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4灭菌过程完成后，打开灭菌室的门，等五分钟然后将生物指示剂从容器中取出；（提示：将生物指示剂BT21从灭菌后的容器中取出时要带上防护眼镜和手套）5在55~62℃的环境下培养安瓿瓶，时长不超过48小时；（每次要用一支没有灭过菌的同批次生物指示剂，在相同样条件下培养作为阳性对照）6每10小时观察一次，如果生长指示培养液的颜色变黄说明这次灭菌过程失败，如果48小时后，指示剂内溶液没有颜色变化，证明结果呈阴性（这次灭菌过程是可接受的），同时阳性对照的生物指示剂应显示黄色。
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