Биохимическое значение резорцинольных липидов в проявлениях жизнедеятельности прокариот и эукариот - Биология и естествознание реферат
Главная
Биология и естествознание
Биохимическое значение резорцинольных липидов в проявлениях жизнедеятельности прокариот и эукариот
Взаимодействие липидов с биологическими мембранами и модельными бислоями. Подавление бактериального, грибкового, протозойного и паразитарного роста. Влияние на процесс окисления, на структуру и активность белка, взаимодействие с ДНК, цитотоксичность.
посмотреть текст работы
скачать работу можно здесь
полная информация о работе
весь список подобных работ
Нужна помощь с учёбой? Наши эксперты готовы помочь!
Нажимая на кнопку, вы соглашаетесь с
политикой обработки персональных данных
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Министерство образования и науки Российской Федерации «Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского»
Кафедра молекулярной биологии и биомедицины
Биохимическое значение резорцинольных липидов в проявлениях жизнедеятельности прокариот и эукариот
Глава 1. Взаимодействие с биологическими мембранами и модельными бислоями
Глава 2. Подавление бактериального, грибкового, протозойного и паразитарного роста
Глава 3. Влияние на процесс окисления, на структуру и активность белка, взаимодействие с ДНК, цитотоксичность
Фенольные липиды являются вторичными метаболитами (несущественные для клеточного роста), синтезируемыми главным образом растениями (из растений), а также животными, грибами и бактериями как во время нормального развития, так и в ответ на стрессовые условия, такие как инфекции, ранения и УФ-излучение. Эти соединения являются очень разнообразной группой и включают два простых однокольцевых фенола и их производные. Химически производные, называемые фенольными липидами, являются производными моно- и дигидрофенолы, а именно катехол, резорцин, гидрохинон. Междисциплинарный интерес к фенольным липидам, от чистой и промышленной химии до сельскохозяйственных, пищевых и биомедицинских наук, привел к увеличению количества исследовательских групп для изучения различных сторон активности фенольных липидов. В течение последних нескольких лет было несколько интересных и всесторонних обзоров о фенольных липидах, особенно резорциновых липидах, которые, оказывается, являются наиболее исследованными компонентами этой группы. Все началось с обзора Козубека и Тимана, которые предоставили полное описание известных тогда возникновения (распространения), изоляции, анализа (исследования) и метода структурного определения, а также синтеза и биологической активности резорциновых липидов. За этим последовали обзоры о методах выделения, хроматографическом анализе и метаболизме алкилрезорцинов, статьи о некоторых свойствах соединений в муке из цельнозерновых культур, включая резорциновые липиды, и обзоры о вторичных метаболитах растений и их анализе и применении. Коррейя с соавторами описали наличие, распределение и биологические активности различных фенольных липидов семейства Анакардиевые, или Сумамховые. Номенклатура, возникновение (распространение), химические структуры, биосинтез и химический синтез, изоляция и отделение, а также химические и биологические свойства анакардовых кислот были представлены Тиманом, тогда как Луби и Тахиль описали несколько промышленных областей применения фенольных липидов от Анакардиевых.
M. Стасюк и A. Козубек опубликовали обзорную статью по фенольным липидам и алкилоксибензолам в частности, в которой описали биологические и биохимические свойства данных соединений.
Алкилоксибензолы (АОБ) составляют широкую группу молекул микробного и растительного происхождения. Универсальные механизмы их биологической активности заключаются в установлении гидрофобных, электростатических и водородных взаимодействий с широким кругом биополимеров, результатом чего является модификация структурной организации и функциональной активности последних. При этом формирование подобных эффектов оказывается возможным и в гетерологичных системах, в частности - в отношении ферментных и рецепторных белков животного происхождения. Другой интересной особенностью АОБ является их способность модифицировать свойства полимерных субстратов.
