Цюрих бесплатные пробы Экстази, скорость

≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈

Гарантии! Качество! Отзывы!

Проверенный магазин!

≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈

▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼

Наши контакты (Telegram):☎✍

>>>✅(НАПИСАТЬ ОПЕРАТОРУ В ТЕЛЕГРАМ)✅<<<

▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲

≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡

⛔ ВНИМАНИЕ!

📍 ✅✅✅ Используйте ВПН, если ссылка не открваеться !!!

📍 В Телеграм переходить только по ССЫЛКЕ что ВЫШЕ! В поиске НАС НЕТ там только фейки!

📍 Гарантии и Отзывы!

📍 Работаем честно!

≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡

Цюрих бесплатные пробы Экстази, скорость

Несколько десятилетий назад плаценты человека считалось непроницаемый барьер между матерью и еще не родившегося ребенка. Однако открытие талидомида индуцированных врожденных дефектов и многие более поздние исследования впоследствии доказал обратное. На сегодняшний день некоторые вредные ксенобиотиков как никотин, героин, метадон или наркотиков, а также загрязнение окружающей среды были описаны для преодоления этого барьера. С ростом использования нанотехнологий, плацента, вероятно, вступают в контакт с новыми наночастицы либо случайно, в результате воздействия или умышленно в случае потенциального наномедицинские устройства. Данные экспериментов на животных не могут быть экстраполированы на людей, потому что плацента является наиболее видоспецифической органом млекопитающих 1. Таким образом, экс естественных условиях двойной рециркуляции перфузии плаценты человека, разработанная Panigel соавт. Здесь мы концентрируем внимание на экс естественных условиях двойной рециркуляции плаценты человека протокол перфузии и его дальнейшее развитие приобретать воспроизводимые результаты. Плаценты, полученной после информированного согласия матерей от несложных срока беременности кесарево доставки. Матери и плода сосуды интактного семядоли вводили канюлю и перфузии по крайней мере в течение пяти часов. В качестве модели частиц флуоресцентно меченых частиц полистирола с размерами 80 и нм были добавлены к материнской цепи. Экс естественных человеческих плацентарной перфузии модель является одной из немногих моделей, обеспечивающих надежную информацию отранспорта поведения ксенобиотиков на важный барьер ткани, которая обеспечивает интеллектуальный и клинических соответствующих данных. Плацента представляет собой сложный орган, который отвечает за обмен кислорода, углекислого газа, питательных веществ и отходов и в то же время в состоянии держать две цепи крови матери и растущего плода отделены друг от друга. Кроме того, он предотвращает отказ от ребенка по материнской иммунной системы и вырабатывает гормоны для поддержания беременности. Клеточный барьер образован цитотрофобласта клетки, которые сливаются и образуют истинно синцития без боковых клеточных мембран 4,5. Весь плаценты организована в несколько семядоли, которые содержат один плода ворсинок дерева и представляют собой один функциональный блок плаценты. Изучение плацентарного барьерной функции усилилась с открытием талидомид индуцированных пороков развития в х. По понятным причинам транслокации исследований с беременными женщинами не может быть выполнена. Следовательно, различные альтернативные модели были разработаны 6,7 экс естественных условиях человеческого плацентарного модели перфузии разработанный Panigel и коллег 2,3. Многие женщины подвергаются воздействию различных ксенобиотиков, таких как наркотики или загрязнителей окружающей среды во время беременности 8. Для некоторых препаратов, которые были уже вводится регулярно во время беременности, в естественных условиях исследования может быть выполнено путем сравнения материнской крови концентрации тем, что в пуповинной крови. Однако, как правило есть только ограниченную информацию о фармакокинетике и динамики у плода и тератогенности этих веществ. Например опиаты, такие как героин легко проникает через плацентарный барьер и может привести к внутриутробной задержки роста, преждевременных родов или самопроизвольного аборта 9, Так, в случае отсутствия воздержание во время беременности заместительная терапия метадоном