Изучение влияния гумата натрия на токсичность и биологическую активности агрохимических средств - Биология и естествознание курсовая работа

Главная

Биология и естествознание
Изучение влияния гумата натрия на токсичность и биологическую активности агрохимических средств

Методика определения содержания подвижного цинка в почве. Растения в качестве объектов биотестирования. Оценка действия сочетаний разных концентраций цинка и гуматов на биологические системы. Культивирование инфузорий. Биотест на проростках семян редиса.


посмотреть текст работы


скачать работу можно здесь


полная информация о работе


весь список подобных работ


Нужна помощь с учёбой? Наши эксперты готовы помочь!
Нажимая на кнопку, вы соглашаетесь с
политикой обработки персональных данных

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

В сложившейся в последние десятилетия сложной экономической и экологической ситуации остро стоит вопрос применения средств, повышающих плодородие почв. Для этого обычно используются органические и минеральные удобрения, а также агромелиоративные мероприятия. На протяжении нескольких десятков лет ведутся работы по изучению новых веществ, способных повысить эффективность удобрений и оказать протекторное действие на культуры.
Одной из перспективных разработок в данном направлении является синтез соединений гуматов, в частности рассматриваемый в данной работе гумат натрия (Куликова, 2008; Перминова ?). Поскольку гуматы являются очень важной природной составляющей почв, внесение их под культуры приводит к существенным прибавкам урожая, более того, это позволяет создать запас питательных веществ на следующие года.
В условиях современных антропогенных экосистем особое значение имеет еще одна экологическая функция гумусовых кислот - биопротекторная, заключающаяся в защите и повышении устойчивости растений при действии неблагоприятных внешних факторов. Важность этой функции подчеркивается многими авторами (Орлов, 1990; Карпачевский, 1993; Кирюшин и др., 1993) Однако, если в литературе достаточно широко представлены работы по исследованию взаимодействия ксенобиотиков с различными фракциями органического вещества почв, то работ по влиянию гумусовых веществ на устойчивость растений к действию различных токсикантов пока сравнительно мало.
Для рационального использования агроценозов необходимо присутствие в почве всего комплекса необходимых растениям веществ. В частности цинк является одним из элементов, лимитирующих развитие растений (Битюцкий, 1999; Ильин, 1991). В серии проведенных опытов, было показано что избыток цинка также пагубен как его острый недостаток.
Использование серии биотестов (Черемных, Воронина, 2007; Минеев и др., 1991) для оценки воздействия различных доз цинка позволяет получить данные по его влиянию на живые организмы (растения, гидробионты, микроорганизмы, и др.).
В данной работе применялся метод биотестирования, включающий в себя биотесты на проростках растений и биотесты на инфузориях. Исследования с помощью двух методов позволяет сопоставлять полученные результаты, так, с пользование биотеста с растениями условно имитирует ответ целого организма, а использование теста с инфузориями позволяет получить ответную реакцию на клеточном уровне.
Изучение влияния гумата натрия на токсичность и биологическую активности агрохимических средств (цинковых хелатных удобрений), с привлечением двух биотест систем: растительный биотест и биотест на инфузориях.
· Провести скрининг методов биотестирования для соединений полифункционального действия
· Провести биотестирование разных концентрации цинка на примере препарата Рексолин-Zn15
· Провести биотестирование разных концентраций гумата натрия
· Оценить действие сочетаний разных концентраций цинка и гуматов на биологические системы
Под биотестированием (bioassay) обычно понимают процедуру установления состояния среды с помощью тест-объектов, сигнализирующих об опасности независимо от того, какие вещества и в каком сочетании вызывают изменения жизненно важных функций у тест-объектов. Благодаря простоте, оперативности и доступности биотестирование получило широкое признание во всем мире и его все чаще используют наряду с методами аналитической химии.
Биотестирование представляет собой методический прием лабораторной оценки качества образцов по реакциям подопытных организмов с известными и поддающимися учету характеристиками. Биологический объект в биотестировании фактически используется в качестве аналитического прибора или его части, при этом считается значительно более дешевым. Для биотестирования возможно использования самых разных характеристик сообщества: на уровне популяции и сообщества, суборганизменном, на уровне организма, элементов клеточной структуры или органов, биохимических систем и др.. Возможности и эффективность применения этих характеристик существенно различаются.
