Базель бесплатные пробы Каннабис, Марихуана

≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈

Гарантии! Качество! Отзывы!

Проверенный магазин!

≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈ ≈

▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼ ▼▼

Наши контакты (Telegram):☎✍

>>>✅(НАПИСАТЬ ОПЕРАТОРУ В ТЕЛЕГРАМ)✅<<<

▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲ ▲▲

≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡

⛔ ВНИМАНИЕ!

📍 ✅✅✅ Используйте ВПН, если ссылка не открваеться !!!

📍 В Телеграм переходить только по ССЫЛКЕ что ВЫШЕ! В поиске НАС НЕТ там только фейки!

📍 Гарантии и Отзывы!

📍 Работаем честно!

≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡ ≡

Базель бесплатные пробы Каннабис, Марихуана

Настоящий протокол содержит инструктивную информацию по использованию табачного рогатого червя Manduca sexta в исследованиях каннабиноидов. Метод, описанный здесь, включает в себя все необходимые материалы и протоколы для мониторинга физиологических и поведенческих изменений модели насекомых в ответ на лечение каннабидиолом CBD. С повышенным вниманием к каннабиноидам в медицине, несколько модельных организмов млекопитающих были использованы для выяснения их неизвестных фармацевтических функций. Тем не менее, многие трудности остаются в исследованиях млекопитающих, что требует разработки модельных организмов, не относящихся к млекопитающим, для исследований каннабиноидов. Авторы предполагают, что табачный роговой червь Manduca sexta является новой модельной системой насекомых. Этот протокол предоставляет информацию о подготовке искусственной диеты с различным количеством каннабидиола КБД , создании среды культивирования и мониторинге их физиологических и поведенческих изменений в ответ на лечение КБД. После того, как среда была подготовлена, личинки 1-й звезды были индивидуально помещены в пробирку объемом 50 мл с помощью деревянной шампурной палочки, а затем пробирка была покрыта марлей. Измерения проводились через 2-дневные интервалы для физиологических и поведенческих реакций на введение КБД. Эта простая процедура культивирования позволяет исследователям тестировать большие образцы в данном эксперименте. Кроме того, относительно короткие жизненные циклы позволяют исследователям изучать влияние каннабиноидных методов лечения на несколько поколений однородной популяции, что позволяет получать данные для поддержки экспериментального проекта в более высоких модельных организмах млекопитающих. В последние годы внимание общественности было сосредоточено на каннабиноидах из-за их терапевтического потенциала, включая лечение эпилепсии1 , болезни Паркинсона2 , рассеянного склероза3 и различных форм рака4,5,6 с помощью каннабидиола CBD. Поскольку каннабис легализован как сельскохозяйственный товар в Законе об улучшении сельского хозяйства года, Публичном законе Законопроект о фермах года , каннабис и его каннабиноидные производные в пищевой, косметической и фармацевтической промышленности экспоненциально увеличились. Кроме того, клинические изоляты одиночных каннабиноидов и каннабиноидных смесей были успешно протестированы на людях7 , клеточных линиях5,8 и различных модельных системах животных9, Клиническое испытание было бы идеальным для подтверждения эффективности и неблагоприятного воздействия каннабиноидов на конкретное заболевание. Чтобы преодолеть эти препятствия, были использованы различные клеточные линии человека, потому что клеточные линии человеческого происхождения экономически эффективны, просты в обращении, могут обходить этические проблемы и обеспечивать последовательные и воспроизводимые результаты, поскольку клеточные линии представляют собой «чистую популяцию клеток, которые не имеют перекрестного загрязнения других клеток и химических веществ» Alves et al. Их результаты показали, что КБД вызывает потерю жизнеспособности клеток, нарушение прогрессирования клеточного цикла и индукцию апоптоза. Эти наблюдения демонстрируют потенциальные негативные последствия употребления каннабиса беременными женщинами Аналогичным образом, ряд клеточных линий также использовался для изучения фармакологических эффектов КБД при заболеваниях человека, в частности, различных формах рака. Исследования in vitro успешно продемонстрировали противораковые