рекомендуется. Экс естественных условиях человеческого плацентарного модели перфузии показало, что передача метадон в кровообращение плода незначительна 11, что хорошо коррелирует с расчетными пуповинной крови к материнской крови соотношение концентраций после родов Нанотехнология является развивающейся области, особенно в медицине. В этой связи возникает вопрос о токсикологическом потенциале наноматериалов. Хотя никакой опасности человеку не может быть доказано тем не менее, существуют основные экспериментальные исследования, указывающие, что наночастиц может вызвать неблагоприятные биологические реакции, ведущие к результатам токсикологических В последнее время некоторые исследования показали, что внутриутробное воздействиезагрязнение воздуха связано с более высокой необходимости дыхательной и воспаления дыхательных путей у новорожденных и детей 15, Кроме того, малые наночастицы могут быть использованы в качестве носителей лекарственных средств для лечения либо специально плода или матери. Таким образом, становится очевидным, что обширные исследования различных ксенобиотиков или наноматериалов и их способности проникать через плацентарный барьер не требуется. Фактический обзор текущих исследований о плацентарной проницаемости для наноматериалов обобщены в Менезес и соавт. В этом протоколе мы ориентируемся в основном на момент установки, обработки и способа, которые позволяют исследовать накопление, эффектов и транслокации темпы широкий набор ксенобиотиков или наночастиц. Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian. Всего рабочего Процедура эксперимента перфузии плаценты изображен на рисунке 3. Каждая точка представляет собой среднюю концентрацию частиц в данный момент времени не менее 3 независимых экспериментов. Для наночастиц полистирола плацентарной передачи в зависимости от размера Тем не менее, материнской концентрации нм частиц уменьшается. Флуоресцентные изображения на гистологический срез ткани после перфузии показали, что эти частицы накапливаются в ворсинки плаценты данные не показаны. Antipyrine как небольшой липофильные молекулы распределены по плацентарный барьер с помощью пассивной диффузии и служит для управления целостности цепей. Через часа перфузии равновесие между матери и плода антипирином концентрации должно быть построено Через анализ лактата и плацентарных гормонов человеческий choriongonadotropin и лептин производства, а также потребления глюкозы жизнеспособность и функциональность ткани плаценты во время перфузии можно контролировать рис. Значения для перфузии с ксенобиотиков всегда должны находиться в том же диапазоне, что и значения за управление без перфузии ксенобиотиков. Кроме того, histop athological оценки перфузии плацентарной ткани может быть выполнена. Сравнению с не-перфузии плацентарной ткани могли бы выявить патологические изменения, связанные с перфузии например, бактериального загрязнения и, следовательно, может служить еще одним параметром качества управления. Дальнейшие результаты, полученные с представителем экс естественных условиях двойной рециркуляции плаценты человека модели перфузии Недавно были опубликованы 11, Рисунок 1. Экс естественных плаценты человека перфузии настройки. Схематическое изображение экс естественных человеческих плацентарной перфузии модели FA: артерии плода; FV:. Рисунок 3. Порядок работы бывших естественных человеческих плацентарной перфузии эксперимента. После родов плацента должна быть канюли в течение 30 мин. До 6 часов экспериментальной фазе с рециркуляцией открытой предварительно фазы и закрытым предварительно фаза должна быть выполнена по крайней мере 20 минут каждый. Рисунок 4. Количество частиц А и 14 C-антипирин B были измерены в материнской М, твердый символов и плода F, открытые символов цепи после того, как указанные моменты времени. Нажмите здесь, чтобы увеличить рисунок. Рисунок 5. Размер-зависимой передачи частицы полистирола через плаценты человека Соотношения между плода и матери концентрации 14 C-антипирин и полистирольные частицы известковоulated после мин перфузии плаценты. Колонка управления изображает перфузии без частиц, но с 14 C-антипирина. Рисунок 6. Жизнеспособность плацентарной перфузии тканей при A Потребление глюкозы и лактата в перфузии