Глава 1. Взаимодействие с биологическими мембранами и модельными бислоями
Многие важные процессы клеточного обмена веществ связаны с биологическими мембранными структурами и зависят от их свойств. Структура и динамика липидных бислоев являются решающими для их биологической функции. Включение чужеродных соединений, например, других липидов или препаратов в двухслойную систему изменяет структуру бислоя и его биологическую функцию. Фенольные липиды обладают очень заметными амфифильными свойствами и могут включаться в фосфолипидный бислой. Этот процесс очень часто вызывает изменения в биологической мембране, а также модельных бислоях.
Батраков и соавторы, используя бактериальные алкилрезорцины, показали, что гомологи с насыщенными цепями могут образовывать устойчивые черные липидные мембраны, особенно при высоких рН >7,5. В щелочных условиях кардол и метилкардол из жидкости оболочки кешью образуют липосомальные структуры поодиночке, а также в смесях с холестерином, жирными кислотами или фосфатидилэтаноламином. Эти везикулярные структуры показывают относительно высокий захват молекул-маркеров и стабильность размеров. Сохранение захваченного вещества зависит от типа резорцинольных липидов и температуры, но это в целом ниже, чем у контрольных фосфолипидных липосом.
Гексилрезорцин является химическим аналогом микробных аутоиндукторов анабиоза группы алкилоксибензолов. Исследование электронной микроскопией липосомальных суспензий предоставило доказательства увеличения размера липосом и их агрегации в ответ на введение гексилрезорцина при надкритических концентрациях (2.0-4.75? 10-4M). Гексилрезорцин в надкритических концентрациях (5,0?10-4М и выше) вызывал разрушение липосом.
Все большее количество резорцинольных липидов в липосомальных мембранах, изготовленных из фосфатидилхолина, вызывало удивительное изменение в термотропных свойствах фосфолипидных бислоев. Насыщенные и ненасыщенные гомологи этих соединений при низких концентрациях в мембране показали хорошую смешиваемость с фосфолипидами. Также было отмечено, что с увеличением концентрации алкил(ен)резорцинов в бислоях наблюдались эффекты, связанные с фазовым расслоением, и сдвиг основного фазового перехода в сторону более высоких температур. При низких концентрациях в мембране (5-20 моль%) насыщенные и мононенасыщенные С17-гомологи показали различное влияние на термотропные свойства гидратированного дипальмитоилфосфатидилхолина. При концентрациях >10 мол% насыщенный гомолог вызывал переход L?>P?, повышение температуры и энтальпии основного фазового перехода. Ненасыщенный гомолог вызывал сдвиг перехода к более высокой температуре, с расширением основного перехода, но снижение его энтальпии. При концентрации в мембране выше 15 мол% алкил(ен)резорцина процесс разделения фаз наблюдался в смесях фосфатидилхолина и резорцинольных липидов.
Фенольные липиды могут вызвать значительные изменения в биофизических свойствах фосфолипидного бислоя. Одним из них является нарушение упаковки молекул компонентов бислоя. Наличие включенных резорцинольных липидов в бислое лецитиновых везикул влияет на текучесть мембраны, измеренной по подвижности спин-меченых жирных кислот. При температуре выше температуры фосфолипидного фазового перехода насыщенные и ненасыщенные гомологи в концентрации <6 мол% вызывали увеличение в параметре упорядочения для 5-доксистеарата. В высоких концентрациях в липидной мембране (6-14 мол%) изучаемые гомологи также значительно уменьшали подвижность 12-доксистеарата. Резорцинольные липиды показали наиболее сильное влияние на подвижность обоих типов маркеров (подвижности 5-доксистеарата и 12-доксистеарата) в липосомальных мембранах, включающих холестерин. Это холестериноподобное действие резорцинольных липидов показано при низких концентрациях мембранного алкил(ен)резорцина и было сильнее для мембран, содержащих высокие концентрации холестерина. Похожий стабилизирующий эффект алкилрезорцинов наблюдался в бислое дифосфатидилглицерина с пиреном как флуоресцентным маркером.
