Дуйсбург бесплатные пробы Экстази, скорость

≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈

Гарантии! Качество! Отзывы!

Проверенный магазин!

≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈

▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼

Наши контакты (Telegram):☎✍

>>>✅(НАПИСАТЬ ОПЕРАТОРУ В ТЕЛЕГРАМ)✅<<<

▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲

≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡

⛔ ВНИМАНИЕ!

📍 ✅✅✅ Используйте ВПН, если ссылка не открваеться !!!

📍 В Телеграм переходить только по ССЫЛКЕ что ВЫШЕ! В поиске НАС НЕТ там только фейки!

📍 Гарантии и Отзывы!

📍 Работаем честно!

≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡

Дуйсбург бесплатные пробы Экстази, скорость

Подготовка и обработка засохшей крови пятна DBS для их окончательного анализа по-прежнему плохо стандартизированы для большинства диагностических приложений. Чтобы преодолеть этот недостаток, всеобъемлющий поэтапный протокол предложил и впоследствии оценивается с точки зрения ее эффективности для обнаружения маркеров вирусных инфекций. Идея сбора крови на карте бумаги и впоследствии с помощью засохшей крови пятна DBS для диагностических целей, возникли столетие назад. С тех пор DBS тестирования для десятилетий остается преимущественно ориентированным на диагностике инфекционных заболеваний, особенно в условиях ограниченных ресурсов или систематического скрининг новорожденных для унаследованных метаболических расстройств и только недавно имеют целый ряд начали появляться новые и инновационные DBS приложений. На протяжении многих лет, предварительно аналитических переменных только ненадлежащим образом рассматривались в области тестирования DBS и даже сегодня, за исключением новорожденных скрининг, весь предварительно аналитический этап, который включает в себя подготовку и обработку DBS для их окончательный анализ не были стандартизированы. Учитывая вышесказанное, всеобъемлющий шаг за шагом протокол, который охватывает Аль основных этапов, предлагается, то есть, сбор крови; подготовка пятна крови; Сушка пятна крови; Хранение и транспортировка DBS; Элюирующий DBS и, наконец, анализ элюаты DBS. В качестве второго шага протокол был использован во время экспериментального исследования, которое проводилось на активных потребителей наркотиков в городах Германии Берлин и Эссен. Идея использования крови, собранные на карте бумажные из целлюлозы приписывается Ивар христианских Bang , отец современной клинической микроанализ 1, 2. В году Bang определяется глюкозы из элюаты засохшей крови пятна DBS 3 и, позднее, также исполнил азота измерений методом Кьельдаля с эта Бумага фильтровальная техника 2. Впоследствии несколько следователи сообщили об использовании БД для серологических тестирования для диагностики сифилиса 2. Как рано как в , Чепмен обобщены преимущества DBS тестирования когда он особенно подчеркнул четырех пунктов, которые по-прежнему актуальны сегодня: 1 по сравнению с обычными венепункции, требуется меньше объем крови, и этот факт был самым важным в педиатрии Диагностика; 2 крови коллекции простых, не инвазивных и недорогой; 3 риск бактериального загрязнения или гемолиз является минимальным; и 4 DBS могут быть сохранены для длительных периодов с почти не ухудшение аналитов 2, 4. Помимо его использования в тестирование на сифилис далее раннего применения метода DBS включали, например , обнаружение антител против кори, эпидемического паротита, полиовирусом, вирус парагриппа и респираторно-синцитиальный вирус RSV в году 2 , Идентификация шигеллы в фекалиях сушат на фильтровальную бумагу и отправлены по почте из Индонезии в Лейден в Нидерландах, а также выявления антител к Schistosoma в DBS в эндемичных районах и проанализированы более чем на три месяца позже 5. В году пятьдесят лет спустя после взрыва в оригинальной коммуникации 2, 6 , Гатри наконец опубликовал его известный метод диагностики фенилкетонурия из БД, получены на пятке укол от новорожденных 7, 8. Хотя с того времени DBS были расценены как часто применяется метод для сбора, хранения, транспортировки и анализа различных жидкостей человеческого организма 5 , их использование в диагностике по-прежнему преимущественно сосредоточены на диагноз инфекции, особенно в условиях ограниченных ресурсов и систематического скрининга новорожденных для унаследованных метаболических расстройств на протяжении десятилетий 9, С года однако, целый ряд новых