Исследование бактерий по почвенному профилю дерновой альфегумусовой глеевой почвы - Биология и естествознание курсовая работа

Главная

Биология и естествознание
Исследование бактерий по почвенному профилю дерновой альфегумусовой глеевой почвы

Объект исследования и подготовка образцов почв к микробиологическому исследованию. Определение общей численности сапротрофных и олиготрофных бактерий в 5 горизонтах почвенного профиля дерновой почвы путем прямого счета по методу Виноградского-Брида.


посмотреть текст работы


скачать работу можно здесь


полная информация о работе


весь список подобных работ


Нужна помощь с учёбой? Наши эксперты готовы помочь!
Нажимая на кнопку, вы соглашаетесь с
политикой обработки персональных данных

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
1 Материалы и методы эмпирического исследования
1.1 Объект исследования и подготовка образцов почв к микробиологическому исследованию
1.2 Определение общей численности бактерий в почве
1.3 Определение численности сапротрофов и олиготрофов
2 Результаты и обсуждение исследования
Список использованных источников и литературы
Почва является основным депо разнообразных микроорганизмов на Земле [1;10]. Известно, что 60-90 % биомассы Земли представлено микроорганизмами, населяющими, главным образом почву [2], причем их численность в почве, по сравнению с другими природными средами, выше на несколько порядков [3].
Микроорганизмы распределяются по всему почвенному профилю вплоть до подстилающей породы [1;10]. Значительный практический и теоретический интерес представляет вопрос о том, как изменяется численность микроорганизмов по почвенному профилю, а также динамка численности микроорганизмов в нижнем почвенном горизонте в силу новизны самой проблемы. Особенно это касается недостаточно исследованных почв, имеющих в своем профиле оглеенные горизонты.
В анаэробных условиях при участии гетеротрофных бактерий, использующих органическое вещество, при постоянном или периодическом увлажнении идет один из интересных почвообразовательных процессов - глееобразование [2;8]. Этот процесс сопровождается восстановлением Fe(III) до Fe(II) и выносом Fe(II)-соединений в нижние горизонты почвенного профиля. Глееобразование практически всюду может происходить в результате антропогенной деятельности, если она приводит к переувлажнению почв.
В условиях застойно-промывного режима в результате глееобразования происходит максимальный вынос не только железа, но и других металлов - марганца, алюминия, кальция, магния [8;9]. Изучение особенностей микроорганизмов глеевых почв весьма актуально, так как при антропогенном воздействии на почвенный покров, в том числе при загрязнении почвы нефтью и нефтепродуктами, подобные почвы встречаются практически повсеместно. В Ярославской области почвы с различной степенью оглеения занимают около 18,3 %, что составляет 662,5 га земель [8].
Почвенные микроскопические грибы и бактерии являются практически единственными деструкторами органического вещества, поступающего в почву в виде растительного опада, мертвых животных, а также органических ксенобиотиков [4;9]. Важным микробиологическим показателем состояния почвы является соотношение численности бактерий двух физиологических групп, которые входят в функциональную структуру почвы: сапротрофов и олиготрофов [2;3]. Сапротрофы разлагают разнообразные органические соединения в значительной концентрации, попадающие в почву. Олиготрофы способны ассимилировать органические соединения в условиях их низкой концентрации, при этом они разлагают остаточные количества органических соединений, «рассеивающиеся» в почве при деятельности сапротрофов и автохтонных микроорганизмов, разлагающих почвенный гумус [1;3].
Целью работы было изучение динамики численности бактерий по почвенному профилю дерновой альфегумусовой глеевой почвы.
Для решения данной цели были поставлены следующие задачи :
1. Определить общую численность бактерий в 5 горизонтах почвенного профиля дерновой альфегумусовой глеевой почвы путем прямого счета по методу Виноградского-Брида.
2. Определить численность сапротрофных бактерий в каждом горизонте исследуемой почвы.