Влияние 5-н-алкилрезорцинов на свойства фосфолипидных везикул зависит от асимметрии их локализации. Значительное увеличение двухслойной проницаемости наблюдалось, когда названные соединения присутствовали только во внешней среде. Когда эти амфифилы были предварительно включены в лецитиновый бислой во время его формирования, полученные липосомы эффективно инкапсулировали водорастворимые растворы, их размер был меньше, чем у липосом чистого лецитина и они были более однородными и стабильными. Гексилрезорцин влияет на стабильность моноламеллярных липосом, сформированных из яичного фосфатидилхолина. Было установлено, что критическое отношение между гексилрезорцином и яичным лецитином для защиты липосом против литической активности поверхностно-активного вещества Tween 20 близко к эквимолярному. Двойной эффект «стабилизация/дестабилизация» резорцинольных липидов был исследован с помощью моделирования атомно-молекулярной динамики для выяснения его молекулярной природы. Исследования взаимодействий любого из трех резорцинольных гомологов, отличающихся длиной алкильного хвоста, с липидным бислоем из димиристоилфосфатидилхолина показали, что резорцины, предварительно включенные в бислои, вызывают упорядоченность внутри липидных ацильных цепей, снижают гидратацию липидных полярных головных групп и делают бислои менее проницаемыми для молекул воды. Моделирование, при котором резорцины были соединены с водным раствором в предварительно сформированном фосфолипидном бислое, выявляло его локальное разрушение, ведущее либо к образованию временных пор, либо даже полной дезинтеграции бислоя.
Резорцинольные липиды, добавленные во внешнюю среду, вызывали утечку ионов калия из эритроцитов и увеличивали проницаемость мембран эритроцитов для неэлектролитов с молекулярным диаметром до 1,4 нм. Они также индуцировали высокую проницаемость мембран для воды. Повышенная проницаемость мембраны часто приводит к клеточному гемолизу. Было показано, что существует взаимосвязь между гемолитической активностью резорцинольных липидных гомологов и длиной и степенью ненасыщенности алифатической боковой цепи. Фенольные и резорцинольные липиды, выделенные из жидкости оболочки кешью, демонстрируют более высокую способность к гемолизу эритроцитов, чем алкил(ен)резорцины из ржаных отрубей. Влияние фенольных липидов и их производных на барьерные функции биологических мембран модулируется присутствием двухвалентных катионов, которые защищают эритроциты от литического действия резорцинольных, а также фенольных липидов. Степень защиты эритроцитов зависит от типа катиона и типа резорцинольных липидов, хотя было обнаружено, что ионы Zn2+ являются самыми активными в противогемолитической защите.
Исследования до настоящего времени показали, что все исследованные фенольные и резорцинольные липиды в сублитической концентрации защищают эритроциты от лизиса в гипоосмотических условиях. Самая низкая защита была показана у анакардиевой кислоты и резорцинольных липидов из ржаных отрубей. Наиболее эффективным противолитическим агентом являлся кардол в концентрации 5 мкМ, который подавляет более чем 50% лизиса.
Гидрокси- или дигидроксибензольное кольцо в молекуле фенольных липидов предполагает возможность замены этих соединений, таких как убихинон или пластохинон, в посреднических процессах электронного и протонного транспорта. Длинноцепочечные резорцинольные липиды (C10, C19) в концентрации 10-4 М ингибируют дыхание клеток дрожжей, Bacillus cereus, Micrococcus lysodeicticus и тимоцитов. Длинноцепочечные алкилрезорцины также ингибируют окисление НАД-зависимых субстратов в изолированных митохондриях.
С использованием гидрофобизованных производных широкопористого криогеля поливинилового спирта с различным содержанием привитых изобутильных группировок показано, что гидрофобные свойства поверхности клеток сильнее выражены у грамотрицательных бактерий. Гидрофобность клеточной поверхности при обработке бактерий ауторегулятором гексилрезорцином усиливается у грамотрицательных и снижается у грамположительных. Получены данные, свидетельствующие о вариабельности гидрофобных свойств поверхности грамположительных бактерий (Bacillus subtilis и Staphylococcus epidermidis).
Поверхность грамотрицательных бактерий становится более гидрофобизованной по сравнению с поверхностью необработанных клеток вследствие усиления гексилрезорцином гидрофобных свойств внешней липидной мембраны. Грамположительные бактерии отчасти теряют гидрофобность. Вероятно, связывание гексилрезорцина с липопротеидами и липополисахаридами клеточной стенки приводит к их модификации поверхностных структур.