эффекты в клетках рака поджелудочной железы15 , молочной железы8 и колоректального рака Однако, будучи широко доступными и простыми в обращении, конкретные клеточные линии, такие как HeLa, HEK, склонны к генетическим и фенотипическим изменениям из-за изменений в условиях их роста или обработки В исследованиях каннабиса различные системы моделей животных, начиная от мелких животных, таких как мышь18 , морская свинка19 и кролик19 , до крупных животных, таких как собака20 , поросенок21, обезьяна22 , лошадь23 , были использованы для изучения неизвестных терапевтических эффектов. Мыши были наиболее предпочтительной модельной системой на животных для исследований каннабиноидов из-за их анатомического, физиологического и генетического сходства с людьми Они также имеют более короткий жизненный цикл, чем люди, с более легким обслуживанием и обильными генетическими ресурсами, что значительно облегчает мониторинг воздействия каннабиноидов на протяжении всего жизненного цикла. Система млекопитающих широко используется и успешно продемонстрировала, что КБД снимает судорожные расстройства1 , посттравматическое стрессовое расстройство9 , язвы полости рта25 и симптомы, подобные деменции Мышиная модель также позволила изучить социальное взаимодействие людей в сообществе, что чрезвычайно сложно у крупных животных и людей Несмотря на все преимущества системы моделирования животных, она по-прежнему является дорогостоящей и требует интенсивной терапии во время введения лекарств и сбора данных. Кроме того, существует тщательное изучение использования мышей в исследованиях из-за невоспроизводимости и плохой рекапитуляции человеческих условий из-за ограничений в экспериментальном дизайне и строгости Модели беспозвоночных традиционно давали отличительные преимущества по сравнению с моделями позвоночных. Значительные преимущества включают в себя простоту и низкую стоимость выращивания многих образцов и возможность исследователей контролировать несколько поколений генетически однородных популяций Недавнее исследование доказало, что плодовая муха, Drosophila melanogaster, является эффективной модельной системой насекомых для изучения фармакологических функций каннабиноидов в модуляции пищевого поведения Среди модельных систем насекомых авторы сосредоточились на табачном рогатом черве, Manduca sexta , также известном как каролинская сфинксовая моль или ястребиная моль, в качестве новой системы моделей насекомых для исследований каннабиноидов. Manduca sexta принадлежит к семейству Sphingidae. Насекомое является наиболее распространенным вредителем растений на юге Соединенных Штатов, где они питаются солнцестоятельными растениями. Модель насекомых имеет долгую историю исследований в области физиологии насекомых, биохимии, нейробиологии и исследований лекарственного взаимодействия. Исследовательский портфель Manduca sexta включает в себя проект последовательности генома, позволяющий понять на молекулярном уровне основные клеточные процессы Еще одним важным преимуществом этой модельной системы является ее большой размер, достигающий более мм в длину и 10 г в весе в течение дней развития личинок. Большой размер позволяет исследователям легко отслеживать морфологические и поведенческие изменения в режиме реального времени в ответ на лечение КБД. Кроме того, из-за размера были исследованы электрофизиологические реакции с брюшной нервной системой, включая ганглии, рассеченные из личинок без настроек микроскопа высокого разрешения. Уникальная особенность позволяет исследователям легко исследовать острые и долгосрочные реакции на введенный каннабиноид ы. Несмотря на такую универсальность, M. В году авторы впервые использовали систему моделирования насекомых для рассмотрения гипотезы о том, что каннабис эволюционировал для производства каннабидиола, чтобы защитить себя от насекомых-травоядных30, Результат ясно показал, что растения эксплуатировали КБД в качестве средства сдерживания питания и ингибировали рост насекомого-вредителя M. Исследование также продемонстрировало спасительное воздействие КБД на интоксицированных личинок этанола, определив потенциальный эффект этанола в качестве носителя КБД. Как показано, модельная система насекомых эффективно исследовала терапевтические эффекты каннабиноидов в течение недель с меньшими трудозатратами и затратами, чем другие системы животных. Хотя в модели насекомых отсутствуют каннабиноидные рецепторы т. Авторы этого исследования ранее работали с табачным роговым червем в качестве модельной системы для исследований каннабиноидов После тщательного рассмотрения преимуществ и рисков использования M. Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian. Рост личинок M. Manduca sexta как модельная система для изучения токсичности каннабиноидов На рисунке 1 показаны ключевые компоненты эксперимента CBD с использованием табачного рогатого червя Manduca sexta. Размер, вес и смертность насекомых измеряли с интервалом в 2 дня для мониторинга краткосрочных и долгосрочных реакций после лечения высокими дозами КБД 2 мМ. На рисунке 2 показано неблагоприятное воздействие КБД на рост и развитие насекомого. Насекомые, выращенные на искусственной диете AD , показали лучшие показатели роста. Однако высокая доза КБД 2 мМ вызывала потерю веса рисунок 2C и приводила к более высокому уровню смертности, чем у контрольных и транспортных групп рисунок 2D. Результаты показали, что высокая доза КБД 2 мМ в рационе наносит ущерб развитию насекомых и коррелирует с повышенной смертностью. Manduca sexta как модельная система для исследования неизвестных терапевтических функций каннабиноидов Рисунок 2 показал, что система моделирования насекомых эффективно отслеживает любые пагубные эффекты КБД путем мониторинга их морфологических и физиологических изменений. Чтобы изучить, улучшает ли КБД подвижность насекомых и пищевое поведение у личинок M. На рисунке 3A показано, что M. Личинки секста , выращенные на AD, содержащие 1 мМ КБД, потребляли по меньшей мере в 3,1 раза большую массу рациона, чем те, кто выращивался на диете с добавлением EtOH На рисунке 3B сравнивается мобильный индекс M. Рисунок 1 : Обобщенный процесс использования гусениц табачного рогового червя Manduca sexta в исследовании каннабидиола. А Яйца рогового червя вылупляются в отдельном большом контейнере со слоем искусственной диеты. B Шприц использовался для заполнения контейнера, чтобы предотвратить прилипание какой-либо диеты к бокам контейнеров. C 2-й звездный табачный роговой червь в пробирке объемом 50 мл с марлей. D 3-й звездный табачный роговой червь. E Длина и вес рогового червя мм и вес g измерялись на весах. F 5-й звездчатый табачный роговой червь, который подвергается экдисису и готов к окукливанию. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка. A Гусеницы табачного рогатого червя на 5-м , 3-м и раннем окукливании. Размер B , вес C и смертность D M. Рисунок 3 : Влияние каннабидиола КБД на пищевое поведение и подвижность насекомых. Исследование кормления показало, что высокие дозы КБД 2 мМ ингибируют рост насекомого и увеличивают смертность Модель насекомых также показала чувствительность к этанолу; однако КБД эффективно детоксифицировал токсичность этанола, увеличивая их выживаемость, потребление диеты и поведение при поиске пищи до уровней, аналогичных контрольной группе рисунок 3A , B Описанная система моделирования насекомых состоит из трех критических этапов: 1 обеспечение равномерного вылупления яиц M. Система моделирования насекомых позволила нам решить вопрос исследования в течение 25 дней, от подготовки средств массовой информации до сбора и интерпретации данных. Самое главное, что система насекомых давала последовательные результаты от больших образцов. Чтобы обеспечить успех культивируемых личинок M. Если контейнер не выдерживает высокую влажность, искусственная диета, содержащая каннабиноиды, будет быстро высушена, что приведет к досрочному прекращению эксперимента из-за смерти насекомых. Однако в закрытой системе высокая влажность обеспечивает идеальные условия для грибковой вспышки, которую трудно искоренить. Авторы предлагают использовать перфорированную крышку или марлю для обеспечения достаточной циркуляции воздуха при минимизации потерь воды из среды. В естественной среде гусеницы предпочитают питаться на абаксиальной стороне листа, где влажность выше, при этом трихомы меньше, чем площадь поверхности листа Таким образом, размещение контейнера вверх ногами было исключительно полезным при обеспечении зоны убежища или ползающей деревянной палки. Это также помогает удалить фекалии из области среды и