и новаторских DBS приложений начали возникать. Это привело к почти экспоненциальное увеличение числа соответствующих научных публикаций по DBS от 50 до почти ежегодно в настоящее время. Среди новых приложений в таких разнообразных областях, как токсико - и фармакокинетические исследования, метаболические профили, терапевтического мониторинга лекарственных препаратов, судебная токсикология или контроля загрязнения окружающей среды 10, Испытания БД таким образом, сделала триумфальное шествие через клинической лабораторной диагностики в течение последних лет 2. Как в клинической химии 12 однако, в марте этого года предварительно аналитических переменных не рассматривались должным образом на протяжении многих лет. Действительно даже сегодня, после таких выдающихся мероприятий, как CDC в фильтровальную бумагу оценки проекта 13 или разработке национального стандарта для сбора крови на фильтровальной бумаге в рамках новорожденных, скрининг 14 , предварительно аналитический этап по-прежнему во многом недооценивается в большинстве других областей, в которых DBS тестирование является прикладной 5, Учитывая вышесказанное, для подготовки и обработки DBS в следующем сообщении предлагается всеобъемлющий поэтапный протокол для использования в иммуноанализа и молекулярных методов, которая охватывает все основные шаги,: 1 Сбор крови; 2 подготовка пятна крови; 3 высыхания пятна крови; 4 для хранения и транспортировки; 5 элюции DBS; и наконец 6 анализ элюаты DBS. Поскольку протокол предназначен для использования в медицинской диагностике, его применение должно следовать принципам Хельсинкской декларации Для первой части результатов, представленных в этой связи, как отдельное соглашение пациентами и одобрения Комитета по этике казалось необязательным по двум причинам: 1 «при поступлении» в больницу Университета Эссен, «каждый пациент предоставляет письменное согласие все необходимые биохимические, бактериологического и вирусологических расследования. Таким образом ни один из образцов была собрана специально для целей исследования, была выполнена не одного дополнительного венепункции и ни один из материалов был протестирован для любых параметров, кроме тех, которые требуются врачи в ходе нормального Диагностические работы вверх. Примечание: Обработка пятна крови может быть прервано после высыхания. Фильтр карты теперь может быть хранимой , Графический обзор протокола предлагается в этой связи для подготовки и обработки засохшей крови пятен использоваться в иммуноанализа и молекулярных методов. Целом венозной крови и капиллярной крови, полученные путем венепункции или прокол кожи, стрельчатые A может служить образцы для анализа пятно засохшей крови. При сушке пятна крови является полным и хранения необходимо, фильтр карты могут быть упакованы в газа непроницаемый zipper мешки, содержащие 1 — 2 Влагопоглащающие пакетики E. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры. Такой подход без тщательной оптимизации элюции условий для каждого единого аналита представляется неизбежным потому что пропускная способность довольно высокий образец ожидалось в сравнительно короткое время в ходе предстоящей поля исследования «наркотики и хронический Инфекционные болезни» «DRUCK исследование». Все измерения придерживаться рекомендаций производителя в ходе анализа DBS, но пришлось изменить в отношении определения HBsAg и анти HBs компенсировать эффект гемолиз или в результате разрежения. Рисунок 2. Нет не специфика был записан в ходе тестирования для любой из семи аналитов DBS. Когда на наличие HBsAg, т. Антител анти-HBc успешно были обнаружены в из i. Двадцать два из 28 образцов, которые не были обнаружены путем измерений, возникла из Co-зараженных ВИЧ лиц. Аналогичные замечания верно для определения антител анти HBs. Антитела анти-HCV свидетельствуют либо инфекции, острые или хронические или решены. Только четыре i. Чтобы проверить изложенные протокол для подготовки и обработки DBS в полевых условиях, он был использован в тесном сотрудничестве с института Роберта Коха- Берлин, Германия во время экспериментального этапа исследования «Наркотики и хронические инфекционные заболевания», который был проведено активных потребителей наркотиков в городах Германии Берлин и Эссен Все участников поступил мужчин и женщин прошли забора капиллярной крови как подробно описывается в разделах 2. Кроме того 15 участников были позитивными для анти HBs статус после вакцинации и