Таким образом, благодаря амфифильным свойствам фенольных липидов, значительная часть их эффекта (влияния) связана с их взаимодействием с мембранными структурами и гидрофобными доменами белков.
белок мембрана цитотоксичность грибковый
Глава 2. Подавление бактериального, грибкового, протозойного и паразитарного роста
Взаимодействия фенольных липидов с биологическими мембранами и структурой ДНК и цитотоксическая активность соответствуют их антимикробной и антипаразитарной активности. Первые сообщения, касающиеся антибактериального действия алкильных производных резорцинов и их использования в лечении инфекций, появились в 1920-х годах.
5-алкилрезорцины, выделенные из грибов Merulius incarnatus, подавляют метициллин-устойчивый золотистый стафилококк. Резорцинольные липиды, полученные из Pseudomonas carboxydoflava, подавляют рост других бактерий, таких как Micrococcus lysodeictius и Bacillus subtilis. 5-н-пентадецилрезорцины с разной степенью ненасыщенности алифатической цепи демонстрировали сильную активность в отношении стрептококков, бактерий, ответственных за парадонтоз и Propionibacterium acne, бактерию, которая вызывает акне (угревую сыпь). Наиболее мощным ингибитором был гомолог с ненасыщенной алифатической цепью. Наличие карбоксильных групп в кольце повышало антибактериальную активность заметно, а бактерицидная активность 4-н-гексилрезорцина к S. mutans была менее выражена.
Резорцинольные липиды присутствуют в бактериальных клетках как ауторегуляторы. Эль-Регистан и др. показали, что внеклеточные аутологичные регуляторы развития микробных культур, которые контролируют переход к стационарной стадии и формирование спящих клеток (на протяжении всех циклов развития культуры и во время периода голодания) могут выступать в качестве адаптогенов. Во многих микроорганизмах эти метаболиты, как известно, являются аутологичными индукторами анабиоза и имеют структуру изомеров или гомологов алкилоксибензолов. В силу их способности стабилизировать структуру белка, они оказывают мембранотропное воздействие. Они играют важную роль в ответах на стресс, повышая устойчивость клеток к химическим и физическим факторам. Добавление гексилрезорцина в экспоненциальной фазе роста культур, выращенных на сбалансированных средах, приводило к задержанию клеточного деления и ускоряло переход к стационарной фазе. С другой стороны, было показано, что гексилрезорцин не может предотвратить переход B>А в молекуле ДНК (ДНК находится в форме B в растительных клетках и превращается в конформацию А в эндоспорах в процессе их состояния покоя). Авторы предположили, что стимуляция перехода B>А может быть результатом формирования мицеллоподобных наноструктур вокруг макромолекул ДНК при взаимодействии с молекулами гексилрезорцина. Аналогичный эффект стабилизации был показан у Saccharomyces cerevisiae.
Синтез резорцинольных липидов имеет важное значение для образования зрелых цист у Azotobacter vinelandii. В зрелых цистах, эти липиды заменяют фосфолипиды мембраны и также соединения слоев, покрывающих цисты. Мутант arsB, лишенный возможности синтезировать только синтазу алкилрезорцина, не продуцировал резорцинольные липиды. Трансмиссионная электронная микроскопия показала, что мутант не формировала зрелых цист. Дальнейшие исследования с использованием мутантного штамма, несущего мутацию arsA показали, что белок arsA является необходимым для синтеза этих фенольных липидов. Мутанты arsA были способны формировать цисты устойчивости к высыханию. Эти данные могли означать, что алкилрезорцины играют структурную роль в экзиновом слое цист, но они не являются существенными для или образования цисты, или сопротивления к высыханию.