Так, методы биоиндикации, связанные с исследованиями на суборганизменном уровне, могут быть весьма чувствительными к действию некоторых факторов среды, но плохо отражают качество среды в целом. Это относится к показателям, определяемым и на субклеточном, и на клеточном, и на тканевом уровнях. Количество морфологических аномалий, увеличивается под действием антропогенных факторов также избирательно: некоторые негативные воздействия на этот показатель не влияют. Кроме того, выяснить этиологию наблюдаемых аномалий часто не удается. Все это резко ограничивает экодиагностические возможности учета отклонений на суборганизменном уровне (Мелехова, Егорова 2007). Показателем токсического действия служит степень изменения определенных параметров живых систем, которая фиксируется различными методами. Это могут быть как биохимические или биофизические методы, разные виды микроскопии, визуальный подсчет.
На практике наиболее распространенными методами биотестирования являются такие, в которых фиксируются, главным образом, такие интегральные параметры, как показатели выживаемости, роста, плодовитости тест-организмов.
Простейшими количественными показателями являются биомасса сообщества и его численность. Биомасса или численность сообщества и тенденции их изменения иногда позволяют в первом приближении судить о состоянии экосистемы и силе испытываемого ею воздействия.
Состояние такой системы в условиях антропогенного воздействия может быть оценено также по показателям, характеризующим динамику биомассы бентоса, т.к. диапазон ее сезонных и межгодовых изменений увеличивается пропорционально силе воздействия негативных факторов.
Кроме того, биоиндикация может быть основана на известном явлении увеличения биомассы, удельной и абсолютной продуктивности сообществ в условиях нетоксичных дестабилизирующих воздействий (Deeborah Chapman GB.1999)
Для получения более надежной и полной информации о качестве среды и состоянии экосистемы необходимо использовать более подробные характеристики сообществ.
Так, довольно чувствительными индикаторами воздействий иногда оказываются количественные показатели, учитывающие абсолютное или относительное обилие совокупно учитываемых членов сообщества, обладающих сходной жизненной стратегией. Об ухудшении качества среды свидетельствуют увеличение доли видов "толерантных", по сравнению с "резистентными" и с "патиентными" видами (Шуйский, Максимова 2002).
Для биоиндикации используется также соотношение биомассы и численности (плотности), или средняя масса особи в сообществе. Уменьшение средней массы особи в сообществе считается признаком ухудшения качества среды.
Все методы биотестирования характеризуются своими особенностями. Это и доступность тест-объекта, которая определяется возможностью их культивирования в лабораторных условиях, поддержанием необходимых условий температуры, освещенности, сложностью состава питательных сред, чистотой воздуха и пр. Это и оперативность получения ответа.
Наиболее быстрые реакции на токсическое воздействие равных концентраций удается регистрировать у простых организмов -- бактерий, водорослей и инфузорий. Наступление таких реакций ограничивается минутами или несколькими часами. Сутками измеряется проявление ответных реакций более крупных объектов (у ракообразных -- дафний), а так называемая хроническая токсичность оценивается в течение многих суток и даже недель. Каждый метод характеризуется и своими техническими способами реализации. С точки зрения технического оснащения наиболее доступными оказываются методы, основанные на регистрации общебиологических характеристик -- подсчет численности или прироста популяций.
Для проведения физиолого-биохимических оценок и определения соотношения, например, живых и мертвых клеток или флуоресценции тест-культур организмов необходима специальная серийная аппаратура, устройства которые до настоящего времени производятся промышленностью в крайне недостаточном количестве (Бойкова , 1989)
Известно, что живые организмы по разным причинам со временем могут менять свою чувствительность, поэтому обязательной процедурой в лаборатории является контроль тест-объекта с помощью модельного токсиканта. Пригодными для анализа признаются тест-системы лишь в том случае, если концентрация модельного токсиканта, вызывающая 50%-ный эффект за определенное время, не выходит за пределы фиксированного в описании методики диапазона. Контроль таких параметров должен проводиться регулярно не реже 1 раза в три месяца.
Определенная нормативным документом процедура биотестирования промышленных отходов предполагает анализ водной вытяжки на острую токсичность, т.е. относительной кратковременный эксперимент (от нескольких минут до 4 суток).
