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1.制备凝胶:琼脂糖浓度%,加入5甲醛凝胶电泳缓冲液和甲醛,使两者的终浓度分别为1甲醛凝胶电泳缓冲液和/L;2.取一定量的RNA样品,加入5甲醛凝胶电泳缓冲液,37%甲醛,去离子甲酰胺,稍微离心混匀后置65℃水浴15min,然后迅速置于冰浴中5min;加入加样缓冲液,稍微离心;3.上样前,凝胶在1甲醛凝胶电泳缓冲液预电泳5min(电压5V/cm);4.将样品加到凝胶样品孔,以4V/cm电压进行电泳;每隔30min将阴阳电极液混匀,然后继续电泳;5.电泳结束后,将胶放入/ml的EB溶液中,染色30min;紫外观察。
故障现象:真空度不稳定,周期性波动产生原因:(1)喷嘴或水泵叶轮被杂物部分堵塞;(2)泵的尾管下端水封不够,大气中的气体从尾管进入;(3)电压不稳;(4)水泵叶轮松动。
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