Алкилрезорцин, присутствующий в среде, также влияет на синтез эндогенных алкилрезорцинов. Было обнаружено, что, если 5-н-пентадецилрезорцин присутствовал в питательной среде, то больше эндогенных алкилрезорцинов было синтезировано и наблюдалось снижение количества фосфолипидов. Этот эффект может означать, что алкилрезорцины могут действовать в качестве небольших гормоноподобных молекул, называемых аутоиндукторы, и играть роль в химической связи (кворум-зондирование) между бактериальными клетками. Это явление было продемонстрировано ранее в нескольких природных соединениях.
Фенольные липиды проявляют фунгистатические свойства, похожие на их антибактериальную активность. Наличие 5-N- (гептадека-12-енил) и 5-н-пентадецилрезорцинов в кожице (цедре) считалось ответственным за сопротивление фруктов манго к грибковой инфекции Alternaria alternata и Colletotrichum gloeosporioides. Аналогичным образом, сопротивление семян ячменя к патогенным грибкам Aspergillus niger и Penicillium crysogenum было связано с резорцинольными липидами, присутствующими в эпикутикулярном воске семян. 5-метилрезорцин, присутствующий в воске перикарпия, также защищает зерно от инфекции Aspergillus flavus и производства афлатоксина.
Смесь 5-N-пентадецилрезорцинов и 5-н-алкилрезорцина из ржи ингибирует рост Aspergillus parasiticus, А. versicolor, Penicillinum chyrysogenum и P. roqueforte а также Fusarium culmorum, Rhizoctonia cerealis и Р. solani.
3-гептадецил-5-метоксифенол, выделенный из Oxalis erythrorhiza, и 5-гептадека-триенилрезорцин, выделенный из грибка Merulius incarnatus, как сообщалось, являются мощными ингибиторами Leishmania amazonensis и L. donovani. Аналогично, 5- (11? (S) -гидрокси-8?-гептадеценил) резорцин и 5- (12?(S) -гидрокси-8?,14?-гептадекадиенил) резорцин, выделенные из листьев Stylogyne turbacensis, показали самую сильную активность при анализе лейшманиоза и только умеренную активность против лекарственной устойчивости штамма Trypanosoma cruzi.
Длинноцепочечные гомологи 5-н-алкилрезорцина, выделенные из Anacardium occidentale, также имеют моллюскоцидную активность против Briomphalaria glabrata, паразита, вызывающего шистосомоз, серьезную тропическую болезнь. Подобным образом, высокая активность этого гомолога была также продемонстрирована против класса червей Filaria. Сообщалось об инсектицидной активности фенольных липидов из листьев гинкго билоба.
Глава 3. Влияние на процесс окисления, на структуру и активность белка, взаимодействие с ДНК, цитотоксичность
Образование свободных радикалов, в том числе активных форм кислорода, является неизбежным явлением, связанным с аэробной жизнью. Предпосылкой для функционирования и развития клеток в кислород-содержащей среде является наличие защитных систем, включающих специализированные ферменты и низкомолекулярные антиоксиданты. Фенольные соединения, оказывается, являются эффективными неэнзиматическими защитниками (протекторами) от окислительного стресса. Они могут выступать как антиоксиданты в различных направлениях. Они могут не допускать (препятствовать) ионы переходных металлов с момента начала окисления, подавлять промежуточные соединения окисления (в том числе активные формы кислорода) и ингибировать различные прооксидантные ферменты.
Длинноцепочечные 5-н-алкил(ен)резорцинольные гомологи предотвращают Fe2+-индуцированную пероксидацию жирных кислот и фосфолипидов в липосомальной мембране и процессы автоокисления триглицеридов и жирных кислот. В миллимолярной концентрации алкилрезорцины из бактерий и зерен хлебных злаков подавляют Fe2+-аскорбиновую кислоту и Fe2+-НАДН-индуцированное перекисное окисление в микросомах печени полностью и то же в саркоплазматическом ретикулуме частично. Они также были эффективны в защите мембраны эритроцитов против перекисно-индуцированного окисления. Также были оценены антиоксидантные свойства алкилрезорцинов ржаных отрубей с использованием их радикал-нейтрализующей активности 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила и метода хемилюминесценции. Радикальное сокращение 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила варьировалось от 10 до 60% для алкилрезорцинольных гомологов в концентрации 5-300 мкM и не зависело от длины алкильной боковой цепи отдельного гомолога. Эти результаты были подтверждены с помощью дальнейших исследований. 5-н-алкилрезорцины (C15, C17, C19, C21 и C23) не оказывали мощного антиоксидантного действия на способность плазмы восстанавливать железо и радикалы 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила. Тем не менее, они были способны значительно ингибировать медно-опосредованное окисление липопротеинов низкой плотности человека в пробирке и увеличить самозащитную способность раковых клеток толстой кишки человека НТ29 при нанесении ущерба (удара по) ДНК, индуцированного перекисью водорода. Точные механизмы защитного эффекта резорцинольных липидов клеточных структур от окисления до сих пор неизвестны.