3. Определить численность олиготрофных бактерий в каждом горизонте исследуемой почвы.
4. Проанализировать полученные данные по общей численности, численности сапротрофов и численности олиготрофов.
1 Материалы и методы исследования
1.1 Объект исследования и подготовка образцов почвы
Объектом исследования служили пять образцов дерновой альфегумусовой глеевой почвы, отобранной в 5 км от поселка Дорожный Ярославского района Ярославской области. Охарактеризуем горизонты по мере увеличения глубины их залегания:
1. почвенный образец взят из темногумусового горизонта почвенного разреза. Глубина 7 - 12 см, цвет темно-серый, структура зернистая, наблюдается обилие мелких корней;
2. образец взят из горизонта темногумусового с признаками оглеения почвенного разреза. Глубина 12 - 16 см, цвет темно-серый, наблюдаются мелкие серые, рыжие и сизые пятна, в качестве включений представлены мелкие корни, механический состав определяется как среднесуглинистый;
3. образец взят из светлогумусового горизонта почвенного разреза. Глубина 16 - 23 см, цвет серый, наблюдаются рыжие и сизые пятна, механический состав определяется как среднесуглинистый, структура зернисто-комковатая, в качестве включений представлены мелкие корни;
4. образец взят из иллювиально-гумусово-железистого горизонта почвенного разреза. Глубина 25 - 45 см, преобладающий цвет светло-бурый с многочисленными охристыми, сизыми и голубыми затеками и пятнами; до глубины 45 см заметны затеки гумусового вещества; горизонт плотного сложения, сильно увлажнен; механический состав определяется как легкоглинистый;
5. образец взят из глеевого горизонта почвенного разреза. Глубина 45 - 70 см, цвет темно-серый, присутствуют кирпично-красные включения; горизонт более уплотнен, с глубины 70 см просачивается вода.
Подготовку почвенных образцов проводили согласно существующим рекомендациям [7].
1. Почву высыпали на сухое стекло, тщательно перемешивали и раскладывали ровным слоем. Пользуясь пинцетом, удаляли мелкие корешки и другие посторонние включения. Из разных мест рассыпанной почвы отбирали небольшие порции и взвешивали на технических весах по 1 г почвы из каждого горизонта.
2. Для разрушения почвенных агрегатов и десорбции клеток микроорганизмов с почвенных частиц, каждую навеску почвы вносили в отдельную колбу, содержащую 100 мл стерильного физиологического раствора (0,5% раствор хлорида натрия). Колбы встряхивали на качалке в течение 30 минут.
1.2 Определение общей численности бактерий в почве
Общее количество бактерий в почве учитывали прямым счетом на фиксированных окрашенных мазках (метод Виноградского-Брида) [6;7].
1. Пять предметных стекол обезжиривали и на каждом обводили карандашом по стеклу квадрат со стороной 15 мм.
2. Бактериальную суспензию объемом 0,1 мл из соответствующей колбы наносили на стекло и равномерно распределяли по площади квадрата.
3. Препараты подсушивали на воздухе, фиксировали в пламени спиртовки (проносили над пламенем 2 - 3 раза) и окрашивали 2 минуты фуксином. Краситель сливали, препарат промывали и высушивали между полосками фильтровальной бумаги.
4. Подсчитывали количество клеток, используя световой микроскоп марки «Биолам» с масляной иммерсионной системой при увеличении 10Ч1,0Ч100.
Для прямого счета микробных клеток вставляли в окуляр микроскопа сеточку Гаженко, 9 маленьких квадратиков которой составляют поле зрения. Просматривали 15 полей зрения.
Общую численность бактерий в 1 г почвы (N общ. ) определяли по формуле:
N общ. = z Ч s Ч v Ч 100 [кл/г], где
S - общая площадь окрашенного на стекле препарата (225 мм 2 );
Уn i - сумма подсчитанных под микроскопом микробных клеток;
z - количество просмотренных полей зрения (15);
s - площадь одного поля зрения (1089 Ч 10 -6 мм 2 );
v - объем образца воды, затраченный на приготовление окрашенного препарата (0,1 мл);
100 - разведение первоначального образца почвы в 100 раз.
Опыт проводили в двухкратной повторности, чтобы рассчитать доверительный интервал.
1.3 Определение численности сапротрофов и олиготрофов