Тест-объект (test organism) - организм, используемый при оценке токсичности химических веществ, почв , природных и сточных вод, донных отложений, кормов и др. Тест-объекты, по определению Л.П.Брагинского (2000) - "датчики" сигнальной информации о токсичности среды и заменители сложных химических анализов, позволяющие оперативно констатировать факт токсичности (ядовитости, вредности) водной среды ("да" или "нет"), независимо от того, обусловлена ли она наличием одного точно определяемого аналитически вещества или целого комплекса аналитически не определяемых веществ, какой обычно представляют собой сточные воды.
Тест-объекты с известной степенью приближения дают количественную оценку уровня токсичности.
Важное условие правильного проведения биотестирования - использование генетически однородных лабораторных культур, так как они проходят поверки чувствительности, содержатся в специальных, оговоренных стандартами лабораторных условиях, обеспечивающих необходимую сходимость и воспроизводимость результатов исследований, а также максимальную чувствительность в токсическим веществам. (Жмур, 1997) Вместе с тем, совершенно очевидно, что загрязнение разных типов почв отходами сопровождается с одной стороны, процессами связывания токсикантов, в частности, гуминовыми комплексами, аккумуляцией, с другой стороны, биологическим переносом и транслокацией.
Поэтому, для анализа почвенных образцов, загрязненных отходами, целесообразно применять более широкий спектр тест-объектов, включающий почвообитающих организмов, или педобионтов.
В качестве индикаторов используются тест-функции. Это критерии токсичности (toxicity criterion), или жизненные функции, используемые в биотестировании для характеристики отклика тест-объекта на повреждающее действие среды (Подунова, 1999)Тест-фукнкции, используемые в качестве показателей биотестирования для различных объектов:
для инфузорий, ракообразных, эмбриональных стадий моллюсков, рыб, насекомых - выживаемость (смертность) тест-организмов.
для ракообразных, рыб, моллюсков - плодовитость, появление аномальных отклонений в раннем эмбриональном развитии организма, степень синхронности дробления яйцеклеток.
для культур одноклеточных водорослей и инфузорий - гибель клеток, изменение (прирост или убыль) численности клеток в культуре, коэффициент деления клеток, средняя скорость роста, суточный прирост культуры.
для растений - энергия прорастания семян, длина первичного корня и др.
Растения в качестве объектов биотестирования
Одним из методов, обладающим высокой чувствительностью, универсальностью, интегральностью и простотой является метод биотестирования с применением растений. Он широко применяется для определения токсичности веществ как в почве, так и в воде.
Итоговым результатом определения токсичности по тест-растению (фитотоксичность) является изменение в формировании корневой системы, морфологических характеристик надземной части растения, биомассе (общей и отдельных органов растения). Вопрос морфологических изменений в корневой системе в зависимости от многих факторов давно привлекает внимание исследователей. На первых этапах развития корневая система растений высокочувствительна. Изменения внешних морфологических признаков растения в период вегетации весьма селективны (определённые изменения в морфологии растения, связаны с определёнными факторами). Эти особенности широко используются в диагностике питания растений, в определении гормональной активности, и пр. В настоящее время интерес к этому методу возрос в связи с обострением экологической ситуации и новыми технические методические возможности.
Кроме оценки неблагоприятного воздействия, оказывающего прямое или опосредованное воздействие на объекты, метод широко используется и для оценки стимулирующей активности биологически активных веществ БАВ. Метод позволяет учитывать не только аллелопатическое взаимодействие, но и действие органических веществ стохастического характера (например, гуминовых веществ)
Цинк относится к биофильным элементам, поэтому как его недостаток, так и его избыток может привести к губительным последствиям. Токсическое действие на растения высоких концентраций цинка может проявляться в нарушении поступления и распределения других элементов. Выступая в качестве антагониста железа, цинк вызывает хлороз растений, при этом уменьшается поглощение железа и нарушается его продвижение. ( Воскресенская и др.,1987). Общее содержание тяжелых металлов в почвах дает представление лишь о потенциальной опасности загрязнения, которая может реализоваться при определенных условиях. В растения из почвы поступают только мобильные соединения химических элементов, поэтому важно рассматривать подвижные формы металлов (Ильин, 1990; Никушина, 1994). Попавшие в почву тяжелые металлы, прежде всего их мобильная форма, претерпевают различные трансформации. Один из основных процессов, влияющих на их судьбу в почве - закрепление органическим веществом.
Для цинка, учитывая его частый дефицит в почвах, повышение содержания его подвижной формы при загрязнении не такое значительное, Оно составляет для дерново-подзолистых почв 36,18 мг/кг, а через 2 года - 7,92 мг/кг (Куликова, 2008). Загрязнение почвы тяжелыми металлами оказывает влияние на формирование урожая и качество продукции (Ильин, 1991).