плаценты. Отображается представляет собой сумму изменений в общем содержании в схемах матери и плода с течением времени, деленный на вес перфузии семядоли. B Нормализованный чистых производственных NP деленное на начальное содержание ткани Т0 из плацентарных гормонов человека и choriongonadotropin лептин. Под двойной рециркуляции перфузии показали здесь, есть несколько других экспериментальных конфигурациях возможны в зависимости от вопроса, который должен быть дан ответ. Особенно плацентарной перфузии открытым обычно используются для оценки клиренс лекарственного средства в стационарном состоянии концентрации 3. Рециркуляции перфузии настройки может также применяться для подтверждения активного транспорта эндогенных или экзогенных веществ. При таком подходе той же концентрации ксенобиотиков должен быть добавлен к материнской и фетальной циркуляции. Предполагается, что существует активный транспорт против градиента концентрации, накопление исследуемого вещества в любом из обоих контурах может наблюдаться Следует отметить, что добавление испытуемого вещества только фетальный схема также возможна и может раскрыть механизм транспорта через плаценту этого вещества Протокол развивалась на протяжении Тиме и может варьироваться между различными исследовательскими группами особенно в отношении расхода, состав перфузии среды формы кислорода и нагрева 26, Особенно скорости потока может влиять на время, в которое трансплацентарно передача происходит. Чтобы управлять этим, добавление пассивно транспортируется эталонное соединение как антипирин имеет важное значение. Поскольку передача антипирин в основном ограничивается потоком и поверхностью теплообмена, это сравнение имеет различия в потоке и размер перфузии семядоли учетом которого может изменяться между экспериментами. Кроме того, FITC-декстрана, могут быть включены в цепь фетального служить в качестве контроля для целостности барьера Плод потери объема также используется в качестве маркера для целостности барьера. Кроме того, перфузии течение 6 часов не может моделировать хронического медикаментозного лечения и, следовательно, не может полностью исключить передачу ксенобиотиков после длительного воздействия. Другим ограничением модели является то, что главным образом трансплацентарным передачи в срок оценивается в то время как скорость транспорта на ранних сроках беременности, когда барьер толще, остается до сих пор неизвестным. В самом деле, первая перфузии плаценты триместре возможно, но наличие этих плаценты весьма ограничен. Тем не менее, до сих пор бывших естественных условиях плацентарной перфузии методом является единственной моделью для изучения транспорта различных ксенобиотиков или наночастиц в организованной ткани плаценты человека. Хотя токсикодинамики в бывших естественных условиях модель человеческого перфузии может быть проанализирована только в PLacental ткани, эксперименты на животных действительно может обеспечить также информация о эмбриотоксичности. Хотя, из-за анатомических различий через плацентарный барьер между людьми и грызунов эти результаты не могут быть экстраполированы на людей 4,5. Другая возможность исследовать трансплацентарно передача может быть культура клеток первичной модели, как цитотропобластов, линии хориокарциномой клетки, изолированные мембранных везикул плазмы или плацентарной ткани эксплантов Наиболее часто используемые модели линии BeWo клетки, эти клетки получают из злокачественной гестационный хориокарциномой и могут образовывать монослой на мембрану, так что транспортное исследования может быть выполнена. Результаты исследований транспорта с использованием модели BeWo клетки хорошо коррелируют с результатами, полученными в исключая виво плаценты человека перфузии Однако, чтобы изучать детали транспорта лекарства например, вклад конкретного транспортного белка и обмен веществ, модель BeWo клетка может быть мруды возможным в первую очередь потому, что это проще в обращении и возможности для манипуляций, как выражение генетически измененных транспортеры или ферментов, но в отношении общих исследований передаче наркотиков надежность этой модели ограничена. Это испытывает недостаток в кровоток и целостность монослоя должен быть оценен тщательно, поскольку она зависит от