Определение количества клеток сапротрофов (N сапр. ) проводили высевом на жидкую питательную среду - мясо-пептонный бульон (МПБ) [6]. Для приготовления МПБ использовали стандартную питательную среду (ИЛО «Питательные среды»). Состав МПБ, г/л: панкреатический гидролизат кильки - 17,9; NaCl - 7,7 ± 0,3; вода дистиллированная - 1000 мл. Среду стерилизовали автоклавированием 20 мин при 1 атм. Численность определяли при помощи метода наиболее вероятного числа (НВЧ) с использованием таблиц Мак-Креди [7]. Готовили ряд предельных десятикратных разведений 1 г почвы. Для посевов использовали разведения от 10 -1 до 10 - 7 . Количество посевного материала везде составляло 1 мл, посев осуществляли в трехкратной повторности. Инкубацию проводили в термостате при 28 0 С в течение 7 сут. После инкубации регистрировали рост бактерий, используя различные показатели: помутнение среды, образование пленки [6;7].
Для выделения олиготрофов использовали среду М2 следующего состава [11]: Na 2 HPO 4 - 0,8 г; KH 2 PO 4 - 0,5 г; NH 4 Cl - 0,5 г; MgSO 4 - 0,2 г; CaCl 2 - 0,1 г; FeSO 4 Ч7H 2 O -15 мг; дрожжевой экстракт - 0,1 г ; пептон - 0,2 г; агар - 15 г; глюкоза - 0,2 г; вода дистиллированная - 1000 мл. Среду стерилизовали автоклавированием 20 мин при 1 атм. Численность олиготрофов (N олиг. ) определяли методом высева по Коху [7]. Готовили ряд предельных десятикратных разведений 1 г почвы в дистиллированной воде: от 10 -1 до 10 -9 . По 1 мл суспензии из каждого разведения вносили в три параллельные чашки Петри. Все чашки заливали расплавленной средой. Посевы инкубировали 14 сут., а затем подсчитывали количество колоний, выросших на каждой чашке и среднее число колоний, выросших из одного разведения. При этом определяли значимость различий двух повторных определений по критерию ч 2 , рассчитываемому по формуле [7]:
где п i - число колоний, выросших на первой и второй чашках, засеянных из одного разведения; п - их среднее значение.
Различие считается значимым при ч 2 не менее 3,841. Пересчет числа выросших колоний ( п ) на численность бактерий соответствующей группы ( N ) производили исходя из предположения, что одной колониеобразующей единицей (КОЕ) является отдельная микробная клетка. Для этого использовали формулу:
где п - среднее число колоний на чашках Петри, засеянных из одного разведения; r - величина разведения; v - объем образца, посеянного на чашку (мл).
Кроме того, рассчитывали отношение N сапр. к N общ. для каждого горизонта.
2 Результаты и обсуждение исследования
Результаты начального этапа микробиологического исследования почвенных образцов представлены в приложении 2 и на рисунке 1.
Общая численность бактерий в почвенном профиле
дерновой альфегумусовой глеевой почвы
Горизонты (расположены от верхнего к нижнему)
Численность бактерий, кл/г сухой почвы
Рис. 1. Динамика общей численности бактерий в почвенном профиле дерновой альфегумусовой глеевой почв ы . N - численность бактерий
Как видно из табл. 1 и рис. 1, максимальное значение общей численности бактерий (N общ. ) - 6,2Ч10 9 кл/г - наблюдали во втором горизонте, по сравнению с остальными четырьмя горизонтами. Этот факт можно объяснить тем, что два верхних горизонта исследуемой почвы обладают хорошей проницаемостью для воды и поступающего с ней органического вещества. Третий горизонт почвенного профиля уже более уплотнен, поэтому органическое вещество, накапливаясь во втором горизонте, является фактором, стимулирующим развитие в нем почвенных микроорганизмов.
Данные табл. 1 показывают, что N общ. достоверно снижалась с увеличением глубины залегания почвенного горизонта: от второго к пятому, самому нижнему. Полученный результат согласуется с тем фактом, что содержание органического вещества, необходимого для развития почвенных микроорганизмов, также снижается с увеличением глубины залегания горизонта. При переходе от верхнего горизонта к нижележащим изменяются также окислительно-восстановительные условия, pH и др.
Порядок величин N общ. в каждом горизонте был одинаков - 10 9 кл/г. По-видимому, в верхних более рыхлых горизонтах, куда поступает достаточное количество кислорода с поверхности, создались оптимальные условия для развития аэробных микроорганизмов. В нижележащих горизонтах содержание кислорода минимально, и прежний порядок значения N общ. объясняется активным развитием анаэробов.