восемь были признаны позитивным для анти HBc одиночку. Двадцать пять из лица оказались позитивными на анти-ВИЧ. Девятнадцать из инфекций были уже известны, и 24 из этих лиц были сочетанной с ВГС. Таблица 1: Результаты, полученные из DBS, которые были подготовлены и обработаны от всей венозной крови после протокол, предложенных в этой связи, по сравнению с выводами в образцах сыворотки спаренных как ссылка. DBS были использованы для лет 2 но, удивительно, есть еще нет общего консенсуса об их подготовке и обработке. На сегодняшний день, достаточно стандартизации этого важного предварительного аналитического этапа только был достигнут в области обследования новорожденных 14 , тогда как для всех других приложений DBS тестирование 5, 16, 23 существует целый ряд различных протоколов. Для преодоления этой замечательной неоднородности, всеобъемлющий шаг за шагом инструкции для подготовки и обработки DBS использоваться в иммуноанализа и молекулярных методов представлена в этой связи и оценивается с точки зрения ее эффективности для обнаружения маркеров инфекции ВГВ, ВГС и ВИЧ. После обсуждения прежде всего акцент на различные этапы предлагаемый протокол. В истории DBS тестирования многих различных фильтровальная бумага карты были используется 2 , но сегодня только два коммерческих источников утвержденных FDA как класс II медицинские приборы для сбора крови 5, Не удивительно, Masciotra и коллегами 29 поэтому обнаружено РНК ВИЧ-1 одинаково хорошо с качественного анализа после элюции от крови коллекции карт из разных источников. Однако когда необходима точная количественная оценка аналита, источник исходный вариант больше не может быть незначительным и более изощренные методы, например , перфорированные DBS PDBS как метод для microsampling 30 или подготовки сушеная сыворотка пятен DSS 31 , возможно, придется применять вместо обычных DBS тестирования Поскольку только небольшое количество крови используются для тестирования баз данных одна капля капиллярной крови состоит из примерно 50 мкл 5, 16 , колебания в объеме образца имеют решающее значение и, по общему признанию, по крайней мере некоторые из расхождений между серологических результатов и участника самостоятельно HBV и HCV статус, записанный во время пилотирование «Исследование DRUCK» объясняются этой переменной. Самым важным фактором для минимизации объема образца «колебания», несомненно, правильная техника сбора капиллярной крови, что может быть достигнуто только путем тщательного и непрерывной подготовки технического персонала Кроме того, в качестве меры контроля качества все лаборатории, работа с БД должен уже инициировали процедуры для выявления и впоследствии исключая DBS образцы, которые должны рассматриваться как неудовлетворительное или недопустимый Исследования, проведенные главным образом в контексте ВИЧ 32 и 33 обследования новорожденных показали, что высокая влажность может привести к деградации аналитов, но до сих пор не достигнут консенсус в вопросе о как долго DBS должен быть воздушно-сухой. Напротив исследование, проведенное тридцать лет позже 36 испытания реплицирует HBV-положительных образца, и авторы нашли что анти HBc, а антител анти HBs были стабильными до дней на RT, тогда как HBsAg при тех же условиях стала ложно отрицательные уже после 63 дней. Замечания на снижение концентрации РНК ВГС в БД при различных условиях хранения варьируются от без существенного изменения в РТ на срок до одного года 42 десятикратное изменение после четырех недель при температуре Принимая этот довольно противоречивые данные о стабильности HBV и HCV антигены, нуклеиновых кислот и антител в расчет, представляется разумным втягивается в предлагаемом протоколе к консенсусу, который был определен ранее для хранения образцов DBS использоваться для ВИЧ тестирование 15, 30 : для краткосрочных осаждения до двух недель антигены, нуклеиновой кислоты вируса и антител рассматриваются как стабильной на RT, тогда как на замороженных условий оптимального хранения для более длительных периодов. Как правило, три параметра должны учитываться при проектировании элюции протокол: 1 Элюирующий буфер; 2 продолжительность и температура элюции; и 3 объем элюции В подавляющем большинстве всех соответствующих публикаций фосфат амортизированное saline PBS был использован для элюирующие DBS, и большинство авторов добавил белка, например , бычьим сывороточным альбумином БСА или Tween, ПАВ, с целью улучшения анализа