нескольких факторов, таких как условия культуры клеток, посев плотность, продолжительность воздействия и мембрана вставки 6, Различные ксенобиотиков, а также наночастицы связываются с различными белками плазмы, которые могут существенно влиять на трансплацентарным передачи 31; рассмотрении связывание с белками плазмы является важным. Перфузии среда содержит бычий сывороточный альбумин, наиболее часто белками плазмы. В последнее время исследования показали, что коэффициент передачи различных веществ, полученных с экс естественных человеческих плацентарной перфузии модель хорошо коррелируют с пуповинной крови в естественных условиях материнскойсоотношения концентраций кровь, когда коэффициент передачи были скорректированы в зависимости от степени связывания с белками плазмы В целом, экс естественных условиях плацентарной перфузии модели является действительным и надежным способом для изучения транспорта через плаценты человека и прогнозировать в естественных условиях плаценту ксенобиотиков и наночастиц. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr jove. You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions jove. Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login. You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free. To get started, a verification email has been sent to email institution. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your 'Spam' folder. Your access has now expired. Provide feedback to your librarian. If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team. Login processing JoVE Journal Bioengineering. Подготовка Система перфузии Настройка перфузии система, состоящая из водяной бани, перфузии камеры, две колонки для оксигенации, два перистальтических насоса, две ловушки пузырь, два нагревателя потока и одного датчика давления рис. Соединение этих компонентов с трубкой разделов состоит из силиконовых материалов и поливинилхлорида в соответствии со схемой на фиг. Наконец, существуют две цепи представляющего плода и матери цепи соответственно. Включите водяной бане, поток обогреватели и отопление для перфузии камеры. Во время этого этапа заполнить пузырь ловушки и удалить все пузырьки вниз по течению от ловушки. Тогда остановки насосов. Это действительно важно, что афферентные артериальной трубы всегда без пузырьков воздуха, в противном случае после катетеризации особенно тонкой плода может привести к разрыву сосудов. Включение газового потока. Начало записи датчика давления. Cannulating Плацента Получить нетронутыми плаценты от срока беременности несложный после первичного кесарева сечения. Письменное согласие должно быть дано был получен в случае нашего исследования матери до родов и исследование должно быть одобрено местным этическим комитетом это было в наших исследованиях. Первый визуальный контроль должно быть сделано для обеспечения акушерок здоровыми и нетронутыми плаценты. Канюлированием плаценты является важным шагом! Во время перфузии каждого маленького нарушения в тканях может привести к утечке между материнской и кровообращение плода. Плацента должна быть получена в течение 30 минут после родов. Выберите нетронутыми семядолей в краевой зоне плаценты без видимых сбоев по материнской линии. На хорионического пластины,связать обе смежные отрасли пупочной артерии и вене вверх по течению к более поздней стороне катетеризации к пуповине с помощью хирургического шовного материала. Сделать всегда два узла. Иглу артерии плода в первую очередь. Плацентарных артериях плода всегда меньше и тоньше, чем вены. Сделайте шва вокруг артерии плода, но не связать его немедленно. Затем связать шва два узла. Обратите внимание на давление в артерии плода, она не должна превышать 70 мм рт. Если жидкость просачивается в плода или матеrnal канюли исправить их с другого шва. Поместите плаценты на держатель ткани с плода стороной вверх и потяните плацентарной мембраны и ткани над шипами. В конце перфузии семядоли должна быть в середине отверстие в держатель ткани. Стабилизация той части, где только мембрана удерживает плацента с мембраной силиконовые диаметр 1 мм или, альтернативно, две части парафином. Соберите полный держатель ткани, затяните винты и сократить нависающие ткани. Обратите внимание, что венозные и