Численность сапротрофных бактерий (N сапр. ) уменьшалась от первого горизонта к третьему, причем резкое снижение численности - более чем в 6 раз - было отмечено при переходе от первого ко второму горизонту (рис. 2А). N сапр. (таб.2) в четвертом горизонте - 4,5Ч10 4 кл/г - была незначительно выше, по сравнению с третьим - 2,0Ч10 4 кл/г, - тогда как в пятом она опять понижалось до значения, отмеченного в третьем горизонте (рис. 2А). Как показано на рис. 2Б, численность олиготрофных бактерий (N олиг. ) последовательно снижалась с увеличением глубины залегания почвенного горизонта от 9,5Ч10 7 в первом до 1,5Ч10 7 кл/г в пятом горизонте (таб.2).
Рис. 2. Численность сапротрофов (А) и олиготрофов (Б) в почвенном профиле дерновой альфегумусовой глеевой почвы . N - численность бактерий ( кл/г почвы)
Численность сапротрофных и олиготрофных бактерий в почвенном профиле дерновой альфегумусовой глеевой почвы
В общем, N сапр. находилась на уровне 10 5 кл/г в первом, и 10 4 кл/г в остальных горизонтах (прил. 3). N олиг. соответствовала 10 7 кл/г в каждом горизонте профиля. Таким образом, N олиг. была меньше, чем N сапр. : в первом горизонте в 100, а в остальных четырех - в 1000 раз. Выявленное значительное преобладание олиготрофов над сапротрофами свидетельствует о том, что в исследованной почве низкое содержание легкоразлагаемой органики [2], следовательно, данная почва не подвергалась антропогенному загрязнению. Бактерии функционируют в ней за счет органического вещества самой почвы. Сапротрофы, развивающиеся в условиях высокой концентрации органики [3;4], уже переработали ее большую часть. В настоящее время в исследованной почве доминируют олиготрофы, которым для существования необходимо низкое содержание органики в среде [2;4].
Интересным является факт, что для горизонтов с четвертого по пятый отмечаются признаки оглеения почвы - сизые и голубые пятна и затеки. В настоящее время известны три совокупные причины глеегенеза [5]: 1) высокая влажность; 2) наличие легкоразлагаемого органического вещества в избыточном количестве; 3) жизнедеятельность гетеротрофных микроорганизмов. Согласно нашим результатам, процесс глеегенеза идет в исследуемой почве при доминировании в микробоценозе олиготрофных бактерий, а, следовательно, в отсутствие избытка органического вещества.
Отношение N сапр. к N общ. составило величины порядка 10 -4 - 10 -5 (табл.3), что свидетельствует о климаксном состоянии микробоценоза [3] и о доминировании бактерий, которые получают необходимые питательные вещества и энергию за счет использования трудноразлагаемых органических веществ почвы в течение длительного времени.
Отношение общей численности к численности сапротрофных бактерий в почвенном профиле дерновой альфегумусовой глеевой почвы
Горизонты (расположены от верхнего к нижнему)
Примечание: N сапр. - численность сапротрофных бактерий (кл/г); N общ. - общая численность бактерий (кл/г).
1. Общая численность бактерий снижается с глубиной залегания почвенного горизонта, максимальное значение - 6,2Ч10 9 кл/г - наблюдается во втором горизонте за счет того, что два верхних горизонта исследуемой почвы обладают хорошей проницаемостью для воды и поступающего с ней органического вещества.
2. Количество сапротрофных бактерий уменьшалось от первого горизонта к третьему - от 2,5Ч10 5 до 1,4Ч10 4 кл/г, - причем резкое снижение численности - более чем в 6 раз (от 2,5Ч10 5 до 4,0Ч10 4 кл/г) - было отмечено при переходе от первого ко второму горизонту.
3. Численность олиготрофных бактерий последовательно снижалась с увеличением глубины залегания почвенного горизонта от 9,5Ч10 7 в первом до 1,5Ч10 7 кл/г в пятом горизонтах.
4. Отношение численности олиготрофных бактерий к сапротрофным для первого горизонта составляет величину порядка 10 2 , а в остальных четырех - 10 3 , что свидетельствует о значительном преобладании олиготрофов над сапротрофами.