C7-алкилоксибензол, химический аналог ауторегулятора микробного анабиоза, защищает клетки дрожжей от активных форм кислорода, произведенных под гамма-излучением. Этот эффект проявляется как в сохранении жизнеспособности клеток при облучении, так и в восстановлении их способности размножаться после облучения. Защитный механизм C7-алкилоксибензола включает акцептирование активной формы кислорода в результате окислительного стресса. C7-алкилоксибензол также показал способность защищать клетки от фотоокисления. Влияние алкилоксибензолов на сопротивляемость клеток S. cerevisiae к тепловому шоку и окислительному стрессу летальной интенсивности зависело от гидрофобности исследованных соединений. С7-алкилоксибензол в концентрации 0,25-0,5 г/л вызывал два-пятикратное увеличение в сопротивляемости дрожжевых клеток к перекиси водорода, в то время как С12-алкилоксибензол уменьшал ее во всех концентрациях. C7-алкилоксибензол и C12-алкилоксибензол имели похожий эффект на дрожжи, подвергавшиеся тепловому шоку.
Антиоксидантные свойства фенольных липидов, проявляющиеся как способность акцептировать радикалы и ингибировать ферменты, участвующие в выработке свободных радикалов в физиологических условиях, свидетельствуют о возможном участии этих соединений в защите клеток против канцерогенеза. Ксенобиотики, которые вызывают мутагенные процессы, активизируются во многих случаях за счет процессов окисления. Алкилрезорцины демонстрируют отсутствие мутагенного, канцерогенного и коканцерогенного эффектов. Это может говорить о возможности их применения в фармакологии и медицине. Препарат, содержащий смесь преимущественно гомологов с ненасыщенной цепью (C15-C27), резко тормозил влияние прямых и косвенных (метаболически активных) мутагенов. Эффект был сильнейшим в случае косвенно действующих мутагенов бензо[a]пирена и 2-аминофлуорена, из-за которых наблюдалось более чем 50% ингибирование. Для напрямую действующих мутагенов, таких как метилметансульфонат и даунорубицин, влияние резорцинольных липидов было меньше. В тесте обмена сестринскими хроматидами, культивируемых in vitro лимфоцитов, полученных из крови человека, также наблюдалось значительное уменьшение в частоте обмена сестринскими хроматидами, вызванное бензо[a]пиреном. Это было подтверждено в дальнейших экспериментах с использованием теста микроядер, блокированных цитокинами и теста сопротивляемости тиогуанину. Резорциновые липиды значительно снижали темпы и частоту мутаций, вызванных в культивируемых лимфоцитах бензо[a]пиреном и митомицином С.
Антигенотоксическое влияние было показано для 5-н-алкилрезорцинов в клетках рака толстой кишки человека HT29. Повреждения ДНК, вызванные пероксидом водорода, были значительно снижены, а ответа к длине цепи не наблюдалось. Снижение генотоксичности от пентадецилрезорцина было примерно на 40%, от генейкозилрезорцина - 10%. Метилрезорцин и гексилрезорцин повышали сопротивляемость к УФ-излучению различных молекул ДНК разного происхождения и конформации (линейная ДНК фага лямбда, ДНК из селезенки крупного рогатого скота и ДНК плазмиды pUC19). Разрушение ДНК при облучении ультрафиолетовым светом в присутствии исследуемых соединений было сравнительно невелико и зависело от химической структуры и концентрации соединения. Исследования с использованием плазмиды pUC19 показали, что изучаемые алкилрезорцины препятствовали переходам от сверхспирализованной кольцевой формы в спокойном состоянии к сверхспирализованной линейной раскрученной форме.