Выявлено, что токсичные элементы, накапливающиеся в растениях, до определенного предела не оказывают отрицательного влияния на продуктивность сельскохозяйственных культур. Отмечается также эффект от использования биологически активных веществ на рост и развитие зерновых злаковых культур и формирование урожайности.
В рамках исследования был проведен анализ данных по существующим нормативам и предельно допустимым концентрациям (ПДК) цинка в объектах окружающей среды.
Таблица 1. ПДК цинка для почвы, воды и растительной продукции.
Подвижные формы Госкомприрода СССР, № 02-2333 от 10.12.90
Федеральный центра госсанэпиднадзора Минздрава России. МУК 4.1.1503-03
Влияние гуматов на развитие растений
Физиологическая и биопротекторная активности относятся к важнейшим функциональным параметрам гумусовых веществ. Они являются одним из ключевых параметров экологического потенциала органического вещества почв. Благодаря этим свойствам гумусовые вещества играют особую роль как в обеспечении высокой биологической продуктивности системы почва -- растение, так и в повышении устойчивости этой системы к неблагоприятным воздействиям (загрязнению и т.п.).
Способность гумусовых веществ оказывать благоприятное влияние на рост и развитие растений была обнаружена К.В. Нефедовым (1887) еще в конце прошлого века и неоднократно подтверждалась позднее (Ваксман, 1937; Тюрин, 1937). Было доказано, что гумусовые кислоты влияют на общий ход обмена веществ и в особенности на процессы дыхания и роста растений.
Установлено, что под действием гумусовых веществ у растений активизируется корнеобразование, за счет изменения селективности клеточных мембран усиливается поступление воды и элементов питания, что гумусовые соединения положительно влияют на все фазы митотического цикла клеток и вызывают увеличение значений митотического индекса в 1,5 раза. Также показано положительное влияние гуминовых кислот на поглощение кислорода, активацию ферментных систем (каталазы, пероксидазы, амилазы, инвертазы, альдолазы и др.) и углеводного обмена, усиление образования хлорофилла, увеличение содержания сахаров и белка в урожае. При сравнении транспортного индекса поступления в растения изотопа серебра и его подвижности в самом растении в составе комплексов серебра с различными лигандами в ряду минеральные формы - оксалат - фульваты - гуматы оказалось, что гуминовые кислоты обеспечивают наивысшие значения этих характеристик (Jones, Peterson, 1986). При изучении спектров сверхслабой люминесценции корней ржи и пшеницы показано (Goleblowska, Flak, 1996) благоприятное стимулирующее действие гуматов калия как на общий уровень физиологических процессов в корнях, так и на их рост.
В работе по исследованию воздействия гумусовых веществ на рост озимой пшеницы в условиях оптимального минерального фона (Gone, 1996) установлено, что гумусовые препараты оказывали стимулирующий эффект не только на рост растений, размер и вес зерен, но и на общее содержание белка в зерне.
Особого внимания заслуживает уже давно дискутируемый в литературе вопрос о возможности проникновения гумусовых веществ или их фрагментов через клеточную мембрану корневых волосков в ткани растений. Многие исследователи физиологической активности гумусовых веществ полагают, что такой процесс возможен и гумусовые вещества поступают в растительные ткани и непосредственно воздействуют на биохимические процессы внутри клетки. На основе этих представлений возникают новые теории гумусового питания растений. В соответствии с положениями одной из них высшие зеленые растения рассматриваются как факультативные гетеротрофные организмы с «симбионтным пищеварением». При этом предполагается, что гумусовые вещества и их структурные компоненты, поступая через клеточную стенку корневых волосков в ткани и клетки растений, поглощаются и ассимилируются растением целиком и в виде достаточно крупных блоков встраиваются в качестве готовых структурных элементов в ткани растения. На основе таких построений предлагается открытие новой трофической ветви биологического круговорота углерода, в которой циркулируют структурные и функциональные блоки биологических макромолекул, многократно используемых на различных трофических уровнях .