5. Отношение численности сапротрофных бактерий к общей численности бактерий составляет величины порядка 10 -4 - 10 -5 , что свидетельствует о климаксном состоянии микробоценоза и о доминировании бактерий, жизнедеятельность которых связана с использованием трудноразлагаемых органических веществ почвы.
6. Согласно нашим результатам, процесс глеегенеза идет в исследуемой почве при доминировании в микробоценозе олиготрофных бактерий, а, следовательно, в отсутствие избытка органического вещества.
Список использованных источников и литературы
1. Бабьева И.П. Биология почв / И.П. Бабьева, Г.М. Зенова. - М.: МГУ, 1989. - 336 с.
2. Емцев В.Т. Микробиология / В.Т. Емцев, Е.Н. Мишустин. - М.: Дрофа, 2005. - 445 с.
3. Добровольская Т.Г. О показателях структуры микробных сообществ / Т.Г. Добровольская, И.Ю. Чернов, Д.Г. Звягинцев // Микробиология. - 1997. - Т.66. - №3. - С. 408-414.
4. Заварзин Г.А. Введение в природоведческую микробиологию / Г.А. Заварзин, Н.Т. Колотилова. - М.: Книжный дом «Университет», 2001. - 256 с.
5. Зайдельман, Ф.Р. Процесс глееобразования и его роль в формировании почв / Ф.Р. Зайдельман. - М.: МГУ, 1998. - 316 с.
6. Кузнецов С.И. Методы изучения водных микроорганизмов / С.И. Кузнецов, Г.А. Дубинина. - М.: Наука, 1989. - 288 с.
7. Практикум по микробиологии / Под ред. Н.С. Егорова. - М: МГУ, 1976. - 307 с.
8. Соединения железа, алюминия, кремния и марганца в почвах лесных экосистем таежной зоны / М. Мурашкина, Г. Копцик, и др. // Почвоведение. - 2004. - № 1. - С. 40- 49.
9. Умаров М.М. Экология и почвы / М.М. Умаров. Избранные лекции 1-7 школ, М.: Пущино, 1998, 15-21 с.
10. Экология микроорганизмов: учебник / А. И. Нетрусов, Е.А. Бонч - Осмоловская, и др. - М.: Издательский центр «Академия», 2004. - 272с.
11. Hottes A.K. Transcriptional profiling of Caulobacter crescentus during growth on complex and minimal media / A.K. Hottes, M. McEwen, D. Yang et al. // J. Bacteriol. - 2004. - V. 186. - №5. - P. 1448-1461.
Слоистые каменные структуры (строматолиты) - результат жизнедеятельности бактерий как древнейшей группы организмов. Изучение бактерий, форма и строение бактерий, их размеры и распространение. Классификация бактерий по способу питания, размножение. презентация [661,9 K], добавлен 14.10.2011
Роль бактерий в природе. Clostridium Botulinum как спорообразующая палочка, продуцирующая ботулизм. Негативное влияние сапротрофных бактерий на пищевые продукты. Болезнетворные бактерии растений. Вклад Коха в развитие микробиологии и лечение туберкулеза. презентация [7,6 M], добавлен 07.01.2014
Анализ закономерностей динамики численности отдельных физиологических групп почвенных микроорганизмов в зависимости от антропогенной нагрузки на примере серой лесной почвы и чернозема выщелоченного. Определение соотношения аэробных и анаэробных бактерий. курсовая работа [452,1 K], добавлен 23.01.2011
Определение удельной скорости роста популяции бактерий. Решение дифференциального уравнения первого порядка. Нахождение общего и частного решения, постоянной С. Подставка известных чисел в уравнение. Расчет численности популяции бактерий через 4 часа. презентация [4,7 M], добавлен 23.03.2014
Питание бактерий. Способы поступления питательных веществ в клетку. Классификация бактерий по типам питания, источникам энергии и электронам. Пропионовокислое брожение, его основные участники, их характеристика, использование в народном хозяйстве. контрольная работа [28,8 K], добавлен 29.11.2010
Генетическая система бактерий. Полимеразная цепная реакция. Применение генетических методов в диагностике инфекционных заболеваний. Метод молекулярной гибридизации. Особенности генетики вирусов. Системы репарации бактерий. Взаимодействие вирусных геномов. презентация [2,6 M], добавлен 13.09.2015
Прокариоты - доядерные организмы, не обладающие типичным клеточным ядром и хромосомным аппаратом. История открытия и строение бактерий. Экологические функции бактерий. Бактерии как возбудители многих опасных заболеваний. Значение бактерий в природе. презентация [5,4 M], добавлен 04.09.2011
Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д. PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах. Рекомендуем скачать работу .

