли пароль?
Как приготовить метадон