сигнала путем стабилизации белки, как они идут в раствор и одновременно блокировки неспецифической привязки сайтов Лишь в нескольких докладах, которые непосредственно сравнить различные элюции буферов в контексте DBS тестирования, доступны. Виллар и др. Поскольку риск деградации образца является чрезвычайно низким, в первые часы после подготовки БД см. Этот подход имеет то преимущество, что образцы перфорированные из предыдущих день могут быть непосредственно переданы рутинной диагностики рано следующим утром Объем буфера должны быть адаптированы к минимальным требованиям соответствующих анализов, используется для последующего анализа с целью снизить коэффициент разрежения. Однако тщательной оптимизации элюции условий для каждого единого аналита не удалось в предыдущей оценке, потому что высокая производительность гарантируется в сравнительно короткое время во время «DRUCK исследование» Следовательно довольно неблагоприятных объем мкл буфера на основе PBS была использована для завершения процесса весь элюции для всех параметров в двух отдельных операций. Вместе взятые, всеобъемлющий шаг за шагом протокол, представленный в этой связи оказался осуществимым и удобный инструмент для подготовки и обработки DBS и таким образом, можно надежно в диагностической вирусологии. Это позволяет подходы с использованием автоматизации 54 и из-за его отличные ходовые характеристики имеет потенциал, чтобы служить своего рода учредительств камень для будущего консенсуса общепринятых протокола в глобальной области DBS тестирования в лаборатории медицины. В прошлом RSR получил гонорар для доставки лекции и финансовую поддержку для его научной работы от Abbott диагностики. НГ и ом заявляют, что они имеют не конфликтующие интересы. Авторы с благодарностью признаем плодотворное сотрудничество в рамках эксперимента в исследовании «Наркотики и хронические инфекционные заболевания» «DRUCK исследование» с U. Маркус, W. Цай, W. Чжан и р. Moyrer для принимая фотографии собраны в Рисунок 1 а также D. Whybrew, К. Они также выражают свою признательность за умелое технической помощи J. Акерман, э. Bayrambasi, U. Бюттнера, S. Dziubek, I. Jakobsche, б. Krellenberg, H. Krohn, P. Kusimski, A. Меткалф, J. Piejek, S. Саар, м. Шретер и K. Это исследование было частично поддерживается Грант немецкого министерства здравоохранения Национальный справочный центр для гепатита с. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr jove. You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions jove. Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login. You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free. To get started, a verification email has been sent to email institution. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your 'Spam' folder. Your access has now expired. Provide feedback to your librarian. If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team. Login processing JoVE Journal Biology. Примените жгут 4 — 6 дюймов выше предполагаемого прокол сайт раздуваться Вены. Руководство иглы в Вену пациента и, после того, как она находится в месте, аккуратно заполнить связанные крови трубки, который содержит ЭДТА как антикоагулянт. Как только завершится венепункции, выпуск жгут и снять иглу. Затем нажмите сухой марлевый тампон на сайте прокол, который впоследствии может быть проведен в месте повязкой. Прокола кожи рис. До прокола кожи пациент должен теплые руки. Палец является массируемую anterogradely обогащения, приток крови к в пункционная сайта. Прокол кожи путем однократного использования безопасности Ланцет. Палец должен проводиться в таком положении, что гравитация облегчает сбор крови на кончик пальца. Когда коллекция капиллярной крови методом прокола кожи является полным, повязку на кончик пальца. Подготовка пятна крови Подготовка из крови, собранные венепункции 15 Месте собраны анти коагулируют ЭДТА весь венозной крови на фильтр карты как можно скорее. Не готовить пятна засохшей крови, более чем на 24 часа после венепункции. Собрать всю информацию, необходимую для идентификации пациента на карточку фильтра. Одна карта должна быть заметили только с кровью одного человека. Наденьте перчатки одноразовые латекса. Аккуратно перевернуть пробирка 2 — 4 раза и впоследствии открыть пробку осторожно. Аспирационная 50 мкл целом венозной крови с помощью пипетки с одноразовый наконечник. Передачи крови в центр одного круга без касатьться фильтровальной