Было показано, что мерулиновые кислоты в концентрации 100 мкг/мл полностью подавляли синтез ДНК и РНК и синтез белка в клетках Bacillus brevis. Похожие ингибирующие свойства были показаны для 5-н-децилрезорцина в изолированных тимоцитах крысы.
Бактерии рода Lactobacillus, обладающие способностью синтезировать оксид азота (NO) неденитрификационным путем, не индуцируют его синтез в присутствии ауторегуляторных молекул: плотностно-зависимого специфического регулятора гомосеринлактона и неспецифического - гексилрезорцина. Прямыми методами регистрации с использованием флуоресцентных красителей показано, что, в отличие от NO-синтазной активности, содержание активных форм кислорода в клетках лактобацилл при действии исследуемых сигнальных молекул возрастает, причем воздействие гексилрезорцина более выражено по сравнению с действием гомосеринлактона.
Установлено, что увеличение биосинтеза оксида азота (NO) в клетках Lactobacillus plantarum 8Р-А3 происходит при сильном стрессовом воздействии, сопровождающемся значительным снижением жизнеспособности микробных клеток: нагревании при 70 и 80?C, продолжительном культивировании, токсическом действии гексилрезорцина. Активация биосинтеза NO в ответ на стрессовые воздействия свидетельствует в пользу универсальности ключевых механизмов стресс-ответа клеток различного уровня организации и важной роли в них NO.
Было проведено исследование роли АОБ в ответе бактериальных клеток на температурное воздействие, оцениваемое по уровню биолюминесцентного отклика E. coli ibpA'::lux, соответствующего индукции белков теплового шока (в частности, белка-шаперона IbpA). Проведение предварительного эксперимента, направленного на выявление собственного влияния АОБ в отношении штамма E. coli ibpA'::lux, позволило обнаружить дозозависимые эффекты на уровень свечения и ростовую способность клеток. Основанный на этих данных расчёт фактора индукции биолюминесценции (Fi) позволил выявить зависимость экспрессии стрессовых регулонов от концентрации АОБ, выраженную в слабой индукции гена ibpA малыми концентрациями ауторегуляторов, но в значительной репрессии указанного гена при увеличении присутствия данных молекул до концентрации 10-3 М.
Проведённое комплексное исследование эффектов АОБ на уровень активации SOS-системы при воздействии УФ-излучения позволило обнаружить существенную репрессию SOS-ответа, прогрессирующую с увеличением длины алкильного радикала, а следовательно, и гидрофобности молекулы. Результаты свидетельствуют о преимущественно ингибирующем характере влияния АОБ на SOS-ответ клеток при их облучении летальной интенсивности на фоне сохранения исходного количества жизнеспособных клеток.
Длинноцепочечные гомологи в небольших концентрациях (10-6 и 10-5 М) индуцируют активацию SoxS-регулона, в концентрации 10-4 М демонстрируют антиоксидантные эффекты, снижая уровень биолюминесценции ниже контрольных значений, и при увеличении их присутствия до 10-3 М приводят к отключению стрессового регулона. Короткоцепочечные АОБ блокируют активацию регулона с одновременным снижением чувствительности бактериальных клеток к воздействию окислителя, что выражается в сохранении большего количества жизнеспособных клеток; защитный эффект возрастает с увеличением концентрации АОБ.