артериальные канюли не были зажаты, но вместо этого лежал в небольшой каналов держатель ткани. Поверните держатель ткани с ног на голову, положите его в перфузии камеры и добавить крышку. Теперь, с материнской стороны должны быть на самом верху. Проверка всегда если плода цепь цела и среды, вытекающей из плода трубы вену. Для возврата перфузат к материнской цепи положил одну трубку, как венозная утечка, которая также связана с материнской насос в самое низкое положение в верхней части камеры перфузии. Подключите плода канюли вену плода трубку вены. Выполнение пред-и экспериментальная фаза перфузии Чтобы разрешить ткани, чтобы оправиться от ишемического периода после родов и, чтобы избавиться от крови в межворсинчатом пространство, открытое предварительного этапа 20 мин необходимо. Это означает, что для матери и плода вены не ведут обратно в резервуар, содержащий артериальной перфузии среды. Соберите матери и плода венозного оттока в бутылку и выбросить его после предварительной фазе. Для оценки целостности перфузии выполнить другую предварительно этап 20 мин, но в замкнутом контуре. Используйте два отдельных резервуаров средней перфузиидля матери и плода схеме и закройте схем ведущими плода венозного оттока обратно в резервуар плода и материнской назад венозного оттока в материнской водохранилища. Для основного эксперимента перфузии подготовить две колбы с мл перфузии среды один для матери и один для плода водохранилища. Смешать материнской перфузат хорошо. Начать эксперимент по обмену чистой среды перфузии с двух подготовленных колб матери и плода водохранилища. Закройте схем ведущими плода венозный отток обратно в резервуар плода и материнской назад венозного оттока в материнской водохранилища. Продолжить перфузии в течение 6 часов и регулярно брать пробы. Всегда ресуспендируйте среды в матери и плодаводохранилища до вывода. При необходимости отрегулировать рН с использованием либо соляная кислота или гидроксид натрия. Остановите перфузии после 6 часов. Выверните насосы, водяная баня, обогреватели и потока газа. Удалить плаценты от держателя ткани, вырезать перфузируемом семядолей ярче, чем unperfused ткани и взвесить его. Образцы должны включать в себя все слои плаценты. Анализ образцов Центрифуга перфузату образцов в течение 10 мин при мкг до проведения анализа для удаления остаточных эритроцитов. Возьмите супернатанта для дальнейшего анализа. Для оценки проницаемостиПлацента анализа 14 С-антипирин жидким сцинтилляционных. Смешать мкл фетальной и материнской образцов с 3 мл сцинтилл ционной смеси и измерения в течение 5 мин в бета-счетчике. Для оценки переноса флуоресцентной наночастиц или ксенобиотиков интерес читать флуоресценции при возбуждении нм и нм эмиссия в микропланшет-ридера указанные длины волн для анализа желто-зеленой меткой, которую мы использовали для наночастиц. Для определения жизнеспособности плацентарной перфузии тканей при мерой потребления глюкозы и лактата в матери и плода цепь с автоматизированной системой газового состава крови. Кроме того, оценки производства плацентарных гормонов choriongonadotropin человека ХГЧ и лептина в гомогенизированных образцов ткани и перфузаты путем твердофазного иммуноферментного анализа ELISA. Play Video. Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account. Continue with Shibboleth or Forgot Password? Please enter your email address so we may send you a link to reset your password. You might already have access to this content! Please enter your Institution or Company email below to check. Please enter an institutional email address. Check access. Create Account. Forgot Password? Reset Password. Phone number. Request trial. Thank You! A JoVE representative will be in touch with you shortly. Waiting for verification email? Please click here to activate your free 2-hour trial. If you do not wish to begin your trial now, you can log back into JoVE at any time to begin. Enable Javascript for audio controls. Get cutting-edge science videos from J o VE sent straight to your inbox every month. We use cookies to enhance your experience on our website. Continue Learn more Close.

Цюрих бесплатные пробы Экстази, скорость

Трава, марихуана дешево купить Болонья

Цюрих бесплатные пробы Экстази, скорость