бумаги непосредственно с кончика пипетки. Попробуйте полностью насыщают круг. Повторите эту процедуру, чтобы заполнить все требуемые круги карты. Подготовка из крови, собранные кожи пункции цифры 1B и 1 C , 23 Протрите первой капли крови с марлевой, потому что он может содержать избыточной ткани жидкости. Массаж палец снова, чтобы увеличить приток крови в месте прокола. Перевести следующие падение в один из кругов карточку фильтра не касаясь поверхности непосредственно с пальца. Позволит кровь, чтобы быть выдержаны в текстуру фильтра капиллярных сил только. Пусть следующее большое падение формы капиллярной крови на кончик пальца и собирают его в следующий круг. Продолжите эту процедуру, пока не будут заполнены все необходимые круги или останавливает поток крови. Не сжать или «молочный» палец чрезмерно если поток крови не достаточно, чтобы заполнить все требуемые круги карточку фильтра. Если поток крови останавливается место повязку на кончик пальца. Выполните второй прокол кожи на другой палец, если больше крови необходимо для рассмотрения. Когда процесс сушки является полным, пятна крови имеют равномерно темно коричневого цвета и не красный областях видны больше рис. Хранение и транспортировка засохшей крови пятна DBS Примечание: Обработка пятна крови может быть прервано после высыхания. Для хранения поставьте фильтр бумага карты в единый, газ непроницаемый молнию мешок, содержащий Влагопоглащающие пакетики для защиты от влаги Рисунок 1E образцы. При необходимости добавьте карту Индикатор влажности. Перевозка замороженных образцов DBS на сухой лед. Для фильтра карты изначально храниться при комнатной температуре используйте систему тройной упаковке, которая состоит из молнии пробе как внутренний контейнера ов , а также внутренний и внешний конверт. Нет содержания маркировки требуются на внешний конверт для отправки по почте, но символ международного биологической должны быть прикреплены к основной внутренний контейнер Исключите фильтр карты из дальнейшей обработки если осушитель пакеты или дополнительные влажность индикатор карты изменяется в розовый цвет. Передача всех ударил засохшей крови пятна от одного пациента один колодец ну пластины. Адаптировать объем дополнительного буфера минимальные соответствующие требованиям анализа используется для последующего анализа элюаты пятна засохшей крови. Повторите эти шаги для получения второй серии СПОТ элюаты засохшей крови для того, чтобы выполнять молекулярного анализа. На следующий день, пятна, почти свободный от крови и гемолитические supernatants создали Рисунок 1I. Передать эти элюаты microcentrifuge трубы. Затем при условии их центрифугированием на 2 мин на x g Рисунок 1J освободить supernatants от любого мусора, которые сформированы во время элюции рис. Расследовать элюаты маркеров вирус гепатита в, вирус гепатита С и ВИЧ-инфекции, используя имеющиеся наборы и строго следуйте указаниям соответствующих производителей рис. Оба были под противовирусное лечение и один из них был совместно инфицированы ВИЧ. Шесть человек показал серологических вывод «анти HBc один». Двадцать два из пациентов были сочетанной с ВИЧ. От «сопоставителей ГВ», 20 были оценены как «Анти HBs позитив только «DBS тестирования и, таким образом, были ошибочно классифицированы как «состояние после вакцинации». Play Video. Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account. Continue with Shibboleth or Forgot Password? Please enter your email address so we may send you a link to reset your password. You might already have access to this content! Please enter your Institution or Company email below to check. Please enter an institutional email address. Check access. Create Account. Forgot Password? Reset Password. Phone number. Request trial. Thank You! A JoVE representative will be in touch with you shortly. Waiting for verification email? Please click here to activate your free 2-hour trial. If you do not wish to begin your trial now, you can log back into JoVE at any time to begin. Enable Javascript for audio controls. Get cutting-edge science videos from J o VE sent straight to your inbox every month. We use cookies to enhance your experience on our website. Continue Learn more Close. Два больных с хронической инфекцией HBV. В сыворотке крови двадцать два пациентов был решен ВГВ.

Дуйсбург бесплатные пробы Экстази, скорость

Тила эль-Али цена на Кокаин, мефедрон

Дуйсбург бесплатные пробы Экстази, скорость