Резорцинольные липиды обладают способностью к разрезанию ДНК. 5-н-тридецил и 5-н-пентадеценилрезорцины, присутствующие в экстракте растения Hakea sp., показали способность Cu2+-индуцированного разрезания реплицированной нити в плазмидной ДНК uX174. Кроме того, несколько бис-(дигидроксиалкилбензолов) были также посредниками Cu2+-зависимого расщепления ДНК. Активность резорцинольных липидов увеличивается с ростом числа атомов углерода в алифатической цепи. Это говорит о том, что алкилрезорциновые молекулы взаимодействуют с двойной спиралью ДНК путем вставки цепей в его внутреннюю структуру. Алкилрезорцин-индуцированное разрезание цепи нуклеиновой кислоты связано с выработкой гидроксильных радикалов посредством окисления при высоком pH в присутствии Cu2+, O2 и алкилрезорцина. Алкилрезорциновая активность увеличилась в присутствии кислорода, что позволяет предположить, что расщепление ДНК 5-н-алкилрезорцином включает окисление бензольного кольца до тригидрокси-производных, способных восстановить медь для последующего формирования активных форм кислорода.
Описано формирование упорядоченных линейных надмолекулярных структур высокополимерной ДНК, происходящее в водных растворах в присутствии низкомолекулярных лигандов из группы алкилрезорцинов (АР). С использованием атомно-силовой и сканирующей электронной микроскопии визуализированы последовательные этапы подобного процесса: на первом происходит первичное взаимодействие между молекулами за счет взаимодействий алкильных радикалов алкилрезорцинов с гидрофобными участками ДНК, далее они скапливаются на ДНК, образуя мицеллоподобные наноструктуры, что вызвано их амфифильными свойствами и происходит в отдельных участках ДНК. На последнем этапе аранжированные низкомолекулярным лигандом молекулы ДНК начинают взаимодействовать друг с другом, что приводит к формированию упорядоченных тяжистых структур, состоящих из множества параллельно расположенных нитей ДНК.
Было документально подтверждено, что различные составляющие, выделенные из пищевых и лекарственных растений, иногда могут быть антиканцерогенными и антимутагенными. В последние годы фенольные липиды привлекли внимание с целью потенциального использования в терапии и/или профилактике конкретных классов болезней. Фенольные липиды, в основном резорцинольные липиды, обладают способностью Cu2+-индуцированного разрезания ДНК. Параллельно они демонстрируют отсутствие мутагенного, канцерогенного и коканцерогенного эффектов и защищают ДНК от перекисного и УФ-индуцированного повреждения. Благодаря всем этим свойствам фенольные липиды интенсивно исследовались в качестве цитотоксических и противоопухолевых агентов.
Исследования биологической активности 5-пентадеценилрезорцин
Биохимическое значение резорцинольных липидов в проявлениях жизнедеятельности прокариот и эукариот реферат. Биология и естествознание.
Реферат по теме Особенности менталитета средневекового человека
Курсовая работа: Преступность несовершеннолетних с психическими отклонениями. Скачать бесплатно и без регистрации
Образец Титульника Для Реферата Студента Кгу Курск
Курсовая работа: Особенности формирования, распределения и использование прибыли
Дипломная Работа Международные Отношения
Управление Стоимостью Проекта Курсовая
Курсовая работа по теме Речевая готовность детей к школе на занятиях по обучению грамоте
Планирование Научно Исследовательской Работы Реферат
Отчет по практике по теме Организация деятельности сельскохозяйственной артели 'Хопёрский пионер' Урюпинского района Волгоградской области
Курсовая работа по теме Электронные таблицы
Курсовая работа по теме Вычисление определителя матрицы прямым методом
Методика изучения синтаксиса сложного предложения в школе
Реферат: Разработка проблем онтопсихологии физического воспитания и спорта в научной школе А.Ц. Пуни
Реферат: Этне Тоэбфота
Дипломная работа по теме Автоматизация работы SEO-специалиста
Оформление Первичных Кассовых Документов Отчет По Практике
Андрей Боголюбский Сочинение По Истории Егэ
Реферат: Процесс социализации личности
Дипломная работа по теме Разработка нового проекта отработки Третьего горизонта Старобинского месторождения на базе современных инновационных технологий
Отчет По Учебной Практике Ово Внг Рф
Проблемы питания современных студентов - Безопасность жизнедеятельности и охрана труда реферат
Античный период в истории естествознания. Состав и строение клетки - Биология и естествознание контрольная работа
Расследование несчастного случая на производстве - Безопасность жизнедеятельности и охрана труда лабораторная работа