облегчает сбор отходов для дальнейших анализов. Поскольку рецепторы каннабиноидов отсутствуют в инвертабратах35, табачный роговой червь M. Тем не менее, с многочисленными преимуществами, продемонстрированными в нашем пилотном исследовании, насекомое следует рассматривать как новую модельную систему для изучения фармакологических функций каннабиноидов, особенно исследований, включающих фармакокинетику, не опосредованную рецепторами CB. Относительно короткий жизненный цикл M. Park, S. To learn more about our GDPR policies click here. If you want more info regarding data storage, please contact gdpr jove. You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions jove. Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login. You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free. To get started, a verification email has been sent to email institution. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your 'Spam' folder. Your access has now expired. Provide feedback to your librarian. If you have any questions, please do not hesitate to reach out to our customer success team. Login processing JoVE Journal Biology. Препарат рогового червя и лечение каннабидиолом Получить жизнеспособных М. Таблицу материалов. Поместите яйца рогатого червя в полистирольную чашку Петри со слоем искусственной диеты AD на основе зародышей пшеницы и перенесите яйца в камеру выращивания насекомых см. Выращивайте их в камере выращивания насекомых см. Запишите начальную массу в граммах каждой группы личинок перед введением личинок в их соответствующий рацион и вычтите массу личинок при каждом измерении из начальной массы, чтобы определить прирост массы между стадиями развития личинок до тех пор, пока личинки не завершат стадию окукливания. Запишите количество дней между стадиями развития звезды, чтобы понять различия во временных рамках развития между стадиями роста личинок до окукливания на каждой диете. Соберите материал для будущих испытаний в зависимости от целей эксперимента например , расчет скорости накопления КБД, микробное профилирование. Важно бережно обращаться с насекомым в хрупкие периоды аполиза или экдиза. Вынимая личинок из емкости, аккуратно захватите основное тело насекомого плоским кончиком и широкими щипцами и не заставляйте удалять внешний слой кожи, когда насекомое находится в процессе линьки. Измерьте потребление диеты31 , взвесив потерю контейнера между личинками 1-й звезды и окукливанием. Запишите начальные граммы диеты в начале эксперимента и вычтите начальное количество из оставшегося количества рациона, когда личинки вступят в полную стадию окукливания. Фекалии и другой мусор т. Для измерений подвижности позвольте подвергшемуся насекомому акклиматизироваться в камерной среде в течение не менее 5 мин и отслеживать расстояния31 , которые прошли три группы насекомых 5-й звезды длиной мм с использованием автоматизированной компьютеризированной камеры кондиционирования страха см. Таблицу материалов , которое генерирует индекс движения. Статистический анализ Проанализируйте различия в росте личинок то есть размере и весе и индексе движения с помощью односторонней ANOVA с помощью пост-теста Туки Используйте тест log-rank Mantel-Cox 33 для сравнения кривых выживания. Play Video. Cite this Article Park, S. Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account. Continue with Shibboleth or Forgot Password? Please enter your email address so we may send you a link to reset your password. You might already have access to this content! Please enter your Institution or Company email below to check. Please enter an institutional email address. Check access. Create Account. Forgot Password? Reset Password. Phone number. Request trial. Thank You! A JoVE representative will be in touch with you shortly. Waiting for verification email? Please click here to activate your free 2-hour trial. If you do not wish to begin your trial now, you can log back into JoVE at any time to begin. Enable Javascript for audio controls. Get cutting-edge science videos from J o VE sent straight to your inbox every month. We use cookies to enhance your experience on our website. Continue Learn more Close.

Базель бесплатные пробы Каннабис, Марихуана

Волгоград купить кокаин

Базель бесплатные пробы Каннабис, Марихуана