Процесс взаимодействия биоты и в особенности высших растений с гумусовыми веществами очень сложен и составляет одну из ведущих проблем в почвенном питании растений. Гипотеза поступления крупных фрагментов гумусовых веществ в растения и встраивания их в готовом виде в ткани растений, несмотря на всю свою привлекательность, не имеет строгих научных доказательств. Для решения данного вопроса стали активно использовать радиоактивные изотопы углерода и других элементов, однако методические затруднения заметно охладили интерес к этим работам. Так, например, в одной из первых работ по этому вопросу (Fuhr; Sauerbeck, 1967) с использованием метода автодиографии на изотопах С 14 авторы попытались доказать поступление макромолекул гумусовых веществ в корневую систему растения. Однако из-за того, что, во-первых, не удалось дифференцировать прочно адсорбированные на поверхности корневых волосков макромолекулы от проникших внутрь последних, а во-вторых, не было зафиксировано передвижения радиоактивной метки к центральному цилиндру (ксилеме) сорта, авторы сделали вывод, что транспортировка гумусовых веществ через клеточную стенку если и возможна, то только для соединений ила фульвокислот. В другой работе (Vaughan; Jnehan, 1976), выполненной теми же методами, но уже в модельных условиях на проростках ржи, показано, что меченные С 1 гумусовые вещества адсорбируются на поверхности корней, но не транспортируются по ксилеме к проростку.
На основании многолетних исследований влияния гуминовых веществ торфа на рост и качественные показатели урожая целого ряда сельскохозяйственных культур (Наумова, 1956) было установлено, что гумусовые вещества, не проникая внутрь растительной клетки, проявляют мембранотропное действие и, активизируя тем самым обменные процессы в растениях, стимулируют рост тканей, повышают их иммунитет и устойчивость к неблагоприятным условиям.
В то же время, несомненно, еще одним из реальных механизмов влияния гумусовых кислот на рост растений в естественных условиях, помимо прямого физиологического воздействия, является (Чижевский, Дикусар, 1955) стимуляция ПК прикорневой и симбиотической микрофлоры, в особенности грибов, которые сами выделяют регуляторы роста и развития растений. В последние годы эти выделяемые почвенными грибами вещества достаточно подробно исследовались , результатом чего явился вывод о том, что они ускоряют как общее течение биохимических процессов вблизи поверхности клеточной стенки корневых волосков, так и выработку ауксино- и гиббереллиноподобных ростовых стимуляторов в самом растении. На этой основе был предложен целый ряд эффективных регуляторов роста растений типа фузикокцина, эмистима и др. По некоторым данным фузикокцин в ряде случаев превосходит гиббереллин по своему стимулирующему действию на растения.
В условиях современных антропогенных экосистем особое значение имеет еще одна экологическая функция гумусовых кислот - биопротекторная, заключающаяся в защите и повышении устойчивости растений при действии неблагоприятных внешних факторов. Важность этой функции подчеркивается многими авторами (Орлов, 1990; Карпачевский, 1993; Кирюшин и др., 1993) Однако, если в литературе достаточно широко представлены работы по исследованию взаимодействия ксенобиотиков с различными фракциями органического вещества почв, то работ по влиянию гумусовых веществ на устойчивость растений к действию различных токсикантов пока сравнительно мало.
Так, например, А.И. Горовая (1983) обнаружила, что предпосевная обработка семян сорго слабым раствором ГК позволяет ослабить токсическое влияние гербицидов на митотический цикл клеток меристемы корня. С.А. Гуминский (1968) показал, что ГК стимулируют процесс дыхания растений в условиях острого дефицита кислорода. По данным других авторов ГК снимают также отрицательное воздействие высоких доз минеральных удобрений (Chaminade, 1965), ослабляют вредное действие на растения почвоутомляющих веществ и радионуклидов (Горовая, 1988), помогают снятию токсикозов у растений. Совместное применение гуминовых препаратов с фунгицидами позволяет снизить ингибирующее действие последних на растения (Наумова и др., 1995). Применение гуматов натрия заметно уменьшает фитотоксическое действие некоторых групп гербицидов и стимулирует ферментативную активность почв, причем в этом процессе участвуют CP гуминовых кислот (Kozjubinskaya еt.аl., 1996). Гумусовые вещества обладают выраженной антимутагенной активностью, защищая растения от воздействия гербицидов (Stewart, 1984, De Simone е.а., 1996). В работе группы исследователей из МГУ (Perminova еt.аl., 1996) на материалах вегетационных опытов с пшеницей и кукурузой, а также в лабораторных опытах с культурами водорослей показано, что гумусовые вещества значительно ослабляют токсичность широкого набора ксенобиотиков (тяжелые металлы, полициклические углеводороды, гербициды и др.) и являются, по сути, прекрасными естественными детоксикантами.