© 2000 — 2021



Исследование бактерий по почвенному профилю дерновой альфегумусовой глеевой почвы курсовая работа. Биология и естествознание.
Современные Методы Интенсивной Терапии Постреанимационной Болезни Реферат
Реферат: Цветные металлы и их сплавы
Реферат: Nick Carraway Essay Research Paper Nick Character
Дипломная работа по теме Ассортимент хлебобулочных изделий
Реферат по теме Отодектоз
Реферат На Тему Построение Коммуникации При Позиционировании Бренда В Регионах
Эссе На Тему Общество И Культура
Контрольная Работа По Всем Типам Червей
Реферат: Гигиена беременности. Аборт и его последствия
Сочинение Комедия Горе От Ума 9 Класс
Дипломная работа по теме Значение математических развлечений при ознакомлении детей дошкольного возраста с формой предметов и геометрическими фигурами
Курсовая работа по теме Проектирование технологического процесса изготовления детали "Подставка"
Контрольная работа: Национализм в политической теории и в политической практике. Скачать бесплатно и без регистрации
Курсовая Работа На Тему Сырье И Фитопрепараты Для Лечения Сердечнососудистых Заболеваний
Реферат: Судебная система России 2
Реферат: Семейная социология. Скачать бесплатно и без регистрации
Контрольная работа: Раскол православия. Никонианство, как духовная основа прозападных преобразований в России. Скачать бесплатно и без регистрации
Сочинение На Тему Настоящее
Детская Неблагодарность Сочинение Пример Из Жизни
Дневник Практики Реабилитация
Биогеохимическая деятельность микроорганизмов - Биология и естествознание курсовая работа
Гормоны. Классификация и механизм действия гормонов - Биология и естествознание презентация
Факторы среды обитания человека - Безопасность жизнедеятельности и охрана труда реферат