При действии на клетки водоросли Nitellopsis obtlisa и огурца Cucumis satins в фитотронах на искусственных средах гуматы натрия могут выполнять значительную биопротекторную функцию в условиях дефицита железа, стимулируя адаптивные процессы (изменение окислительно-восстановительного потенциала плазмалеммы клеток), что повышает жизнестойкость растений в неблагоприятных условиях (Slesak, KowaJiszyn, 1996).
Таким образом, важная роль системы гумусовых кислот почвы в нормализации и стимуляции роста и развития растительных организмов очевидна. Однако большинство исследований, как это было показано выше, посвящены изучению механизма действия гумусовых веществ на физиологические и биохимические процессы в растениях, а не на рассмотрение их биопротекторных свойств.
Именно в этом направлении будут проводиться дальнейшие работы с целью выявить защитные свойства гумусовых веществ, изучить оптимальные концентрации для разного рода почв и загрязнителей.
Совместное влияние меди в качестве тяжелого метала на развитие растений
Интерес представляют работы по исследованию совместного действия тяжелых металлов и гуматов (Куликова, 2008)
Результаты биотестирования показали, что внесение гуминовых препаратов приводило к снижению токсичности меди уже при концентрации гумусовых веществ 5 мг/л, а при концентрациях 30 мг/л и выше наблюдали полное снятие негативного действия меди. Особо следует подчеркнуть, что при концентрациях ГВ 30 мг/л и выше длина корней в присутствии ГВ превышала даже контрольные значения для проростков, проращиваемых на дистиллированной воде без внесения меди. (Kholodov at.el., 2004)
Культивационная вода должна удовлетворять следующим требованиям:
- отсутствие органических загрязняющих веществ, хлора, токсических веществ и антагонистических для парамеции организмов (простейших, многоклеточных);
- жесткость общая от 60 мг/дмз до 200 мг/дм (выраженная в СаСОз);
- концентрация растворенного кислорода - не менее 6 мгО 2 /дм з .
При исследовании вод с повышенным солесодержанием (содержание сухого остатка выше 1 г/дм) проводят предварительную постепенную адаптацию культуры тест - объектов, добавляя порциями хлористый натрий в культивационную воду (содержание солей по сухому остатку не должно превышать 6 г/дм ).
Получение исходного материала, транспортировка, содержание и кормление парамеции, выращивание культуры.
Важное условие правильного проведения биотестирования - использование генетически однородных лабораторных культур, т.к. они проходят поверки чувствительности, содержатся в специальных, оговоренных стандартами лабораторных условиях, обеспечивающих необходимую сходимость и воспроизводимость результатов исследований, а также максимальную чувствительность в токсическим веществам. Культуру парамеции выращивают в термостате при температуре 22 о С. В качестве культиваторов используют чашки Петри (диаметр 9 см). Пересевают культуру инфузорий один раз в 10 дней. Для этого в чистые чашки Петри наливают на половину чашки, дехлорированную водопроводную воду.
В каждую чашку добавляют по 1 см суспензии дрожжей (можно добавить небольшой кусочек сухой корки банана). Таким образом, содержимое чашек становится питательной средой для выращивания парамеции.
Форма соединения цинка используемая в исследовании
В данной работе рассматривалась хелатная форма цинка (цинк-двунатриевый комплекс этилендиаминтетрауксусной кислоты [EDTA-Zn] Na2 д.в Zn 11 %) в виде препарата «Рексолин 15».
Paramecium caudatum Ehrenberg -- одноклеточные организмы размером 180 - 300 мкм. Массовый вид, обитающий в пресной воде с высоким содержанием органических веществ. В сточной воде является часто основным видом, поли-альфа-мезосапроб.
Простейшие, в том числе ресничные инфузории, составляют основную часть микрофауны активного ила. Они участвуют в освобождении очищаемой воды от взвешенных бактериальных клеток и от рыхлых, плохо оседающих бактериальных агломератов, способствуя тем самым повышению эффективности очистки. Методика определения острой токсичности водных вытяжек из отходов, почв, осадков сточных вод, а также пресных поверхностных, грунтовых, сточных и питьевых вод с использованием инфузорий Paramecium caudatum в лабораторных условиях основана на определении смертности парамеций при воздействии токсических веществ, присутствующих в исследуемой водной среде, по сравнению с контролем. (Гроздов, 2001; Методическое руководство. Госкомприроды СССР от 06.08.1990).
Культивирование инфузорий Paramecium caudatum
Культура инфузорий предоставлены для проведения исследований кафедрой биохимии Московского государственного университета прикладной биотехнологии.
Инфузории культивировали на минерально-дрожжевой среде, приготовление которой состоит из двух этапов:
Приготовление 10-кратного концентрированного раствора по прописи Лозина-Лозинского (в 1 литре дистиллированной воды растворяли соли; 0,1г NaCl; 0,01г KCl ; 0,01 г MgSO 4; 0,01 г CaCl 2 ;0,02г NaHCO 3 ).
Приготовление питательной среды (в плоскодонные конические колбы объемом 100 см 3 вносили 45 мл дистиллированной воды, 5 мл концентрированного раствора Лозина-Лозинского. Закрывали колбу ватно-марлевой пробкой, кипятили 5 минут и остужали до комнатной температуры.
Среда для культивирования инфузорий была приготовлена на дистиллированной воде стандартного качества, которую получали с помощью дистиллятора, не имеющего в своем составе ни латунного, ни медного испарителя или конденсатора.
Автоматизированная биотехническая система
В РФ создана автоматизированная биотехническая система, состоящая из устройства БиоЛаТ программы AutoCiliata и методических приемов культивирования и проведения исследований с использованием в качестве тест-объектов инфузорий Stylonychia mytilus, Paramecium caudatum, Tetrahymena pyriformis.
На первом этапе биотестирования осуществляется подсчет инфузорий Paramecium caudatum в течение 2-х часов экспозиции их в 2-х подготовленных пробах продукта, представляющих собой водный экстракт и разбавленный ацетоновый экстракт. Оценка прироста Tetrahymena pyriformis осуществляется на основе подсчета их в водном экстракте продукта через 24 часа после экспозиции в пробе.
Для подсчета простейших применяется автоматизированный прибор БиоЛаТ. Интегральная оценка безопасности вычисляется автоматически на основании результатов 2-х этапов биотестирования и в соответствии с алгоритмом программы AutoCiliata
Способ выявления реакции инфузорий на исследуемый продукт состоит в сравнении количества этих тест-объектов через определенные промежутки времени. Подсчет живых клеток простейших основан на обработке изображения емкости для проведения исследования (лунки) программой AutoCiliata. Живые инфузории - это подвижные объекты (скорость перемещения инфузорий может быть 0,01 - 2мм/сек) и признаками, позволяющими идентифицировать объект, как живую клетку, являются его размеры и факт самостоятельного
Изучение влияния гумата натрия на токсичность и биологическую активности агрохимических средств курсовая работа. Биология и естествознание.
Диссертация На Тему Синтез И Свойства 4-Замещенных 5н-1,2,3-Дитиазолов
Реферат: Вибір між патентною охороною та засекречуванням
Курсовая работа по теме Экономическая сущность производства. Воспроизводство и экономический оборот
Диплом Победителя Всероссийского Конкурса Сочинений
Курсовой Работы Заключается В
Дипломная работа по теме Моніторинг завантаження сервера за допомогою термінального доступу
Реферат по теме Восточный Китай
Правила Презентации Дипломной Работы
Курсовая работа по теме Моніторинг забруднення підземних вод в районі розташування полігону твердих побутових відходів (полігону промислових відходів)
Реферат: Антикризисные мероприятия в области финансового менеджмента, применяемые российскими компаниями
Доклад: Брат на брата. Глава из книги "История Народа Хунну"
Реферат по теме Электромагнитная теория света
Контрольная работа: Музеи Владимирской области
Егэ Русский 2022 Эссе
Дипломная работа по теме Причины возникновения тревожности у детей младшего школьного возраста
Пригов Стихи Малое Собрание Сочинений
Реферат: Расчет выпарного аппарата
Контрольная работа: Финансирование материального производства. Бюджетный контроль
Курсовая работа по теме Анализ наследования количественных признаков у гибридов гороха
Сочинение На Тему Чему Учит Пьеса Разбойники
Уход за ногтями - Безопасность жизнедеятельности и охрана труда презентация
Голкошкірі, напівхордові й палеозоологія хребетних - Биология и естествознание реферат
Анатомия и физиология мужской репродуктивной системы - Биология и естествознание презентация